学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

水稻白叶枯病抗病基因xa5、Xa7、Xa23分子标记的辅助选择

作　者: 何翎
导　师: 王忠文
学　校: 广西大学
专　业: 植物病理学
关键词: 水稻白叶枯病抗病基因抗性鉴定功能标记分子标记辅助选择
分类号: S511
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 123次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

水稻白叶枯病是世界水稻生产种植中最严重的细菌性病害之一,目前种植抗病品种被认为是其防治上最为经济最为有效的措施,因此白叶枯病有效抗病基因及其分子标记的辅助选择对水稻生产发展具有重要的意义。本课题针对广西常用育种亲本的白叶枯病抗病性、广西抗白叶枯病有效抗病基因、有效抗病基因分子标记的特异性以及辅助选择等内容展开了系统的研究。研究结果如下：利用广西白叶枯病菌优势致病型Ⅳ型菌对包含国际抗白叶枯病单基因系(近等基因系)品种在内的72份供试亲本进行抗性鉴定,明确了基因xa5、Xa7和Xa23对白叶枯病菌Ⅳ型菌的有效抗病性,以及目前广西抗源亲本稀缺急需引进携带有效抗病基因xa5、Xa7、Xa23供体亲本的育种现状；利用隐性抗病基因xa5的序列及该等位基因隐性与显性之间两个碱基的差异,开发了xa5基于PCR技术辅助选择的STS功能标记M-xa5；利用分子标记M-xa5、M5、M-Xa23对72份供试亲本进行标记特异性检测,确认了标记M-xa5、M-Xa23对相应抗病基因xa5、Xa23的特异识别性,以及分子标记M5对抗病基因Xa7的非特异性；利用分子标记M-Xa23对Xa23供体亲本CBB23与普通感病亲本测253的杂交F2代分离群体进行分子标记辅助选择,鉴别出231个具有200bp特异性短条带(携抗病基因Xa23)的抗性单株,选择农艺性状优良的20个抗性单株的F3代进行分子标记(M-Xa23)基因型和大田接种(白叶枯病菌Ⅳ型菌)表型双重鉴定,吻合度高达100%。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-11
1 前言  11-19
  1.1 水稻白叶枯病的概述  11
  1.2 水稻白叶枯病抗病性的遗传及抗病基因定位  11-15
    1.2.1 水稻白叶枯病抗病性的遗传  11-12
    1.2.2 水稻白叶枯病抗病基因的定位  12-15
  1.3 水稻白叶枯病抗病基因的克隆  15-17
  1.4 水稻白叶枯病抗病基因分子标记的应用  17-18
  1.5 本研究的目的及意义  18-19
2 材料与方法  19-25
  2.1 供试材料  19-20
    2.1.1 抗性鉴定的供试水稻亲本  19
    2.1.2 Xa23辅助选择群体构建的杂交亲本材料  19-20
    2.1.3 供试白叶枯病菌  20
    2.1.4 供试试剂  20
    2.1.5 供试引物  20
  2.2 试验方法  20-25
    2.2.1 供试水稻亲本的种植  20-21
    2.2.2 供试菌株的培养  21
    2.2.3 大田白叶枯病菌的接种  21
    2.2.4 亲本抗性鉴定  21
    2.2.5 供试白叶枯病菌致病型鉴定  21-22
    2.2.6 CTAB改良法提取水稻亲本DNA  22-23
    2.2.7 抗病基因xa5功能标记的开发  23
    2.2.8 水稻亲本DNA的PCR扩增  23-24
      2.2.8.1 PCR扩增体系  23-24
      2.2.8.2 PCR扩增反应  24
    2.2.9 琼脂糖胶电泳  24
    2.2.10 M-xa5扩增产物测序  24-25
    2.2.11 xa5、Xa7、Xa23分子标记对供试亲本特异性检验  25
    2.2.12 抗病基因Xa23辅助选择群体的构建及分子标记的辅助选择  25
3 结果与分析  25-38
  3.1 供试菌转化毒性验证  25-26
  3.2 水稻亲本抗性鉴定  26-28
  3.3 引物设计  28-30
  3.4 M-xa5扩增产物测序  30-33
  3.5 xa5分子标记M-xa5对供试亲本特异性的检测  33
  3.6 Xa7分子标记M5对供试亲本特异性的检测  33-35
  3.7 Xa23分子标记M-Xa23对供试亲本特异性的检测  35
  3.8 M-Xa23对测253与CBB23杂交F_2代群体的辅助选择  35-37
  3.9 测253与CBB23杂交F_3代基因型与田间表型的检测  37-38
    3.9.1 测253与CBB23杂交F_3代基因型检测  37
    3.9.2 测253与CBB23杂交F_3代表型鉴定  37-38
4 小结与讨论  38-43
  4.1 水稻亲本对白叶枯病Ⅳ型菌的抗性鉴定  38-39
  4.2 抗病基因xa5分子标记的开发与验证  39-40
    4.2.1 抗白叶枯病基因xa5的利用现状  39-40
    4.2.2 抗白叶枯病基因xa5功能标记开发的意义  40
  4.3 xa5、Xa7、Xa23分子标记对供试亲本特异性的检测  40-41
  4.4 抗病基因Xa23分子标记的辅助选择  41-43
    4.4.1 分子标记辅助选择效率的研究现状  41-42
    4.4.2 抗病基因Xa23分子标记辅助选择的应用前景  42-43
5 全文结论与讨论  43-45
  5.1 全文结论  43
  5.2 全文讨论  43-44
  5.3 本文创新点  44
  5.4 问题与展望  44-45
致谢  45-46
参考文献  46-51
附录A：亲本表型图  51-55
附录B：试剂配制配方  55-56
附录C：测253与CBB23杂交F_2代分离群体947个单株基因型图  56-61
附录D：攻读硕士学位期间参加科研、学术活动和发表论文情况  61

水稻白叶枯病抗病基因xa5、Xa7、Xa23分子标记的辅助选择

内容摘要

全文目录

相似论文