学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

宫颈癌血清差异蛋白的表达及宫颈癌HeLa细胞放射前后的蛋白质组学初步研究

作　者: 栾力
导　师: 程玉峰
学　校: 山东大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 宫颈癌 表面增强激光解析离子化飞行时间质谱 Hela细胞 蛋白质组学 放射治疗
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 54次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：1.利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析宫颈上皮内瘤变(CN)Ⅲ期、早期宫颈癌患者及健康人的血清蛋白质谱,筛选潜在的特异性肿瘤标志物,探讨其临床意义。2.利用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解析离子化/飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术筛选、鉴定宫颈癌Hela细胞放射前后差异表达的蛋白质,从蛋白质组水平分析宫颈癌放射治疗的分子机制。方法：1.检测宫颈上皮内瘤变及宫颈癌早期患者血清蛋白质谱的表达(1)样品收集：CINⅢ期患者23例,早期宫颈鳞癌患者34例,正常对照35例。采集测试对象静脉血,4℃离心后取上清,-80℃冰箱保存。(2)用SELDI-TOF-MS结合弱阳离子交换(WCX)芯片,检测血清蛋白质峰,在Ciphergen Software 3.1.1软件中设定读片程序,读取芯片数据并绘制出蛋白质质谱图。利用Biomark Wizard软件分析差异蛋白峰,在Swiss蛋白数据库中搜索鉴定差异蛋白。(3)受试者工作(ROC)曲线评价差异蛋白峰的应用价值。2.宫颈癌Hela细胞放射前后的蛋白质组学分析对Hela细胞进行剂量为6Gy的6MV-X线照射后,应用2-DE技术对Hela细胞放射前、后两组细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱；采用PDQuest (8.0.1)软件进行匹配和差异分析,寻找两组的表达差异蛋白质点。从凝胶中切取差异蛋白点进行胶内原位酶解,应用MALDI-TOF-MS对酶解产物进行分析,获取肽质量指纹图谱,在数据库中搜索鉴定差异蛋白质。结果：1.在所有检测标本中共测得76个蛋白质质谱峰值,在质荷比(m/z) 2000-20000Da范围内,宫颈癌患者的血清中筛选出与正常人血清有统计学意义的差异蛋白10个,其中5个高表达：m/z分别为2951.5、3882.4、5310.3、7757.1、15910.4Da；5个低表达：m/z分别为3824.6、4211.8、4512.4、4786.4、5565.3Da。应用ROC曲线分析,评估10个差异蛋白对宫颈癌具有中等诊断价值：灵敏度为64.7%～97.1%,特异度为79.4%～94.3%。在CINⅢ中升高,但在宫颈癌下降的差异蛋白有3个：m/z分别为4584.9、5897.5、9176.6Da。2.建立了分辨率高、重复性好的放射前后的Hela细胞双向凝胶电泳图谱。放射组蛋白斑点数为1248±67个,未放射组蛋白点数为1207±78个,组间平均匹配率为86.8%。质谱分析成功鉴定10个差异表达蛋白,其中6个蛋白质在放射组高表达,分别是：角蛋白10、角蛋白18、膜联蛋、核糖体蛋白、La核糖核蛋白、精氨酸脱氢酶；4个蛋白质在放射组低表达,分别是：2种钙网蛋白、磷酸甘油酸变位酶、琥珀酸脱氢酶。结论：1.正常人、CINⅢ期及宫颈癌早期组血清中存在差异蛋白质,SELDI-TOF-MS联合WCX芯片能在宫颈癌患者和健康人群血清中筛选出灵敏度和特异度较好的差异表达蛋白,其有助于宫颈癌的筛查、早期诊断。2.放射治疗可能通过改变多种蛋白的表达,参与细胞凋亡、细胞周期调控、信号转导等过程,影响细胞的增殖、分化。进一步弄清信号转导过程和相互关系,不仅对从蛋白质组水平了解宫颈癌放射治疗的分子机制有重要意义,而且为从分子水平治疗宫颈癌提供新思路。

全文目录


相似论文

  1. 图像引导下的宫颈癌自适应调强放射治疗,R737.33
  2. 棉花纤维初始发育的磷酸蛋白质组学研究,S562
  3. 溶藻弧菌耐四种抗生素的蛋白质组学研究,S941
  4. 甘蓝型油菜种质资源芽期和苗期耐盐性鉴定与双向电泳体系的建立,S565.4
  5. 宫颈癌患者外周血中CK 19 mRNA和MUC1 mRNA的检测意义,R737.33
  6. 陆地棉细胞质雄性不育及其恢复机制的研究,S562
  7. 经阴道实时弹性成像对宫颈占位性病变弹性图像特征及其临床应用价值的研究,R445.1
  8. Survivin和Yes-associated protein在宫颈癌组织中的表达及临床意义,R737.33
  9. 蜂毒肽基因的原核重组表达及其在Hela细胞中的靶向转录研究,R346
  10. 乙型肝炎病毒相关性肾炎尿液蛋白质组学的研究分析,R692.3
  11. 宫颈癌组织中RECK基因的表达及意义,R737.33
  12. 贵州省部分少数民族妇女宫颈癌的HPV谱研究,R737.33
  13. 宫颈癌患者临床预后因素分析（附72例分析）,R737.33
  14. 阴道镜下宫颈活检在宫颈病变诊断中的价值（附500例临床病例分析）,R737.33
  15. 阴道镜下活检诊断宫颈疾病213例临床分析,R737.33
  16. 正常肝细胞系Chang Liver和肝癌细胞系HepG2的定量蛋白质组学研究,R735.7
  17. Galectin-3在宫颈病变组织中的表达及其与高危型HPV感染载量的关系,R737.33
  18. 二氮嗪后处理在大鼠心肌线粒体比较蛋白质组学的研究,R965
  19. 菊花花色嵌合体生物学特性及形成机理的研究,S682.11
  20. 青蒿琥酯对宫颈癌HeLa和Siha细胞裸鼠移植瘤放射增敏的实验研究,R737.33
  21. 基于SELDI-TOF-MS技术的乳头状甲状腺癌血清差异蛋白质组学分析及筛选模型的构建,R736.1

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com