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RNA干扰抑制胸腺瘤表皮生长因子受体表达的实验研究

作 者: 刘鸿程
导 师: 徐志云
学 校: 第二军医大学
专 业: 外科学
关键词: 胸腺瘤 表皮生长因子受体 重症肌无力 突变 RNA干扰 小发夹RNA EL-4细胞株
分类号: R736.3
类 型: 博士论文
年 份: 2007年
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内容摘要


目的:研究RNA干扰抑制胸腺瘤表皮生长因子受体表达对胸腺瘤生物学特性的影响。方法:免疫组化检测EGFR在胸腺瘤的表达、PCR扩增和基因测序检测胸腺瘤组织中EGFR基因突变。利用基因重组技术构建H1启动子驱动的表达针对EGFR的siRNA的重组腺病毒AdshEGFR,分别从体外、体内转染EL-4细胞,检测EGFRmRNA及蛋白变化,并观察EL-4细胞增殖、凋亡情况。结果:胸腺瘤EGFR阳性表达率与正常胸腺组织相比有统计学意义。EGFR阳性表达率随Masaoka分期增高而升高。EGFR表达与胸腺瘤是否合并重症肌无力无明显相关。胸腺瘤组织中未检测到EGFR基因突变。小发夹RNA质粒表达载体的EL-4细胞中EGFR表达量明显减少,细胞生长减慢,抑制肿瘤细胞增殖,促进凋亡结论:EGFR在胸腺瘤的发生、发展过程中起重要作用。可以作为Masaoka分期的补充,能较为准确判断胸腺瘤的侵袭性。胸腺瘤EGFR的表达不是由于EGFR基因的关键功能位点的突变所导致。EGFR小发夹RNA质粒载体可显著抑制EL-4细胞中的EGFR基因的表达,抑制EL-4细胞的增殖,促进凋亡,抑制肿瘤的生长。

全文目录


摘要  4-6
主要英文缩写  6-7
中文摘要  7-11
英文摘要  11-16
前言  16-22
  一、研究背景:  16-17
  二、研究思路:  17-18
  三、课题的主要研究内容  18
  参考文献:  18-22
第一部分:表皮生长因子受体胸腺瘤中的表达及其临床意义  22-46
  材料和方法  22-29
  结果  29-32
  附图  32-34
  讨论  34-40
  参考文献  40-46
第二部分:表皮生长因子受体靶向RNA 干扰的重组腺病毒构建  46-79
  材料  47-48
  方法  48-63
  结果  63-74
  讨论  74-77
  参考文献  77-79
第三部分:RNA 干扰对胸腺瘤细胞株EL-4 的生物学特性体外研究  79-97
  材料与方法  79-84
  结果  84-91
  讨论  91-94
  参考文献  94-97
第四部分:RNA 干扰对胸腺瘤细胞株EL-4 的生物学特性体内研究  97-113
  材料与方法  97-102
  结果  102-108
  讨论  108-110
  参考文献  110-113
全文总结  113-114
综述:胸腺瘤分子标志物的研究进展  114-127
致谢  127-128
附录  128

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 内分泌腺肿瘤 > 胸腺肿瘤
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