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玉米体细胞抗盐突变体的筛选及耐盐性鉴定
作 者: 郑霞
导 师: 季良越
学 校: 河南农业大学
专 业: 作物遗传育种学
关键词: 玉米 愈伤组织 耐盐变异体 再生植株 种子
分类号: S513
类 型: 硕士论文
年 份: 2003年
下 载: 199次
引 用: 6次
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内容摘要
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玉米是一种主要农作物,同时是盐敏感作物,提高玉米的耐盐性,培育玉米耐盐品种具有重要的意义。本试验利用玉米幼胚作为外植体诱导愈伤组织,并以NaCl为筛选剂,采用多步选择法,先在含1.0%-1.5%-2.0%NaCl的筛选培养基上连续筛选三次,然后转入无盐培养基上培养三代,得到耐盐愈伤组织变异系。分化出的R0代再生植株,经温室缓苗后移栽到大田,于开花期自交授粉得到R1代种子。测定不同浓度盐胁迫下愈伤组织相对生长量、干物质累积、游离脯氨酸含量和Na+、K+含量,并测定1.0%NaCl胁迫下R0代再生株叶片的可溶性糖和相对电导率以及不同浓度盐胁迫下R1代种子的发芽率、R1代幼苗的株高、根条数、主根长和游离脯氨酸含量等与耐盐性相关的指标,结果如下: 1)随着盐胁迫强度的增加,对照和耐盐变异系的相对生长量下降,但同样胁迫下变异系的相对生长量仍高于对照,变异系干物质的积累大于对照;随着NaCl浓度的升高,对照和变异体的脯氨酸含量均增加,且变异体脯氨酸含量的增幅大于对照;对照和耐盐愈伤组织变异体细胞内Na+含量在0-1.0%的NaCl浓度范围内随NaCl浓度的升高急剧增加,当NaCl浓度继续增加时,对照细胞内Na+含量明显降低,而耐盐愈伤组织变异体细胞内仍维持相当高的Na+水平。 2)在相同的盐胁迫下耐盐变异体R0植株叶片的相对电导率低于对照,可溶性糖含量和脯氨酸含量高于对照,愈伤组织水平的高脯氨酸特性在R0代再生植株得以保持,表明变异系的R0代再生植株是耐盐的。玉米种子发芽对盐极其敏感,随着盐浓度的增加,R1代种子发芽率下降,但对照发芽率下降幅度大于耐盐变异体R1种子,变异系R1代种子在0.4--2.0%NaCl浓度培养基中的发芽率均高于对照,变异系与对照的苗高、根的条数和主根长随着盐浓度的增加都呈下降趋势,然而相同盐浓度下变异系上述三项指标均高于对照。R1代 2000级硕_.L研究生毕业论文再生植株叶片脯氨酸含量较愈伤组织和巳;代再生植株明显降低,尽管R;代再生植株游离脯氨酸绝对含量下降,但变异系仍比对照系高,说明变异系积累脯氨酸的能力强于对照。由此看来我们得到的耐盐变异体的R;代种子确实是耐盐的,R;代幼苗也具有较强的耐盐性,表明耐盐变异体的耐盐性是可以遗传的,筛选是有效的。
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全文目录
摘要 7-9 1 文献综述 9-26 1.1 植物组织培养 9-19 1.1.1 植物组织培养的发展过程 9-10 1.1.2 植物组织培养的意义 10-15 1.1.2.1 植物组织培养的理论意义 10-11 1.1.2.2 植物组织培养的应用 11-14 1.1.2.3 利用组织培养技术开展基因工程研究 14-15 1.1.3 玉米组织培养 15-19 1.1.3.1 玉米组织培养的发展 15-16 1.1.3.2 影响玉米组织培养的因素 16-18 1.1.3.3 玉米胚状体的发生和植株再生 18-19 1.2 离体筛选突变系的研究 19-24 1.2.1 抗病突变体的筛选 20-21 1.2.2 抗除草剂突变体的筛选 21 1.2.3 涉及优质、高产等性状的突变细胞系的选择 21-22 1.2.4 对其它极端因子的抗性突变体 22 1.2.5 抗盐突变体的筛选 22-24 1.2.5.1 筛选耐盐突变体的方法和已经取得的成果 22-23 1.2.5.2 筛选耐盐突变体研究中存在的问题 23-24 1.3 耐盐突变体的耐盐机制 24-26 1.3.1 渗透调节 24-25 1.3.2 盐的区隔化 25 1.3.3 离子摄入 25-26 2 引言 26 3 材料与方法 26-29 3.1 材料 26-27 3.2 培养方法 27-29 3.2.1 愈伤组织的诱导、继代和分化 27-28 3.2.2 耐盐愈伤组织变异体的选择 28 3.2.3 变异体的耐盐性测定 28-29 3.2.3.1 耐盐变异体愈伤组织相对生长量的测定 28 3.2.3.2 耐盐愈伤组织干重/鲜重的测定 28 3.2.3.3 游离脯氨酸含量的测定 28 3.2.3.4 再生植株(R_0)叶片相对电导率的测定 28-29 3.2.3.5 可溶性糖含量测定 29 3.2.3.6 再生植株自交R_1代种子在不同盐浓度中发芽率和生长状态的测定 29 4 结果与分析 29-38 4.1 玉米幼胚愈伤组织的诱导、继代和分化 29-30 4.2 再生苗出瓶后的成活率和移栽成活率 30-31 4.3 耐盐愈伤组织变异体的筛选 31-32 4.4 耐盐愈伤组织变异体的耐盐性 32-35 4.4.1 不同浓度NaCl对耐盐愈伤组织相对生长量的影响 32-33 4.4.2 不同浓度NaCl胁迫下耐盐愈伤组织的干物质的累积 33 4.4.3 不同浓度NaCl下耐盐愈伤组织的游离脯氨酸含量 33-34 4.4.4 不同浓度NaCl对愈伤组织Na~+、K~+含量的影响 34-35 4.5 再生植株耐盐性鉴定 35-38 4.5.1 耐盐愈伤组织的分化和再生植株R_0的生长 35 4.5.2 再生植株R_0叶片相对电导率和可溶性糖含量 35-36 4.5.3 再生植株R_0、R_1代叶片脯氨酸含量 36 4.5.4 再生植株R_1代种子的发芽率 36-37 4.5.5 R_1代幼苗在NaCl胁迫下的生长状况 37-38 5 结论与讨论 38-41 5.1 结论 38-39 5.2 讨论 39-41 参考文献 41-45 英文摘要 45-46 图版说明 46-47
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 玉米(玉蜀黍)
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