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玉米弯孢菌的硝酸盐营养缺陷型（Nit）突变体筛选及营养体亲和性研究

作　者: 窦艳萍
导　师: 叶华智
学　校: 四川农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 玉米弯孢叶斑病菌硝酸盐营养缺陷型(Nit)突变体营养体亲和性营养体亲和群(VCGs)
分类号: S435.13
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

通过筛选硝酸盐营养缺陷型（Nit）突变体，利用营养体亲和技术，对20个弯孢菌株（Curvularia spp．），其中14个来自四川省，山东省2个，河南省1个以及分离自水稻的3个菌株的群体多样性进行了初步研究，内容主要包括：1．玉米弯孢叶斑病菌硝酸盐营养缺陷型（Nit）突变株的产生条件及其稳定性检验 2．突变体生理表型的鉴别 3．供试菌株的营养体亲和性测定及亲和群的划分，其结果表明：野生菌株的生长情况对获得Nit突变体很重要，活化时间不宜太长，一般3-5d为宜，幼嫩菌丝易获得Nit突变体；在利用含氯酸盐的诱导培养基方面，诱导效果在菌株间有所不同，其共同点是，利用PDC培养基均不易获得Nit突变体，而KPS培养基适用范围较广；氯酸盐的浓度太高不利于突变体的筛选，1.5-2.5％较为合适，该范围内不同测试株要求的适宜浓度不同；比较25℃和29℃下产生Nit突变体的结果表明，25℃较适合于弯孢菌Nit突变体的筛选；光照条件对筛选无明显影响；来自水稻的弯孢菌株在各种条件下Nit突变体的出现频率均很低。对20个供试菌株的所有Nit突变体进行了稳定性检验，发现其稳定率在74.4-91.7％之间，说明弯孢菌的Nit突变体具有高的稳定性。根据突变体对不同氮源的利用情况，对所获得的1848个Nit突变体进行生理表型的测试划分，结果发现，多数为Nit1型（占Nit总数的25-95.9％），而NitM型突变体所占比例极小（1.2-9.5％），且两种类型的突变体所占比例在菌株间有较大的差异。33-4、三台、单W-4菌株及采自水稻的3个弯孢菌株均未获得NitM型突变体。根据Nit1和NitM突变体间的互补情况，测定弯孢菌的营养体亲和性，结果表明：除33-4、三台、单W-4菌株及采自水稻的3个弯孢菌株，其余14个供试菌株均为营养体自身亲和性菌株；通过菌株间营养体亲和性的测定，将33-4、C₄、C₇及R₂-5菌株划分为同一营养体亲和群（VCG₁），青神、9₄、9719-1等菌株划分为另一营养体亲和群（VCG₂），Rye-1、R₃-2菌株既不属于VCG₁，也不属于VCG₂。本研究还借助于野生菌株在PDA上的配对情况，将供试菌株分为另两个营养体亲和群（VCG₁′，和VCG₂′），33-4、Rye-1、R3-2菌株属VCG₁′，其余菌株属VCG₂′。由此可以看出，两种方法的测定划分结果有所不同，但其结果均表明，四川省玉米弯孢菌的群体组成存在多样性。

全文目录

摘要  4-6
前言  6-9
材料与方法  9-13
结果与分析  13-31
  1 孢菌在不同条件下Nit突变体的产生及其稳定性研究  13-26
    1.1 不同条件对弯孢菌Nit突变体产生的影响  13-26
      1.1.1 活化培养基种类对Nit突变体产生的影响  13
      1.1.2 菌龄对Nit突变体产生的影响  13-14
      1.1.3 诱导培养基种类对Nit突变体产生的影响  14-18
      1.1.4 氯酸钾浓度对Nit突变体产生的影响  18-24
      1.1.5 两个温度条件下产生Nit突变体的比较  24
      1.1.6 光照条件对Nit突变体产生的影响  24-26
    1.2 突变体稳定性的检验  26
  2 突变体生理表型的鉴别  26-28
  3 营养体亲和性测定  28-31
    3.1 菌株自身的营养体亲和性测定  28
    3.2 菌株间的营养体亲和性测定  28-31
      3.2.1 根据突变体在MM培养基上的互补测定  28-30
      3.2.2 根据野生菌株在PSA培养基上的互补测定  30-31
结论与讨论  31-34
致谢  34-35
参考文献  35-40
英文摘要  40-41

玉米弯孢菌的硝酸盐营养缺陷型（Nit）突变体筛选及营养体亲和性研究

内容摘要

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