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RNA干扰抑制胸腺瘤表皮生长因子受体表达的实验研究
作 者: 刘鸿程
导 师: 徐志云
学 校: 第二军医大学
专 业: 外科学
关键词: 胸腺瘤 表皮生长因子受体 重症肌无力 突变 RNA干扰 小发夹RNA EL-4细胞株
分类号: R736.3
类 型: 博士论文
年 份: 2007年
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内容摘要
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目的:研究RNA干扰抑制胸腺瘤表皮生长因子受体表达对胸腺瘤生物学特性的影响。方法:免疫组化检测EGFR在胸腺瘤的表达、PCR扩增和基因测序检测胸腺瘤组织中EGFR基因突变。利用基因重组技术构建H1启动子驱动的表达针对EGFR的siRNA的重组腺病毒AdshEGFR,分别从体外、体内转染EL-4细胞,检测EGFRmRNA及蛋白变化,并观察EL-4细胞增殖、凋亡情况。结果:胸腺瘤EGFR阳性表达率与正常胸腺组织相比有统计学意义。EGFR阳性表达率随Masaoka分期增高而升高。EGFR表达与胸腺瘤是否合并重症肌无力无明显相关。胸腺瘤组织中未检测到EGFR基因突变。小发夹RNA质粒表达载体的EL-4细胞中EGFR表达量明显减少,细胞生长减慢,抑制肿瘤细胞增殖,促进凋亡结论:EGFR在胸腺瘤的发生、发展过程中起重要作用。可以作为Masaoka分期的补充,能较为准确判断胸腺瘤的侵袭性。胸腺瘤EGFR的表达不是由于EGFR基因的关键功能位点的突变所导致。EGFR小发夹RNA质粒载体可显著抑制EL-4细胞中的EGFR基因的表达,抑制EL-4细胞的增殖,促进凋亡,抑制肿瘤的生长。
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全文目录
摘要 4-6 主要英文缩写 6-7 中文摘要 7-11 英文摘要 11-16 前言 16-22 一、研究背景: 16-17 二、研究思路: 17-18 三、课题的主要研究内容 18 参考文献: 18-22 第一部分:表皮生长因子受体在胸腺瘤中的表达及其临床意义 22-46 材料和方法 22-29 结果 29-32 附图 32-34 讨论 34-40 参考文献 40-46 第二部分:表皮生长因子受体靶向RNA 干扰的重组腺病毒构建 46-79 材料 47-48 方法 48-63 结果 63-74 讨论 74-77 参考文献 77-79 第三部分:RNA 干扰对胸腺瘤细胞株EL-4 的生物学特性体外研究 79-97 材料与方法 79-84 结果 84-91 讨论 91-94 参考文献 94-97 第四部分:RNA 干扰对胸腺瘤细胞株EL-4 的生物学特性体内研究 97-113 材料与方法 97-102 结果 102-108 讨论 108-110 参考文献 110-113 全文总结 113-114 综述:胸腺瘤分子标志物的研究进展 114-127 致谢 127-128 附录 128
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 内分泌腺肿瘤 > 胸腺肿瘤
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