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高速逆流色谱分离制备无花果叶和长松萝中主要活性成分的研究
作 者: 迟春艳
导 师: 石波
学 校: 中国农业科学院
专 业: 农产品加工与贮藏工程
关键词: 无花果叶 长松萝 高速逆流色谱 分离 纯化
分类号: S567.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
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本文以无花果叶、长松萝为原料,用石油醚(60-90℃)进行粗提取,减压蒸发掉石油醚,得到无花果叶粗提物浸膏和长松萝粗提物。利用高速逆流色谱法进行分离纯化无花果叶、长松萝粗提物。通过多次试验,确定分离纯化无花果叶粗提物的高速逆流色谱溶剂体系为正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水为(1:1:1:1 v/v),长松萝粗提物高速逆流色谱溶剂体系为正己烷:乙腈:乙酸乙酯:水(8:7:5:0.8 v/v)。通过高速逆流色谱的一次分离,一次进样无花果叶粗提物浸膏200mg可得到补骨脂素4.4 mg佛手内酯2.1 mg;一次进样长松萝粗提物25mg可获得松萝酸纯品11.2mg。高效液相色谱确定所得补骨脂素纯度为99.1%,佛手内酯纯度为98.2%,松萝酸纯度为99%以上。由质谱、核磁共振确定所得补骨脂素、佛手内酯、松萝酸的化学结构。将无花果叶80%醇提物和长松萝石油醚粗提物进行小鼠的急性亚急性及促生长实验。结果表明,无花果叶提取物属于无毒受试物,5.0g/kg.d的剂量对雄性小鼠有轻度促生长作用,对雌性小鼠无作用。无花果叶提取物5.0g/kg.d剂量可以使雌性和雄性小鼠肝脏重量显著增加,1.0g/kg.d剂量可明显提高雄性小鼠胸腺重量,对肾脏和脾脏无明显影响。长松萝粗提物属于低毒性受试物,长松萝提取物10mg/kg.d和50mg/kg.d剂量组小鼠生长状况均良好,能显著增加雄性幼鼠体重,同时对雌性幼鼠的生长也有促进作用。200mg/kg对雌性和雄性幼鼠生长有一定抑制作用。三个剂量均使雌性和雄性小鼠肝脏重量显著增加,高剂量组的效果更显著。该提取物对胸腺、肾脏和脾脏重量无明显影响。
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全文目录
摘要 6-7 Abstract 7-14 第一章 绪论 14-22 1.1 高速逆流色谱简介 14-15 1.1.1 高速逆流色谱的起源 14 1.1.2 高速逆流色谱的原理 14 1.1.3 高速逆流色谱溶剂体系的选择 14 1.1.4 高速逆流色谱的优点 14-15 1.1.5 高速逆流色谱的研究进展 15 1.2 无花果叶(FICUS CARICA L LEAVES)简介 15-17 1.2.1 无花果叶中主要的活性成分及其功效 15-16 1.2.2 无花果叶中活性成分的研究状况 16 1.2.3 补骨脂素和佛手内酯的来源及检测 16-17 1.2.4 补骨脂素和佛手内酯的分离纯化及化学结构测定 17 1.2.5 补骨脂素和佛手内酯的应用 17 1.3 长松萝(USNEA.LONGISSIMA)简介 17-19 1.3.1 长松萝中的活性成分及其功能用途 17-18 1.3.2 松萝酸的化学结构及理化特性 18-19 1.3.3 松萝酸的功能及应用 19 1.3.4 松萝酸的分离纯化及化学结构测定 19 1.4 研究目的意义 19-20 1.5 研究内容和目标 20 1.6 技术路线 20-22 第二章 高速逆流色谱法分离纯化无花果叶中的补骨脂素和佛手内酯 22-39 2.1 引言 22 2.2 实验材料 22-23 2.2.1 主要材料与试剂 22 2.2.2 主要设备 22-23 2.3 实验方法 23-24 2.3.1 无花果叶浸膏的制备 23 2.3.2 高速逆流色谱法分离纯化无花果叶浸膏 23 2.3.3 高效液相色谱分析 23 2.3.4 质谱及核磁共振分析 23-24 2.4 结果与讨论 24-32 2.4.1 无花果叶中补骨脂素和佛手内酯的粗提取 24 2.4.2 高速逆流色谱溶剂体系的选择 24-26 2.4.3 高速逆流色谱的条件优化 26-29 2.4.4 产品纯度的测定 29-31 2.4.5 组分峰的结构鉴定 31-32 2.5 小结 32-39 第三章 高速逆流色谱法分离纯化长松萝中的松萝酸 39-51 3.1 引言 39 3.2 实验材料 39-40 3.2.1 主要材料与试剂 39 3.2.2 主要设备 39-40 3.3 实验方法 40-41 3.3.1 松萝酸粗品的制备 40 3.3.2 高速逆流色谱法分离纯化松萝酸粗提物 40 3.3.3 高效液相色谱分析 40 3.3.4 质谱及核磁共振分析 40-41 3.4 结果与讨论 41-47 3.4.1 高速逆流色谱溶剂体系的选择 41-42 3.4.2 高速逆流色谱的条件优化 42-44 3.4.3 产品纯度的测定 44-47 3.4.4 组分峰的结构鉴定 47 3.5 小结 47-51 第四章 无花果叶提取物对小鼠急性亚急性毒性及促生长的研究 51-60 4.1 引言 51 4.2 实验材料 51 4.3 实验方法 51-52 4.3.1 无花果叶提取物对小鼠急性毒性实验方法 51-52 4.3.2 无花果叶提取物对小鼠亚急性毒性实验方法 52 4.3.3 无花果叶提取物对幼年小鼠生长影响的实验方法 52 4.4 结果与分析 52-58 4.4.1 无花果叶提取物对小鼠急性毒性实验结果分析 52-53 4.4.2 无花果叶提取物对小鼠亚急性毒性实验结果分析 53-56 4.4.3 无花果叶提取物对幼年小鼠生长影响的结果分析 56-58 4.5 小结 58-60 第五章 长松萝提取物对小鼠急性亚急性毒性及促生长的研究 60-69 5.1 引言 60 5.2 实验材料 60 5.3 实验方法 60-61 5.3.1 长松萝粗提取物对小鼠急性毒性实验方法 60-61 5.3.2 长松萝粗提取物对小鼠亚急性毒性实验方法 61 5.3.3 长松萝粗提取物对幼年小鼠生长影响的实验方法 61 5.4 结果与分析 61-68 5.4.1 无花果叶提取物对小鼠急性毒性实验结果分析 61 5.4.2 长松萝粗提取物对小鼠亚急性毒性实验结果分析 61-66 5.4.3 长松萝粗提取物对幼年小鼠生长影响的结果分析 66-68 5.5 小结 68-69 第六章 结论与建议 69-71 6.1 结论 69 6.2 创新点 69-70 6.3 建议 70-71 参考文献 71-76 致谢 76-77 作者简历 77
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 药用作物 > 木本
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