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持续性压力对PC12细胞增殖和细胞骨架蛋白表达的研究

作　者: 方钧
导　师: 罗卓荆
学　校: 第四军医大学
专　业: 外科学
关键词: PC12细胞细胞增殖 β-微管蛋白压力
分类号: R651.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

急性脊髓损伤(ASCI)是骨科常见的损伤,其发病率呈现上升的趋势。急性脊髓损伤具有突发性、并发症多、致残率高、死亡率高等特点。目前急性脊髓损伤的治疗仍是医学界的一大难题,治疗上尚无突破性进展,已成为相关领域研究的热点和迫切需要解决的问题。目前国内研究压力对神经细胞影响的相关报道较少,神经元细胞由于其不可再生和功能的特殊性,自我修复能力有限,受损后发生更为复杂的病理变化。本课题利用自制可控性细胞压力加载装置模拟研究神经细胞在急性损伤后的病理变化、损伤机制,以期为临床针对性治疗提供理论依据。目的:研究持续性压力对PC12细胞增殖和细胞骨架蛋白表达的影响。方法:利用自制压力可控性细胞损伤装置,对PC12细胞分别施加0.1 mPa、0.3 mPa或0.5 mPa的持续压力,且在不同压力值作用下分别持续加压10、30、60 min,应用MTT法和免疫组化染色法分析不同压力值及持续时间对PC12细胞增殖和细胞骨架蛋白表达的影响。结果:正常PC12细胞呈上皮样细胞生长,表现出神经细胞特性。当加压损伤后,PC12细胞出现凋亡、坏死现象。对照组MTT结果显示,PC12细胞的OD值随观察期延长而逐渐升高;而加压组中,当压力≥0.3 mPa、持续时间≥30 min后的细胞增殖显著受抑(P<0.05)。β-tubulinⅢ免疫组化染色结果显示0.5 mPa压力作用10 min后,细胞骨架蛋白β-tubulinⅢ逐渐断裂降解,且降解程度随持续作用时间的延长而增强。结论:在急性压迫性脊髓损伤中,早期神经细胞增殖受限和β-tubulinⅢ蛋白降解,可随压力值和持续时间增加而增强,这种现象可能与ASCI后机械信号转变为生物学信号的过程相关联。

全文目录

缩略语表  5-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-28
  文献回顾一急性脊髓损伤的研究现状  12-22
  文献回顾二神经元微管蛋白研究进展  22-28
正文  28-37
  持续性压力对PC12 细胞增殖和细胞骨架蛋白表达的研究  28-37
    实验一持续性压力对PC12 细胞增殖的影响  28-34
      1 材料  28
      2 方法  28-30
      3 结果  30-31
      4 讨论  31-34
    实验二持续性压力对PC12 细胞Β－TUBULINⅢ表达的影响  34-37
      1 材料  34
      2 方法  34-35
      3 讨论  35-37
小结  37-38
参考文献  38-44
附录  44-47
个人简历和研究成果  47-48
致谢  48

持续性压力对PC12细胞增殖和细胞骨架蛋白表达的研究

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