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广东省鲜食橄榄品种的遗传多样性与亲缘关系分析

作　者: 王燕平
导　师: 周俊辉; 周志钦
学　校: 西南大学
专　业: 果树学
关键词: 橄榄 AFLP 遗传多样性 亲缘关系
分类号: S667.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


橄榄(Canarium album Raeusch)又名黄榄、白榄,属于橄榄科(Burseraceae)橄榄属(Canarium L.),是我国著名的亚热带特产水果,具有很高的经济和药用价值。经过长期的自然选择和人工选育,我国的橄榄形成了众多的栽培品种,种质资源十分丰富。广东是我国橄榄的主要栽培区,前人对广东橄榄种质资源做了一系列研究,但多集中在品种资源的调查、植物学特征观测和果实生理生化分析等。由于不同地区间相互引种,致使橄榄品种间亲缘关系复杂,增加了橄榄资源调查、收集、保存以及谱系关系鉴定的难度,因此有必要从DNA分子水平上对橄榄种质的遗传多样性和亲缘关系进行研究。本研究以广东省鲜食橄榄品种为材料,采用AFLP技术,在建立较稳定的橄榄AFLP分析体系的基础上,筛选出6对扩增谱带清晰、多态性好的引物组合,对63个广东鲜食橄榄品种进行了遗传多样性及亲缘关系分析,主要研究结果如下。1通过对橄榄AFLP反应体系各因素进行系统研究,建立了适合橄榄的AFLP分析的酶切连接体系、预扩增体系和选择性扩增体系。2从64对引物组合中筛选出6对谱带清晰、多态性高地引物组合：E/AAC-M/CAT; E/AAC-M/CTT; E/ACA-M/CAA; E/AGG-M/CAA; E/ACC-M/CAA; E/ACT-M/CAT。对63个橄榄品种进行扩增分析,共扩增出417条电泳谱带,且全部为多态性带,多态性比率达100%,揭示了橄榄种质资源丰富的遗传多样性。3使用NTSYSpc2.10a软件,利用UPGMA供试橄榄品种进行聚类,对其遗传多样性进行分析,建立了广东鲜食橄榄品种资源AFLP聚类图。根据聚类结果将63份供试橄榄资源分成为7大类群。

全文目录


摘要  7-9
Abstract  9-11
第1章 文献综述  11-23
  1.1 橄榄种质资源研究现状  11-13
    1.1.1 橄榄形态特征与分类地位  11
    1.1.2 橄榄的起源、栽培历史与现代栽培分布  11-12
    1.1.3 橄榄种质资源研究进展  12-13
    1.1.4 橄榄的经济价值与利用现状  13
    1.1.5 广东省橄榄种质资源研究中仍存在的问题  13
  1.2 现代分子标记技术及其在植物种质资源研究中的应用  13-19
    1.2.1 RFLP标记  14-15
    1.2.2 RAPD标记  15
    1.2.3 SCAR标记  15
    1.2.4 SSR标记  15-16
    1.2.5 ISSR标记  16
    1.2.6 cpSSR标记  16
    1.2.7 AFLP标记  16-19
  1.3 AFLP技术在果树种质资源研究中的应用  19-22
    1.3.1 遗传多样性和亲缘关系分析  19-20
    1.3.2 种质资源鉴定  20
    1.3.3 遗传图谱的构建  20-21
    1.3.4 目的基因定位  21
    1.3.5 辅助育种  21-22
  1.4 展望  22-23
第2章 引言  23-25
  2.1 研究目的和意义  23-24
  2.2 研究技术路线  24-25
第3章 材料与方法  25-33
  3.1 材料  25-26
    3.1.1 材料来源  25-26
    3.1.2 引物和接头  26
    3.1.3 主要试剂  26
  3.2 实验方法  26-33
    3.2.1 橄榄基因组DNA的提取  26-27
    3.2.2 橄榄基因组DNA质量检测  27
    3.2.3 橄榄AFLP技术体系的建立  27-30
    3.2.4 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳  30-32
    3.2.5 引物筛选  32
    3.2.6 电泳图谱分析  32-33
第4章 结果与分析  33-45
  4.1 橄榄基因组DNA提取  33-34
    4.1.1 DNA提取方法的比较  33
    4.1.2 橄榄基因组DNA质量检测  33-34
  4.2 橄榄AFLP体系的建立  34-40
    4.2.1 酶切体系的建立  34-36
    4.2.2 连接体系的建立  36-38
    4.2.3 预扩增体系的建立  38-39
    4.2.4 选择性扩增体系的建立  39-40
  4.3 引物筛选及应用  40-41
  4.4 供试橄榄品种的AFLP分析  41-45
    4.4.1 多态性分析  41-42
    4.4.2 遗传相似性分析  42-43
    4.4.3 聚类分析  43-45
第5章 讨论  45-51
  5.1 影响橄榄AFLP技术体系关键因素  45-48
    5.1.1 DNA模板的质量  45
    5.1.2 酶切体系  45-46
    5.1.3 连接体系  46
    5.1.4 扩增体系  46
    5.1.5 电泳及银染过程中应注意的问题  46-48
  5.2 AFLP标记与橄榄种质资源研究  48
  5.3 橄榄的遗传多样性和品种间遗传关系  48-51
    5.3.1 遗传多样性  48-49
    5.3.2 品种间的亲缘关系  49-51
第6章 结论  51-53
参考文献  53-59
附录一  59-61
附录二  61-62
致谢  62-63
发表论文及参研课题  63-64
附录  64

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 热带及亚热带果类 > 橄榄（青果）、乌榄
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