学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

野木瓜提取物镇痛作用研究

作　者: 陈瑛
导　师: 吴英良；李锦
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 药理学
关键词: 野木瓜提取物镇痛作用量效关系时效关系镇痛作用机制
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 115次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

野木瓜为木通科（Lardizabalaceae）野木瓜属植物,拉丁学名Stauntonia chinensis DC.,是一种有着重要开发及药用价值的植物类药材。它作为一种常用中药,有强心利尿、驱虫止痛之功效,现代医学研究发现其主要的药理作用是镇痛抗炎、阻滞神经传导和放射增敏等,故在临床上广泛用于治疗类风湿性关节炎等疾病。目前对其提取物的镇痛作用及其作用机制方面的系统研究尚未见报道,因此本研究在建立多种实验性疼痛的动物模型的基础上,研究了野木瓜根茎提取物（YMG）、YMG的水相提取物（YMGW）和醇相提取物（YMGB）及其子馏分（YMGB1、YMGB2、YMGB3、YMGB4、YMGB5、YMGB6和YMGB7）的镇痛作用,并探讨了有效馏分的可能作用机制,从而为二次开发野木瓜植物药和更深入研究提供科学的实验依据。现对本实验的研究方法和结果简述如下:本研究首先采用三种镇痛实验对野木瓜系列提取物进行了镇痛活性筛选。小鼠醋酸扭体实验结果显示:与空白组相比,给予YMGW、YMGB、YMGB1、YMGB3、YMGB4、YMGB6和YMGB7（500 mg/kg,i.g.）均能够显著抑制小鼠扭体次数,具有较好的镇痛作用;野木瓜水提物YMGW和野木瓜醇提物YMGB和YMGB6在500 mg/kg的剂量下对小鼠热板致痛模型均无镇痛作用;在大鼠福尔马林炎性痛模型上,YMG、YMGW、YMGB1、YMGB3和YMGB5（400 mg/kg,i.g.）具有较好的镇痛作用,YMGB6和YMGB7具有明显的抗炎作用。综合以上结果可以看出:野木瓜提取馏分（YMG、YMGW、YMGB和YMGB1-7）中,除YMGB2外,其他馏分均具有较好的镇痛作用。其次,采用小鼠醋酸扭体模型和大鼠福尔马林炎性痛模型进一步对在两种模型上表现较好镇痛抗炎作用的馏分进行量效关系和时效关系的评价。结果显示,YMG、YMGB1、YMGB4、YMGB6和YMGB7五种馏分在320-976 mg/kg浓度范围内,随着给药剂量的增高,其对醋酸所致的小鼠扭体反应的抑制作用逐渐增强,镇痛作用具有一定的剂量依赖性;YMGB5、YMGB6和YMGW在100-800 mg/kg剂量范围内,随着给药剂量的增高,其对福尔马林所致的大鼠缩足反应和足趾肿胀程度的抑制作用逐渐增强,镇痛抗炎作用具有一定的剂量依赖性。另外,YMGB6的镇痛作用在灌胃给药45 min时达峰值,之后逐渐降低,有效镇痛时间约为1小时。最后,为进一步探讨其镇痛作用机制,本文首先观察了阿片受体拮抗剂纳络酮对有效镇痛馏分镇痛作用的影响,以评价其镇痛作用与阿片受体的关系。结果显示,在小鼠醋酸扭体实验中纳络酮可显著拮抗吗啡的镇痛作用,最大镇痛百分率降低了63.5%;而同等剂量的纳络酮对野木瓜水提物YMGW和醇提物YMGB的镇痛作用无明显影响。提示野木瓜提取馏分的镇痛作用不是由阿片受体介导的。其次,以结肠癌HT-29细胞为研究对象,评价有效镇痛馏分是否抑制与炎症反应相关的COX-2蛋白酶的表达和活性及致炎因子PGE₂的生成和释放。结果表明,野木瓜水提物YMGW和醇提物YMGB5良好的镇痛作用可能是通过降低COX-2的表达水平和抑制酶活力来实现的;而YMGB、YMGB4、YMGB6和YMGB7的镇痛作用可能是通过抑制COX-2酶活力,从而抑制PGE₂的生成和释放来实现的。上述实验结果提示,野木瓜提取馏分（YMG、YMGW、YMGB和YMGB1-7）中,除YMGB2外,其他馏分均对外周化学性刺激痛有一定的抑制作用,对中枢性热刺激镇痛作用不显著;其镇痛抗炎作用具有一定的剂量依赖性,有效镇痛时间约为1小时;野木瓜有效馏分的镇痛作用与阿片受体镇痛通路无关,主要是通过抑制COX-2的活性和表达,从而抑制PGE₂的生成和释放而发挥外周镇痛作用的。

全文目录

中文摘要  10-12
Abstract  12-14
前言  14-21
  1 疼痛的原因  14-15
    1.1 细胞损伤释放的致痛物质  14-15
    1.2 化学性刺激和物理性刺激  15
    1.3 肌肉缺血、缺氧  15
    1.4 管病变  15
    1.5 对末捎神经的机械刺激  15
    1.6 周围神经本身损伤的病理冲动  15
  2 治疗疼痛药物的研究概况  15-18
    2.1 非甾体类抗炎药  16
    2.2 阿片类药物  16-17
    2.3 其他镇痛药  17-18
      2.3.1 抗抑郁药和抗惊厥药  17
      2.3.2 电离子透入PCA芬太尼制剂  17
      2.3.3 减低阿片类药不良反应的药物  17
      2.3.4 中医药治疗  17-18
  3 野木瓜的研究现状  18-20
    3.1 生药学研究  18
    3.2 化学成分  18-19
    3.3 药理作用  19
      3.3.1 镇痛抗炎作用  19
      3.3.2 神经传导阻滞作用  19
      3.3.3 其他  19
    3.4 临床应用  19-20
  4 立题依据  20-21
实验材料  21-23
  1 药品与试剂  21
  2 实验动物  21-22
  3 细胞  22
  4 仪器  22-23
实验方法  23-32
  1 野木瓜提取物(单剂量)镇痛活性筛选  23-24
    1.1 溶液的配制  23
    1.2 小鼠醋酸扭体实验  23
    1.3 小鼠热板测痛实验  23-24
    1.4 大鼠福尔马林致痛实验  24
  2 野木瓜提取物镇痛作用的量效及时效关系  24-25
    2.1 溶液的配制  24
    2.2 镇痛量效关系  24-25
      2.2.1 小鼠醋酸扭体实验  24
      2.2.2 大鼠福尔马林致痛实验  24-25
    2.3 镇痛时效关系  25
  3 镇痛作用机制研究  25-31
    3.1 活性馏分的镇痛作用与阿片受体的关系  25-26
      3.1.1 溶液的配制  25
      3.1.2 小鼠醋酸扭体实验  25-26
    3.2 活性馏分对HT-29细胞系COX-2蛋白表达水平和活性的影响  26-31
      3.2.1 细胞培养  26-27
      3.2.2 MTT实验  27
      3.2.3 蛋白免疫印迹法测定COX-2表达量  27-30
      3.2.4 酶联免疫测定法(ELISA)测定前列腺素(PGE_2)的活性  30-31
  4 统计学方法  31-32
实验结果  32-55
  1 野木瓜提取物镇痛活性的评价  32-41
    1.1 小鼠醋酸扭体模型  32-36
    1.2 小鼠热板致痛模型  36-39
    1.3 大鼠福尔马林致痛模型  39-41
  2 野木瓜提取物活性馏分镇痛作用的量效及时效关系  41-48
    2.1 镇痛作用量效关系  41-48
      2.2.1 小鼠醋酸扭体模型  41-43
      2.2.2 大鼠福尔马林致痛模型  43-48
    2.2 时效关系  48
  3 作用机制研究  48-55
    3.1 活性馏分的镇痛作用与阿片受体的关系  48-50
    3.2 野木瓜活性馏分对HT-29细胞系表达COX-2蛋白的影响  50-55
      3.2.1 对HT-29细胞活力的影响  50-51
      3.2.2 对HT-29细胞系COX-2蛋白表达水平的影响  51-54
      3.2.3 对HT-29细胞系COX-2蛋白酶活力的影响  54-55
讨论  55-59
结论  59-60
参考文献  60-64
致谢  64-65
个人简历  65

野木瓜提取物镇痛作用研究

内容摘要

全文目录

相似论文