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AMPA受体酪氨酸磷酸化修饰在机体低氧反应中作用的研究
作 者: 李艳春
导 师: 张衡
学 校: 山东大学
专 业: 生理学
关键词: 孤束核 疑核 蛋白酪氨酸激酶 AMPA受体 低氧呼吸反应 家兔 原代细胞培养 脑干神经元 低氧 插膜 中缝苍白核 肺扩张反射 电刺激
分类号: Q42
类 型: 博士论文
年 份: 2006年
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内容摘要
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目的:(1) 观察向家兔脑干孤束核(NTS)或疑核(NA)内微量注射酪氨酸蛋白激酶(PTK)阻断剂和谷氨酸AMPA受体阻断剂对常氧呼吸和低氧呼吸反应的影响,探讨PTK和AMPA受体在低氧呼吸反应中的作用。(2) 观察低氧通气后NTS和NA磷酸化酪氨酸免疫阳性神经元的数量变化;观察磷酸化酪氨酸和AMPA受体亚单位GluR1在突触后膜共存的情况,推测在低氧呼吸反应中AMPA受体和PTK信号转导途径的关系。 方法:1.电生理学实验:实验在麻醉、肌松、人工通气的成年家兔上进行。常氧通气为医用空气(20%O2-80%N2),低氧通气为10%O2-90%N2混合气体。以膈神经放电为呼吸观察指标。通过解剖定位和引导呼吸神经元放电定位NTS和NA,分别向NTS或NA内微量注射PTK阻断剂genistein、genistein非活性拟似物daidzein、AMPA受体阻断剂CNQX,观察注射前后常氧和低氧通气对膈神经放电以及动脉血pH值的变化。2.荧光免疫组化实验:将动物分为常氧通气组和低氧通气组。在低氧通气不同时间后处死动物,取脑做新鲜冰冻切片。免疫组化处理包括:(1)用特异性抗体单独标记NTS和NA处的磷酸化酪氨酸,比较各组的免疫阳性细胞数目;(2)用两种特异性抗体同时标记磷酸化酪氨酸和AMPA受体GluR1,观察磷酸化酪氨酸和AMPA受体共存情况。 结果:1.电生理学实验:(1) 低氧通气开始后动物膈神经放电幅度和呼吸
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全文目录
符号缩写说明 5-7 第一部分 孤束核及疑核酪氨酸蛋白激酶信号转导途径对低氧呼吸反应的调制作用 7-86 中文摘要 7-10 英文摘要 10-13 前言 13-15 疑核/孤束核处微量注射酪氨酸蛋白激酶和AMPA受体阻断剂削弱低氧呼吸反应 15-41 材料与方法 15-18 结果 18-41 急性低氧增强疑核/孤束核处磷酸化酪氨酸蛋白的表达 41-49 材料与方法 41-44 结果 44-49 低氧前后疑核/孤束核处磷酸化酪氨酸和AMPA受体的共存 49-55 材料与方法 49-51 结果 51-55 讨论 55-74 附图 74-76 参考文献 76-86 第二部分 低氧导致新生大鼠培养脑干神经元谷氨酸AMPA受体插膜及酪氨酸蛋白激酶的调制作用 86-144 中文摘要 86-88 英文摘要 88-91 前言 91-93 急性低氧期间脑干神经元AMPA受体的变化 93-103 材料与方法 93-98 结果 98-103 酪氨酸蛋白激酶对低氧导致的AMPA受体插膜的影响 103-109 材料与方法 103 结果 103-109 低氧增强AMPA受体酪氨酸磷酸化 109-117 材料与方法 109-111 结果 111-117 讨论 117-133 附图 133-134 参考文献 134-144 第三部分 电化学兴奋中缝苍白核对家兔肺扩张反射的调制作用 144-175 中文摘要 144-146 英文摘要 146-149 前言 149-151 材料与方法 151-153 结果 153-161 讨论 161-168 参考文献 168-175 致谢 175-176 在读期间发表论文 176-177 学位论文评阅及答辩情况表 177
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中图分类: > 生物科学 > 生理学 > 神经生理学
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