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RGD诱导人胃癌细胞BGC823凋亡及RGD-壳聚糖微球的制备和释药性能研究

作　者: 李晶
导　师: 张玉华；王华
学　校: 吉林大学
专　业: 药物化学
关键词: RGD 细胞凋亡 BGC823 壳聚糖微球药物缓释
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)三肽是一种重要的细胞识别位点与信号启动分子,存在于多种生物细胞外基质(Extracellular matrices,ECM)和血浆蛋白结构中,同时也是细胞间识别系统的基本单位,在肿瘤的治疗中起到十分重要的作用。它不但能够竞争性的封闭肿瘤细胞上的整合蛋白,使肿瘤失去对正常组织粘附的能力,从而抑制肿瘤转移,而且它还能够直接进入细胞,活化细胞凋亡途径末端的Caspase-3,从而引起结构蛋白和功能蛋白的降解,最终使细胞解体。因此含RGD的多肽或化合物有望成为治疗一些重要疾病的新制剂。本文研究了RGD对人胃癌细胞BGC823生长增殖的影响。MTT试验的结果表明RGD抑制了人胃癌细胞BGC823的生长增殖,并呈浓度依赖性。通过HE染色、透射电子显微镜、免疫组织化学、流式细胞术和凋亡细胞的DNA片断分析等方法观察凋亡细胞的形态结构变化以及定性、定量检测细胞凋亡。我们还深入的探讨了RGD作用后细胞内抗凋亡蛋白Survivin表达的变化。结果表明Survivin的表达量明显减少,这也暗示出RGD诱导人胃癌细胞凋亡的机制可能是抑制Survivin基因的表达。同时我们对RGD-壳聚糖微球的制备及其释药性能进行了初步探讨。通过乳化交联法制备了壳聚糖微球,对影响微球尺寸、形貌等指标的一系列因素进行考察,从而找出制备微球的适宜条件,得到尺寸均匀、稳定性好的空白微球。然后将RGD包埋进微球内,并且对其载药率、包封率及释放性能进行考察,发现包埋在微球内的RGD可以持续而稳定的释放。

全文目录

内容提要  4-6
前言  6
一、RGD肽的研究背景  6-14
  1. RGD肽及其整合素受体  6-7
  2. RGD肽的应用  7-12
  3. RGD肽在应用中的局限性  12-14
二、细胞凋亡  14-18
  1. 细胞凋亡的机制  14-17
  2. 细胞凋亡的生物学特征  17-18
三、壳聚糖微球技术介绍  18-24
  1. 壳聚糖的基本特性  18-19
  2. 壳聚糖在靶向制剂中的的应用  19-21
  3. 壳聚糖微球的制备工艺  21-24
材料与方法  24-36
  一、原料与试剂  24-25
   二、主要实验仪器  25-27
  三、实验方法  27-36
结果与讨论  36-51
  一、细胞粘附肽(RGD)抑制人胃癌细胞BGC823 生长并诱导其凋亡  36-43
  二、RGD-壳聚糖微球的制备及其释药性能研究  43-51
结论  51-53
参考文献  53-63
摘要  63-65
Abstract  65-68
致谢  68

RGD诱导人胃癌细胞BGC823凋亡及RGD-壳聚糖微球的制备和释药性能研究

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