学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

中国尖音库蚊复合组分子系统学的研究

作　者: 邢丹
导　师: 赵彤言
学　校: 中国人民解放军军事医学科学院
专　业: 病原生物学
关键词: 尖音库蚊复合组分子系统学
分类号: R384.1
类　型: 博士论文
年　份: 2013年
下　载: 26次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

尖音库蚊复合组Culex pipiens Complex是全球性分布的媒介蚊虫复合组。在我国，该复合组包括尖音库蚊指名亚种、致倦库蚊、淡色库蚊和骚扰库蚊。我国已知前三者的分布情况，其中新疆地区是典型的尖音库蚊的孳生地，北方地区为淡色库蚊，南方地区为致倦库蚊，并在北京、沈阳、上海地区发现骚扰库蚊。该复合组种类遍布于全国，而且是全球重要的疾病传播媒介，在医学上具有重要研究价值，其中尖音库蚊亚种的淡色库蚊和致倦库蚊是我国斑氏丝虫病的主要传播媒介。该复合组还是我国广大城乡的优势蚊虫，其中淡色库蚊和致倦库蚊分别是我国北方和南方常见蚊种,是城镇入室吸血骚扰的主要蚊种。该复合组的分类是蚊虫分类学研究中公认的世界性难题。国内外学者对该复合组分类地位、鉴别形态和地理区划做了不少研究，该复合组的各亚种形态颇为相似，从外形上很难鉴别，其雄蚊阳茎侧板中叶的形态特征是种下分类的重要依据，且雄蚊阳茎DV/D值是该复合组的重要形态学鉴别特征。然而对于雌性成蚊，仍然，没有可鉴别的形态特征，同时该复合组成员之间的进化和亲缘关系也还没有深入的研究。随着分子生物学技术，尤其是PCR技术和核酸自动测序技术的迅速发展，成熟的基因扩增及测序技术，结合比较发达的网络与信息技术，给我们提供了以DNA为基础的分子系统分类学的发展。较传统的形态分类学而言，分子系统分类学可以利用小块生物体组织进行鉴别，能够在生物的不同生长阶段鉴别物种；并能够对传统分类系统进行验证，弥补其不足。现已被广泛用于研究昆虫系统发育、行为进化、种群遗传变异和分化，以及区分近缘种的鉴别，种下分类单元的鉴定等方面。多种分子标记的出现，为尖音库蚊复合组蚊虫在系统分类学、种群遗传学、种群生态学等方面的研究提供了新的思路和方法，从而能更好地阐明媒介蚊虫和疾病传播的关系，为蚊媒和蚊媒病的防治提供重要的参考。本研究依据外部形态分类鉴定及前人工作的基础上，以我国尖音库蚊复合组中的四亚种为研究对象，综合多个分子标记，利用分子生物学技术对其分子标记的基因序列进行研究，通过测定基因序列，对每个分子标记进行详细的分析，构建了该复合组在分子水平的系统发育关系。研究结果如下：1.15个尖音库蚊复合组种群中COⅠ和COⅡ基因序列获得的长度为633bp和626bp，两者均表现出A+T含量高于C+G含量的趋向性和氨基酸的偏向性，它们的各序列之间的差异度与遗传距离均呈线性关系，且转换大于颠换，碱基替换未达到饱和，说明尖音库蚊复合组种间存在较大的进化潜能。2.15个尖音库蚊复合组种群中COⅠ和COⅡ基因序列遗传距离范围均在0～0.013之间，说明该复合组变异性较低，遗传相似性较高。聚类分析结果表明COⅠ和COⅡ基因在尖音库蚊复合组种内十分保守，不适合在分子系统学研究中用于作亚种阶元的分子特征指标，从另一个角度表明，由于COⅠ和COⅡ基因序列较为相似，因此可以看出尖音库蚊、淡色库蚊、致倦库蚊和骚扰库蚊仍属于同一个种。3.30个尖音库蚊复合组种群中AChE2基因序列获得的长度为925bp，其也表现出A+T含量趋向性和氨基酸的偏向性，它们的各序列之间的差异度与遗传距离也呈线性关系，且转换大于颠换，碱基替换未达到饱和。4.30个尖音库蚊复合组种群中AChE2基因序列遗传距离范围均在0～1.292之间，说明该复合组变异性较大。聚类分析结果表明AChE2基因序列在尖音库蚊复合组蚊虫亚种阶元分类上具有重叠交叉现象，不能与传统形态学分类统一起来，说明就AChE2基因来说，我国尖音库蚊复合组蚊虫分化还没有达到可以通过该序列区分的程度。5.34个地区的尖音库蚊复合组蚊虫除新疆霍城的尖音库蚊外均有wolbachia感染，感染率在24%～100%。说明我国尖音库蚊复合组地理种群内wolbachia感染现象十分普遍，且其分布不均匀，感染情况呈现多样性。其中32个地区中测得的wsp基因序列差异较小，经多序列比对排齐后完全一致。说明我国尖音库蚊复合组亲缘关系很近，同源性较高。6.22个地理采集点经雄蚊阳茎形态、DV/D值与蚊虫生存环境及自育性综合分析，认为黑龙江黑瞎子岛、甘肃嘉峪关、甘肃张掖、甘肃民勤、和甘肃武威的尖音库蚊复合组蚊虫为尖音库蚊，并确定在内蒙古满洲里发现骚扰库蚊新纪录。7.22个地区雄蚊阳茎DV/D值与纬度之间呈强负相关，运用其回归方程验证了30°左右为我国淡色库蚊与致倦库蚊地理分布的理论分界线，说明尖音库蚊复合组雄蚊阳茎DV/D值随地理纬度不同而变化。8.25个尖音库蚊复合组地理种群在9个微卫星位点中每个位点的平均等位基因数为5.92，平均多态信息含量为0.697，平均香农多样性指数为1.236，平均观察杂合度为0.471，说明我国尖音库蚊复合组种群内的遗传变异比较丰富，为高度多态性，属高度杂合群体，有较大的遗传潜力，能反映种间的遗传多样性信息。9.9个微卫星位点在25个尖音库蚊复合组种群进行哈迪温伯格平衡检验，除Cx2、Cp3和Cx7位点外均偏离哈温平衡；它们的平均固定指数为0.224，平均遗传分化系数为0.228，说明群体间并非随机交配，存在高度的遗传分化。基因流的平均值为1.008，说明种群间的遗传相似性不高，而且所选的尖音库蚊复合组群体存在或者过去某个时期发生基因交流。10.25个尖音库蚊复合组种群间的遗传距离介于0.089～1.775之间，说明群体间遗传差异较大。聚类分析结果表明，9个位点的微卫星标记基本能够正确的反映尖音库蚊复合组种群内各群体间的遗传关系，能够较为准确的描述各群体间的关系，及该复合组和地理分布有一定程度的关联。

全文目录

中英文缩略词表  5-6
摘要  6-9
Abstract  9-14
前言  14-19
材料与方法  19-40
  1. 材料  19-22
  2. 方法  22-40
结果  40-121
  1. 我国尖音库蚊复合组COⅠ基因COⅡ基因的分子系统学研究  40-68
  2. 我国尖音库蚊复合组——ACHE2 基因序列结果  68-83
  3. 我国尖音库蚊复合组感染WOLBACHIA的WSP基因序列结果  83-88
  4. 我国尖音库蚊复合组雄蚊阳茎DV/D值测定及研究结果  88-94
  5. 我国尖音库蚊复合组微卫星DNA遗传多样性分析结果  94-121
讨论  121-134
  1. 我国尖音库蚊复合组COⅠ、COⅡ基因的研究  121-123
  2. 我国尖音库蚊复合组ACHE2 基因的研究  123-125
  3. 我国尖音库蚊复合组感染WOLBACHIA的研究  125-127
  4. 我国尖音库蚊复合组雄性外生殖器形态类型及其变异与地理分布的关系  127-128
  5. 我国尖音库蚊复合组遗传多样性的微卫星分析  128-134
结论  134-135
参考文献  135-145
个人简历  145-146
致谢  146-147
综述  147-156
  参考文献  153-156
发表论文一  156-164
发表论文二  164-169

中国尖音库蚊复合组分子系统学的研究

内容摘要

全文目录

相似论文