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黄芩MYB转录因子功能初步研究

作　者: 伍翀
导　师: 黄璐琦; 袁媛
学　校: 武汉工业学院
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 黄芩 MYB转录因子功能 ABA GA3
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

黄芩是一种常用的中药材，其主要活性成分为黄酮化合物，包括黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素等。药用植物有效成分一般为次生代谢物，其合成水平是植物在发育调控下及各种生物或非生物诱发因子的诱导作用下，由其合成途径中的多个酶活性表达所决定，受诱发因子作用下的信号传递、转录因子活性、重要合成基因表达等多个环节的影响。本文以黄芩MYB转录因子为对象，通过生物信息学方法及表达谱分析等方式初步探索了激素（赤霉素及脱落酸)、黄芩MYB转录因子基因及黄酮代谢途径相关基因之间的关系。本文研究成果如下：（1）从黄芩cDNA文库中通过生物信息学方法，包括Blast比对分析、GO注释、InterProScan结构域分析以及系统发育分析，找到了10个R2R3-MYB及7个single-MYB转录因子候选基因，并推测了它们的功能。读码框分析发现12个黄芩MYB候选基因具有完整的读码框。（2）以ABA及GA3处理黄芩幼苗，结果表明SbMYB5、SbMYB7、SbMYB8、SbMYB12及SbMYB13在ABA处理后表达量均发生显著变化，说明它们可能均受ABA调控。SbMYB2、SbMYB5、SbMYB7及SbMYB8在GA3处理后表达量显著变化，说明它们可能响应GAs信号，对下游基因进行调节。选取其中3个R2R3-MYB型MYB转录因子进行后续研究。（3）亚细胞定位分析结果表明SbMYB7及SbMYB8均分布在细胞核中，而SbMYB2在细胞核及细胞器中均有分布。（4）转录活性分析结果表明SbMYB2、SbMYB7及SbMYB8均具有转录激活活性。（5）构建了植物表达载体转化拟南芥，得到了T1代种子。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第1章绪论  9-19
  1.1. 黄芩概述  9
  1.2. MYB 转录因子的结构  9-10
  1.3. MYB 转录因子的分类与进化  10-11
  1.4. MYB 的功能  11-16
    1.4.1. 调节植物发育分化  11-12
    1.4.2. 环境信号响应  12-13
    1.4.3. 激素响应  13
    1.4.4. 调节植物次生代谢  13-16
  1.5. 本课题研究的目的意义及主要内容  16-19
第2章实验材料和试验方法  19-45
  2.1. 实验材料  19-21
    2.1.1. 植物材料  19
    2.1.2. 菌种及质粒  19
    2.1.3. 酶与试剂  19-20
    2.1.4. 常用培养基和溶液  20
    2.1.5. 主要仪器和设备  20-21
  2.2. 实验方法  21-45
    2.2.1. 序列分析  21-22
    2.2.2. 表达谱分析  22-25
    2.2.3. 亚细胞定位分析  25-34
    2.2.4. 转录活性分析  34-40
    2.2.5. 功能验证  40-45
第3章实验结果  45-68
  3.1. 序列分析  45-53
  3.2. 表达谱分析  53-60
  3.3. 亚细胞定位  60-65
  3.4. 转录激活验证  65-67
  3.5. 功能验证  67-68
第4章讨论  68-72
参考文献  72-78
致谢  78-79
附录  79-85
攻读学位期间的研究成果  85

黄芩MYB转录因子功能初步研究

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