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尿酸盐晶体形态学及果糖对尿酸转运子影响的研究

作　者: 崔佳佳
导　师: 苏厚恒
学　校: 泰山医学院
专　业: 内科学
关键词: 痛风尿酸尿酸盐晶体果糖基因表达
分类号: R589.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的1.尿酸盐晶体是引起痛风性关节炎急性发作的物质基础,通过观察尿酸盐晶体在不同pH值环境中的形态变化,探讨体液及尿液pH值对防止尿酸结石的形成和促进体内尿酸排出的意义。2.尿尿酸盐晶体是尿酸在尿液中处于过饱和状态的标志,通过检测痛风患者尿液尿酸盐结晶,探讨痛风患者尿液尿酸盐结晶对痛风早期诊断和评价病情的临床意义。3.hURAT1基因是调节肾脏尿酸重吸收的重要基因,通过观察不同浓度的果糖对肾小管上皮细胞(HK-2细胞)hURAT1基因mRNA表达的影响,探讨果糖影响尿酸排泄的途径。方法1.采集痛风病人痛风结节中的尿酸盐晶体,应用偏振光显微镜观察晶体形态,以证实其结晶为尿酸盐结晶。将尿酸盐晶体200ul置于试管中,加pH值为5.5的缓冲液,调尿酸浓度为8.0 mg/dl,37℃水浴30分钟,在偏振光显微镜下,观察尿酸盐晶体在此pH值环境下的形态。以同样的方法,依次从弱酸至弱碱加入pH值分别为5.7、6.1、6.5、7.2、7.6、8.0的磷酸盐缓冲液,观察尿酸盐晶体在不同的pH值环境下的形态变化。2.选择痛风患者56例,B超显示无肾结石,健康对照23例。分别采集其晨尿50ml,离心取其沉渣,应用偏振光显微镜观察尿沉渣中的尿酸盐结晶形态。3.按照培养液中所含不同的果糖浓度,将HK-2细胞培养组分为：①单纯用DMEM／F12培养基组(对照组);②采用DMEM／F12培养基+100μmol果糖组(F1组);③采用DMEM/F12培养基+500μmol果糖组(F2组)。每组分别培养8瓶细胞,在不同培养液里分别培养48小时。应用实时荧光定量PCR检测HK-2细胞里hURAT1mRNA的相对表达量。结果1.尿酸盐晶体在pH值5.5-6.1的酸性条件下呈针状,有聚集现象；随着pH值的提高,在pH 6.5-7.6时,晶体针状趋于变小,并分散于液体中；在pH值8.0的碱性条件下晶体变为颗粒状,甚至溶解。2.痛风患者56例,尿液中检测到尿酸盐晶体者54例(96.43%),呈短针状或繁星状；健康对照23例,检测到尿酸盐晶体2例(8.7%),呈繁星状；两组检出率有统计学差异(P<0.05)。3.所有培养组都可以检测到hURAT1mRNA的表达,且F1组的hURAT1mRNA表达量为对照组的146.6%,F2组为对照组的178.5%。F1、F2两组与对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05),F1、F2两组间的差异也有统计学意义(P<0.05)。结论1.当体液pH值呈弱酸并趋于碱性时,尿酸晶体变小；当pH值在7.0左右时,既不破坏肾脏的生理环境,又有可能阻止高尿酸血症和痛风病人尿酸盐肾脏沉积和肾结石的形成,并且促进尿酸排出。2.尿液尿酸盐结晶的检测对痛风的诊断具有临床意义。尽管B超检查未显示有肾结石,但尿中尿酸结晶呈阳性,提示存在尿酸肾结石形成和尿酸对肾脏损伤的风险,同时可以指导合理选择降尿酸药物的应用,以免使用尿酸促排药物不当而引起尿酸盐结石的形成。3.果糖可上调hURAT1 mRNA的表达,可能与长期服用果糖饮料易患高尿酸血症有关。

全文目录

中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
符号说明  8-9
第一部分尿酸盐晶体在不同PH值环境中的形态变化与意义  9-18
  前言  9-11
  材料与方法  11-14
  结果  14-15
  讨论  15-17
  结论  17-18
第二部分痛风患者尿液尿酸盐结晶检测的临床意义  18-27
  前言  18-20
  材料与方法  20-22
  结果  22-23
  讨论  23-26
  结论  26-27
第三部分不同浓度的果糖对hURAT1基因表达的影响  27-38
  前言  27-28
  材料与方法  28-34
  结果  34-35
  讨论  35-37
  结论  37-38
附加部分痛风发作第一周首选治疗方案调查报告  38-45
附图  45-49
参考文献  49-51
综述  51-61
  参考文献  58-61
致谢  61-62
攻读学位期间发表的学术论文  62-63

尿酸盐晶体形态学及果糖对尿酸转运子影响的研究

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