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无公害蔬菜生产基地土壤及蔬菜产品有机污染物的遗传毒性研究

作　者: 刘仲苓
导　师: 孙增荣
学　校: 天津医科大学
专　业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 无公害遗传毒性有机提取物土壤蔬菜污水次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因(hgprt)突变试验微核试验胞质分裂阻滞彗星试验
分类号: R114
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

目的：近年来，环境中持久性有机污染物对人类健康的潜在危害问题受到越来越多的重视。研究表明，人类通过饮用水、食品等途径摄入环境中持久性有机污染物，是导致人群恶性肿瘤发生的重要原因之一，食品安全问题己引起全世界的广泛关注，无公害食品日益受到人们的欢迎。为评价无公害蔬菜生产基地土壤环境中有机污染物的遗传毒性，以及土壤中有机污染物通过植物(蔬菜)吸收对人类健康造成潜在危害的可能性，本研究以天津市两个无公害蔬菜生产基地及一个污灌区的土壤及蔬菜产品为研究对象，对其有机提取物的遗传毒性进行了检测。为初步探讨土壤中有机污染物的污染来源，本研究尚通过蚕豆根尖细胞微核试验对上述地区灌溉用水的致突变性进行了初步检测。方法：(1)分别采集无公害蔬菜生产基地A、B及污灌区灌溉用水，以原水、1／2、1／4、1／8各稀释度(蒸馏水稀释)水样处理蚕豆根尖细胞，以蒸馏水为阴性对照，环磷酰胺(CP 1mg／ml)为阳性对照，通过蚕豆根尖细胞微核试验检测其致突变性；(2)分别采集两个无公害蔬菜生产基地冬夏两季土壤及污灌区冬季土壤样品，苯／甲醇提取有机物，真空干燥后，定容于二甲基亚砜(DMSO)。①分别以不同剂量的土壤有机提取物对Km种小鼠腹腔注射染毒，染毒剂量相当于30，15，7.5，3.75g土壤干重／kg·bw。以10ml／kgDMSO为阴性对照，40mg／kgCP为阳性对照，通过小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验及小鼠外周血淋巴细胞非荧光染色彗星试验检测土壤有机提取物所致染色体损伤及DNA损伤作用；②分别以不同剂量土壤有机提取物处理体外培养的天津医科大学硕士研究生学位论文CHL细胞，染毒剂量相当于0.060，0.030，o，0159土壤干重/ml培养基(士59)，通过CHL细胞hgPrt基因突变试验及双核微核试验检测土壤有机提取物的致基因突变和染色体损伤作用;(3)分别采集无公害蔬菜生产基地及污灌区生产的蔬菜样品，提取有机物。以不同剂量的蔬菜有机提取物对Kin种小鼠腹腔注射染毒，染毒剂量相当于20，10，5，2.59干菜瓜gbw，通过小鼠骨髓嗜多染红细胞(P CE)微核试验检测不同蔬菜样品有机提取物的致突变性。结果: (l)基地A灌溉用地面水各剂量组所致蚕豆根尖细胞微核率均显著高于阴性对照组(尸<0.01，尸<0 .05);基地A灌溉用浅井水及基地B灌溉用深井水各剂量组蚕豆根尖细胞微核率与阴性对照组比较差别无显著性(P>0.05);污灌区灌溉用水各剂量组蚕豆根尖细胞微核率均显著高于阴性对照组(尸<0 .01，P<0 .05)。 (2)无公害蔬菜生产基地A夏季土壤有机提取物30叭g剂量组所致小鼠骨髓PCE微核率显著高于阴性对照组(0 .01<P<0.05)，而15，7.5，3.75叭g剂量组小鼠骨髓PCE微核率与阴性对照组比差别无显著性，呈可疑致突变阳性结果;基地A冬季各剂量组(30，15，7.5，3.759瓜g)，基地B冬夏两季各剂量组所致小鼠骨髓PCE微核率与阴性对照组比差别均无显著性(P>0.05)，呈致突变阴性结果;污灌区土壤有机提取物30，巧妙g剂量组所致小鼠骨髓PCE微核率均显著高于阴性对照组(P<0.01，尸<0.05)，且各剂量组PCE微核率与染毒剂量之间呈剂量一反应关系(二0.9676，尸<0.01)，呈致突变阳性结果，说明污灌区土壤中含有机致突变物。(3)无公害蔬菜生产基地A冬季30，巧叭g剂量组，夏季各剂量组(30，巧及7.5叭g)，基地B冬夏两季30，巧叭g剂量组所致彗星拖尾率显著高于阴性对照组(P<0.ol，P<0.05);基地A冬夏两季各剂量组，基地B冬季各剂天津医科大学硕士研究生学位论文量组，夏季30，巧叭g剂量组拖尾细胞平均尾长显著大于阴性对照组(尸<0.01)，说明两个基地冬夏两季土壤中均含有可引起小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的有机物;污灌区土壤有机提取物各剂量组所致彗星拖尾率及拖尾细胞平均尾长均显著大于阴性对照组(尸<0.01，P<0.05)。在相同染毒剂量条件下，污灌区土壤有机提取物的DNA损伤作用大于两个无公害蔬菜生产基地，基地A土壤有机提取物的DNA损伤作用大于基地B。(4)无公害蔬菜生产基地A冬季0.0609/ml(一59)，夏季0.060，0.olsg/inl(一59)，夏季0.060，0.0309/ml(+59)剂量组可引起CHL细胞hgprt基因突变频率的显著增加(尸<0.01)，说明基地A冬季土壤含有直接致突变物，夏季土壤含有直接和间接致突变物;基地B夏季0.030留ml(一S9)剂量组突变频率显著高于阴性对照组(尸<0.05)，说明基地B夏季土壤含有直接致突变物，基地B冬季各剂量组(0.060，0.030，0.olsg/ml)(士59)，夏季各剂量组(+s9)所致CHL细胞hgPrt基因突变频率与阴性对照比较差别均无显著性(P>0.05);污灌区各剂量组(士59)均可引起cHL细胞hgPrt基因突变频率的增加(尸<0.01)，说明污灌区土壤含有直接和间接致突变物。(5)无公害蔬菜生产基地A冬季0.060创ml(一59)剂量组，夏季0.060留ml (+S9)剂量组可引起CHL细胞双核微核率增加(尸<0 .05，P<0.01)，说明基地A冬季土壤含有直接致突变物，夏季土壤含有间接致突变物;基地B冬夏两季各剂量组(0.060，0.030，0.0159/ml)(士59)CHL细胞双核微核率与阴性对照组比差别均无显著性(P>0.05);污灌区土壤0.060，0.0309/ml剂量组(士59)所致双核微核率?

全文目录

中文摘要  3-7
英文摘要  7-13
前言  13-15
材料与方法  15-22
结果  22-38
讨论  38-53
小结  53-54
附图  54-59
参考文献  59-66
致谢  66-67
综述  67-76

无公害蔬菜生产基地土壤及蔬菜产品有机污染物的遗传毒性研究

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