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液相色谱—质谱联用技术在食品安全分析中的应用
作 者: 陈孝武
导 师: 张书胜;刘红霞
学 校: 郑州大学
专 业: 分析化学
关键词: 液-质联用 食品安全 氨基酸 河豚毒素 代谢组学
分类号: O657.63
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
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食品是供人类食用或饮用的基本物质,是人类赖以生存的物质前提。随着社会的发展,食品多样化的出现,食品安全问题也越发严重和复杂,因此食品安全问题也成为我国内以及国际上社会关注的热点问题。目前由于仪器的分离度及灵敏度的限制,食品中性质相近的类似物、含量超低的痕量成分以及多成分的分离检测是目前食品检测的难点。液相色谱-质谱联用技术利用色谱的高分离度和质谱的高灵敏度,使其同时具有高分离度及灵敏度,成为当今最重要的食品分析方法之一。本文针对目前食品安全检测的难点,利用液-质联用技术开展了以下三个方面的食品安全分析检测研究:1、研究建立了高效液相色谱-质谱联用技术测定核桃油中的19种游离氨基酸的方法,核桃油中共检出了11种氨基酸,其中Ser和Arg含量最高,分别为1.6μg/mL和1.1μg/mL。该方法未经衍生化,简单、快速,可实现氨基酸的快速高通量分析。2、研究建立了高效液相色谱-质谱联用技术检测河豚鱼提取物中的河豚毒素及其类似物的方法,采用不加校正因子的主成分自身对照法定量,只需要主成分TTX的标准品而不需要其他类似物的标准品即可对所有的物质定量分析。结果显示,样品中共检出四种TTX类似物总含量为7.46%。该方法简单、快速、准确、可靠,为河豚毒素及其类似物的快速分析检测提供一种新的方法参考。3、研究建立了超高效液相色谱-质谱联用技术结合代谢组学方法对河豚毒素中毒机理研究,对高浓度TTX处理的SK-N-SH细胞及对照组细胞进行代谢组学分析,利用主成分分析方法找出与中毒相关的潜在的生物标记物,通过二级质谱与代谢组学数据库的比对及标准品的确证,鉴定出生物标记物的结构,从小分子水平解释河豚毒素的中毒机理。该方法为TTX的安全性评价提供方法参考。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-7 目录 7-10 1 引言 10-21 1.1 高效液相色谱-质谱联用技术 10-16 1.1.1 高效液相色谱技术 10 1.1.2 质谱技术 10-11 1.1.3 液-质联用技术 11-14 1.1.4 液-质联用技术的应用 14-16 1.2 食品安全现状 16-19 1.2.1 食品安全与隐患 16-17 1.2.2 我国及国际食品安全现状 17-18 1.2.3 食品污染物的分类 18 1.2.4 食品安全检测 18-19 1.3 液相色谱-质谱联用技术在食品安全检测中的应用进展 19-20 1.4 本论文的研究目的和内容 20-21 2 核桃油中19种游离氨基酸的液-质联用分析方法研究 21-32 2.1 前言 21-22 2.2 实验部分 22-27 2.2.1 试剂和仪器 22-25 2.2.2 标准品的配制 25 2.2.3 质谱和色谱条件 25-26 2.2.4 样品的处理 26-27 2.3 结果与讨论 27-30 2.3.1 标准曲线的绘制 27-28 2.3.2 精密度和回收率 28-29 2.3.3 样品测定 29-30 2.4 小结 30-32 3 河豚鱼中河豚毒素及其类似物的液-质联用分析方法研究 32-45 3.1 前言 32-33 3.2 实验部分 33-35 3.2.1 试剂和仪器 33-34 3.2.2 标准品的配制 34 3.2.3 质谱和色谱条件 34-35 3.2.4 样品的处理 35 3.3 结果与讨论 35-43 3.3.1 河豚毒素粗品中河豚毒素及类似物的分离 35-36 3.3.2 河豚毒素粗品中河豚毒素及类似物的鉴定 36-42 3.3.3 河豚毒素粗品中河豚毒素及类似物的测定 42-43 3.3.4 方法学考察 43 3.4 小结 43-45 4 基于液-质联用和代谢组学方法对河豚毒素的中毒机理研究 45-57 4.1 前言 45-46 4.2 实验部分 46-49 4.2.1 试剂和仪器 46-47 4.2.2 标准品的配制 47 4.2.3 细胞培养和样品收集 47 4.2.4 样品的处理 47-48 4.2.5 质谱和色谱条件 48 4.2.6 LC/MS分析 48-49 4.2.7 数据处理和统计学分析 49 4.2.8 代谢物鉴定及生物意义 49 4.3 结果与讨论 49-56 4.3.1 代谢组学数据采集 49-50 4.3.2 代谢组学数据处理 50-53 4.3.3 标记物鉴定及重要性讨论 53-56 4.4 小结 56-57 5 结论 57-58 参考文献 58-66 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 66-67 致谢 67
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中图分类: > 数理科学和化学 > 化学 > 分析化学 > 仪器分析法(物理及物理化学分析法) > 质谱分析
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