学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

天山山间盆地两大盐湖放线菌多样性及聚酮合酶基因多样性研究

作　者: 贾晓宇
导　师: 张利莉
学　校: 塔里木大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 巴里坤盐湖七角井盐湖免培养方法可培养方法聚酮合酶多样性
分类号: Q93-3
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 77次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

嗜盐放线菌是目前进行潜在新物种和新产物发掘研究的良好材料,嗜盐放线菌能产生胞外多糖及其它聚合物,蛋白含量极高,也产生大量的抗生素、维生素等。嗜盐放线菌将是筛选新的生物活性物质,特别是新抗生素的重要资源菌。我国西部地区有大面积的盐湖和盐碱地,尤其是新疆、青海等地区存在丰富的高盐环境,该研究以新疆哈密境内巴里坤、七角井两大盐湖土样为研究对象,通过构建16SrRNA基因克隆文库,对两大盐湖免培养放线菌多样性进行分析。此研究可以全面挖掘盐湖微生物的物种资源,从而客观认识盐湖环境微生物的物种多样性及差异,同时也可以积累有用的物种资源信息,为盐渍化环境的生态修复,极端环境放线菌资源的保护和利用提供前提和保障。(1)该文对两大盐湖土壤总DNA进行16SrDNA基因扩增,构建16SrDNA基因文库,并对文库中的插入片段进行RFLP(限制性片段长度多态性,Restriction Fragment Length Polymorphism)分析并测序。结果表明：巴里坤盐湖232个克隆、七角井盐湖176个克隆均分布于放线菌纲(Actinobacteria)的放线菌亚纲(Actinobacteridae)、酸微菌亚纲(Acidimicrobidae)和红色杆菌亚纲(Rubrobacteridae);优势放线菌分别为放线菌亚纲Iamiaceae的Iamia.假诺卡氏科的拟无枝酸菌属(Amycolatopsis);分别有81.0%,58.3%的克隆序列与已有效发表菌株的序列相似性小于97%,极有可能代表着放线菌新的类群。(2)可培养采用不同盐浓度的8种选择性培养基分离放线菌,巴里坤盐湖和七角井盐湖分别分离到20、35株放线菌,巴里坤盐湖20株嗜盐放线菌分属在6个属,分别是链霉菌属(Streptomyces)、拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)、涅斯捷连科氏菌属(Nesterenkonia)、放线多孢菌属(Actinopolyspora)、纤维单胞菌属(Cellulomonas)和分支杆菌属(Mycobacterium);七角井盐湖35株嗜碱放线菌分属7个属,以链霉菌属(Streptomyces)和拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)为主,其他的为糖单孢菌属(Saccharomonospora)、糖多孢菌属(Saccharopolyspora)、考克氏菌属(Kocuria)、短状杆菌属(Brachybacterium)、放线多孢菌属(Actinopolyspora)。(3)对已获得纯培养的55株菌株进行聚酮合酶基因的筛选,检测结果得出阳性率为43.6%,其中链霉菌属和拟诺卡氏菌属是具有聚酮合酶基因主要的菌源。以上结果表明天山山间盆地两大盐湖中放线菌具有较高的多样性,并蕴藏着丰富的聚酮合酶基因类型,值得深入研究和开发。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
第一章文献综述  9-20
  1.1 极端环境中放线菌的研究  9-10
  1.2 微生物多样性研究概况  10-16
    1.2.1 可培养方法研究  11-12
    1.2.2 免培养方法研究  12-16
  1.3 嗜盐放线菌的分离  16-17
  1.4 放线菌聚酮合酶基因研究概况  17-18
  1.5 论文的设计思路  18-20
    1.5.1 前言  18
    1.5.2 设计思路  18
    1.5.3 研究方案  18-19
    1.5.4 技术路线  19-20
第二章天山山间盆地两大盐湖免培养放线菌多样性研究  20-32
  2.1 材料及方法  20-23
    2.1.1 材料  20
    2.1.2 方法  20-23
  2.2 结果与分析  23-30
    2.2.1 两大盐湖免培养放线菌物种多样性分析  23-30
  2.3 讨论  30-32
第三章天山山间盆地两大盐湖可培养放线菌多样性研究  32-41
  3.1 材料与方法  32-35
    3.1.1 分离培养方法  32-33
    3.1.2 初步鉴定放线菌种类  33-35
  3.2 结果与分析  35-39
    3.2.1 两大盐湖可培养放线菌物种多样性  35-39
  3.3 讨论  39-41
第四章两大盐湖聚酮合酶基因多样性研究  41-46
  4.1 材料与方法  41-43
    4.1.1 两大盐湖可培养放线菌聚酮合酶基因多样性分析研究  41
    4.1.2 实验用试剂  41
    4.1.3 菌株DNA的提取  41-43
  4.2 结果与分析  43-46
    4.2.1 两大盐湖放线菌聚酮合酶基因图谱分析  43-44
    4.2.2 结果与分析  44-46
第五章结论与讨论  46-50
  5.1 结论  46
  5.2 讨论  46-49
  5.3 展望  49-50
参考文献  50-54
致谢  54-55
作者简介  55

天山山间盆地两大盐湖放线菌多样性及聚酮合酶基因多样性研究

内容摘要

全文目录

相似论文