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鲍鱼内脏多糖的结构和活性研究

作　者: 刘春燕
导　师: 张丽萍
学　校: 东北师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 鲍鱼内脏多糖结构免疫活性
分类号: TS254.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 76次
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内容摘要

从鲍鱼内脏中提取活性多糖,为提高鲍鱼内脏的附加值,促进鲍鱼的综合利用和开发提供理论和技术支持。本论文采用水煮、醇沉的方法,得到鲍鱼内脏粗多糖CAVP, CAVP经冻融分级、酶-Sevag法联合脱蛋白、SepharoseCL-6B柱层析等方法进行纯化,得到水溶性多糖AVP,苯酚-硫酸法测总糖含量为91.24%。经SepharoseCL-6B柱层析和HPLC分析,AVP为均一性多糖,分子量约为3.5万。气相色谱法分析表明AVP主要由Man、Gal、Glc三种单糖组成,其摩尔比为2.7:0.7:6.5。采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化及IR、GC、GC-MS等方法对AVP的结构进行分析。AVP经部分酸水解反应,AVP的主链由Glc单糖组成,糖链末端或支链主要由Glc和Gal组成,支链或主链边缘主要是Man。A VP甲基化分析结果表明,AVP主链部分主要由(1→4)-Glc组成,分支点为Glc的6-O处,分支点残基为(1→4,6) -Glc;支链部分主要是(1→3,6)-Man;非还原末端残基是(1→)-Gal和(1→)-Glc。应用MTT法初步考察了AVP对小鼠体外淋巴细胞增殖的影响。结果表明,AVP在100-400μg/ml浓度下,均能促进淋巴细胞的增殖,并且随着浓度的增加,促进作用越明显;在100-200μg/ml时,AVP可以促进ConA诱导的T淋巴细胞的增殖,同时对LPS诱导的B淋巴细胞的增殖有明显影响。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-8
引言  8-14
  一、海洋多糖的提取和纯化  9-10
    1.海洋多糖的提取  9
    2.海洋多糖的分离  9-10
  二、海洋多糖的结构研究  10
    1.海洋多糖的结构  10
    2.海洋多糖的结构分析方法  10
  三、海洋多糖的活性  10-12
    1.抗肿瘤活性  10-11
    2.抗病毒作用  11
    3.抗心血管疾病  11
    4.抗氧化作用  11
    5.抗疲劳作用  11-12
    6.在化妆品中的保湿作用  12
    7.海洋多糖在其他方面的作用  12
  四、研究目的和意义  12-14
鲍鱼内脏多糖提取与纯化  14-20
  一、实验材料  14
  二、主要试剂与仪器  14
    1.主要试剂  14
    2.主要仪器  14
  三、鲍鱼内脏多糖的提取  14-15
    1.鲍鱼内脏的预处理  14-15
    2.粗多糖的分离提取  15
    3.总糖含量、蛋白含量的测定  15
  四、鲍鱼内脏多糖的分离  15-17
    1.多糖的冻融分级  15-16
    2.脱蛋白  16
    3.超滤分级  16
    4.活性炭脱色素  16
    5.分子筛制备柱(2.5×90cm 分部收集)  16
    6.鲍鱼内脏多糖的理化性质  16-17
  五、结果与讨论  17-19
    1.鲍鱼内脏多糖的提取  17
    2.粗多糖的性质  17
    3.多糖的分离  17-18
    4.理化性质研究  18
    5.单糖组成分析  18-19
  六、小结  19-20
鲍鱼内脏多糖的结构研究  20-34
  一、实验试剂和主要仪器  20
  二、实验方法  20-22
    1.单糖组成分析  20
    2.红外光谱分析  20
    3.部分酸水解  20-21
    4.高碘酸氧化和Smith 降解  21
    5.甲基化分析  21-22
  三、结果与讨论  22-33
    1.红外光谱分析  22-23
    2.部分酸水解  23-24
    3.高碘酸氧化和Smith 降解  24-26
    4.甲基化分析  26-33
  四、小结  33-34
鲍鱼内脏多糖的活性研究  34-37
  一、材料和试剂  34
  二、主要仪器  34
  三、CAVP 和 AVP 的体外淋巴细胞转化实验  34
    1.淋巴细胞的增殖试验  34
    2.Con A 诱导的T 淋巴细胞增殖试验  34
    3.LPS 诱导的 B 淋巴细胞增殖试验  34
  四、结果与讨论  34-36
    1.CAVP 和 AVP 对淋巴细胞的增殖反应的影响  34-35
    2.CAVP 和 AVP 对 ConA 诱导的T 淋巴细胞的增殖反应的影响  35
    3.CAVP 和 AVP 对 LPS 诱导的B 淋巴细胞的增殖反应的影响  35-36
  五、小结  36-37
论文总结  37-38
参考文献  38-42
英文缩写  42-43
致谢  43-44
附录  44

鲍鱼内脏多糖的结构和活性研究

内容摘要

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