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局灶性脑缺血大鼠脑组织比较蛋白质组学研究

作　者: 周成林
导　师: 李惠芝；付晓泰
学　校: 重庆医科大学
专　业: 药物化学
关键词: 脑缺血蛋白质组学双向电泳茅莓总皂苷尼莫地平
分类号: R743
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的建立局灶性脑缺血模型,从蛋白质整体水平探讨脑缺血/再灌注的保护作用机制。方法雄性、健康大鼠SD,随机分为正常组、脑缺血模型组、茅莓总皂苷干预组和尼莫地平干预组。参照Koizumi法并加以改进,建立MCAO大鼠脑缺血2h再灌注24h的模型;裂解液提取总蛋白质,以双向电泳技术进行蛋白质分离,考马斯亮蓝染色,获得双向电泳图谱,利用专门的软件筛选出差异蛋白质,用MALDI-TOF-MS获得肽指纹图谱,MS-Fit数据库进行搜索,获得有关的蛋白质信息。结果1、以正常大鼠脑组织为研究对象,在不同的条件下进行2-DE,所分离得到的蛋白质点满足质谱分析的要求。2、局灶性脑缺血模型组与正常组脑组织的比较蛋白质组学研究。与模型组比较,从正常组筛选到23个差异表达蛋白斑点,其中13个低表达,10个高表达,鉴定其中6个蛋白质,发现白细胞三烯A-4水解酶、促甲状腺激素释放激素降解胞外酶等与脑缺血相关的蛋白质。3、局灶性脑缺血模型组与茅莓总皂苷干预组的比较蛋白质组学研究。与模型组比较,从茅莓总皂苷干预组从找到了29个差异表达蛋白斑点,其中15个低表达,10个高表达,鉴定其中7个蛋白质,发现TNF-α、LTGF-2等与脑缺血相关的蛋白质。4、局灶性脑缺血模型组与尼莫地平干预组的比较蛋白质组学研究。与模型组比较,从尼莫地平干预组找到了25个差异表达蛋白斑点,其中10个低表达,15个高表达,鉴定其中6个蛋白质,发现激肽原-1前体、谷氨酸受体4前体等与脑缺血相关的蛋白质。结论建立了适用于脑组织的蛋白质组学分析的双向电泳技术,从蛋白质组学角度发现了一些与脑缺血相关的蛋白,有助于今后进一步研究脑缺血性损伤的保护机制。

全文目录

符号说明  5-7
中文摘要  7-9
英文摘要  9-11
论文正文：局灶性脑缺血大鼠脑组织比较蛋白质组学研究  11-66
  前言  11-14
  第一部分大鼠脑组织蛋白质双向电泳技术的建立  14-22
    1 材料与方法  14-18
    2 结果  18-19
    3 讨论  19-20
    4 小结  20-21
    参考文献  21-22
  第二部分局灶性脑缺血模型组与正常组的比较蛋白质组学研究  22-40
    1 材料与方法  22-25
    2 结果  25-35
    3 讨论  35-37
    4 小结  37
    参考文献  37-40
  第三部分局灶性脑缺血模型组与茅莓总皂苷干预组的比较蛋白质组学研究  40-54
    1 材料与方法  40-41
    2 结果  41-49
    3 讨论  49-51
    4 小结  51
    参考文献  51-54
  第四部分局灶性脑缺血模型组与尼莫地平干预组的比较蛋白质组学研究  54-66
    1 材料与方法  54-55
    2 结果  55-61
    3 讨论  61-63
    4 小结  63-64
    参考文献  64-66
全文总结  66-68
文献综述：蛋白质组学在脑缺血研究中的应用  68-74
致谢  74-76
攻读硕士学位期间参加的课题及发表的论文目录  76

局灶性脑缺血大鼠脑组织比较蛋白质组学研究

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