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新型骨生物活性材料的实验研究

作　者: 赵军
导　师: 樊洪
学　校: 天津医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: β-磷酸三钙 P-15多肽成肌细胞骨生物材料骨缺损
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 24次
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内容摘要

目的本研究旨在探讨p-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)/P-15复合材料骨诱导活性,为临床使用此材料提供实验依据和理论基础。方法1.制备β-TCP/P-15复合材料：将β-TCP放到P-15多肽溶液中,轻微震荡以确保P-15充分吸附到p-TCP中,室温条件下放置24 h,再用PBS洗去未吸附的P-15,干燥后,室温条件下储存在防潮容器中备用。2.在β-TCP/P-15和p-TCP上分别培养C2C12细胞6天,分别于培养的第2,4和6天取材,扫描电镜观察细胞生长情况；CCK-8法检测细胞增殖情况；BCA法检测蛋白质含量；碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性3.下颌骨体部制备骨缺损：实验组1(β-TCP/P-15).实验组2(β-TCP)随机植入同一只实验兔左侧或右侧下颌骨缺损区,对照组随机选取另外一只实验兔左侧或右侧下颌骨制备骨缺损,但不植入任何材料。分别在术后第4周、8周和12周处死动物,行大体观察、组织学染色观察及成骨面积的测定。结果1.β-TCP组与β-TCP/P-15组的细胞增殖情况与蛋白含量随时间的延长而呈增加趋势,β-TCP/P-15组较β-TCP组各相同时点细胞增殖及蛋白含量明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)；2组在细胞与材料复合培养2d时均未检测出碱性磷酸酶的活性,培养4、6d后细胞内碱性磷酸酶的活性随时间的延长而呈增加趋势,β-TCP/P-15组较p-TCP组各相同时点碱性磷酸酶的活性明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。2.大体标本观察：3组骨缺损区骨痴量和骨强度随时间延长而逐渐增多,且各时间点β-TCP／P-15组的骨痴量最多、骨强度最高,空白组最差,12周时,p-TCP／P-15组与β-TCP组材料都已基本吸收；组织学观察：各组骨基质随时间延长而逐渐增多,且各时间点p-TCP/P-15组骨基质分别较p-TCP组和空白组多,空白组最差；成骨面积的测定：随着时间的延长,3组的成骨面积均增加,同一组不同时间段比较差异有统计学意义(P<0.05),β-TCP/P-15组成骨面积增加较快；各个时间点β-TCP/P-15组成骨面积均强于对照组(P<0.05)。结论本实验中所用的p-TCP/P-15复合材料具有良好的骨诱导活性、降解性、生物相容性以及成骨性能,可促进骨缺损的修复。有望作为骨修复材料用于下颌骨缺损的治疗。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语/符号说明  10-11
前言  11-14
  研究现状、成果  11-12
  研究目的、方法  12-14
一、C2C12细胞与β-TCP/P-15复合材料的体外培养  14-28
  1.1 对象和方法  14-18
    1.1.1 实验材料  14-15
    1.1.2 实验方法  15-18
  1.2 结果  18-23
    1.2.1 BMP2诱导C2C12向成骨细胞分化的鉴定  18
    1.2.2 扫描电镜的观察  18-19
    1.2.3 2组材料对细胞增殖的影响  19-20
    1.2.4 2组细胞蛋白含量的比较  20-21
    1.2.5 2组细胞ALP活性的比较  21-23
  1.3 讨论  23-27
    1.3.1 C2C12细胞向成骨细胞分化  23
    1.3.2 复合材料的体外研究  23-27
  1.4 小结  27-28
二、β-TCP/P-15复合材料修复兔下颌骨缺损的研究  28-37
  2.1 对象和方法  28-31
    2.1.1 实验材料  28
    2.1.2 实验方法  28-31
  2.2 结果  31-34
    2.2.1 一般情况  31
    2.2.2 大体标本观察  31
    2.2.3 组织学观察  31-32
    2.2.4 成骨面积的测定  32-34
  2.3 讨论  34-36
  2.4 小结  36-37
结论  37-38
参考文献  38-42
发表论文和参加科研情况说明  42-43
综述复合人工骨材料的研究进展  43-57
  综述参考文献  51-57
致谢  57

新型骨生物活性材料的实验研究

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