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内源性和外源性甲状旁腺素对小鼠骨折愈合影响的实验研究

作　者: 刘波
导　师: 曹晓建；苗登顺
学　校: 南京医科大学
专　业: 骨科学
关键词: 骨折愈合甲状旁腺素基因敲除小鼠
分类号: R683
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 23次
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内容摘要

【目的】:探讨内源性和外源性甲状旁腺素(parathyroid hormone, PTH)是否具有促进成年小鼠骨折愈合的作用。【方法】:选用8周龄PTH野生型和PTH基因敲除(PTH-/-)小鼠作为实验对象,采用髓内针固定的标准股骨干骨折模型。小鼠骨折后1～4周,每天皮下注射PTH(1-34) 80μg/kg作为实验组,或者相应剂量的生理盐水作为对照组。分别于骨折后1周、2周和4周,通过X线摄影、micro-CT、组织学、组织化学和免疫组织化学等方法分析骨痂特征,并且将骨痂组织提取的RNA和蛋白通过RT-PCR和Western blot的方法分析骨形成相关基因和蛋白表达水平。【结果】:骨折后1周,无论给予生理盐水还是PTH处理,相同处理组小鼠之间相比,PTH-/-小鼠软骨性骨痂面积都较野生型小鼠为少;无论是野生型还是PTH-/-小鼠,相同基因型小鼠之间相比,PTH给药组小鼠软骨性骨痂面积较相应生理盐水对照组小鼠为多。骨折后2周,相同处理组小鼠之间相比,PTH-/-小鼠残余的软骨性骨痂比野生型小鼠要多;而同种基因型小鼠之间相比,PTH给药组小鼠软骨性骨痂面积较相应对照组小鼠为少。同时,骨折后2周,与野生型小鼠相比,PTH-/-小鼠骨痂的骨矿密度,骨性骨痂面积,碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原的mRNA水平,以及核心结合因子1(Cbfa1)、胰岛素样生长因子I(IGF-I)的蛋白表达水平都是降低的;而相同基因型小鼠之间相比,PTH给药小鼠在这些指标方面都比相应对照组小鼠要高。骨折后4周,相同处理组小鼠之间相比,PTH-/-小鼠在总胶原阳性骨性骨痂面积、成骨细胞数量、ALP阳性面积和I型胶原阳性面积等指标方面,都较野生型小鼠为少;相同基因型小鼠之间相比,PTH给药小鼠在这些指标方面都比相应对照组小鼠要高。骨折后2周和4周,相同处理组小鼠之间相比,PTH-/-小鼠的TRAP阳性破骨细胞数量和破骨细胞表面面积也较野生型小鼠为少;相同基因型小鼠之间相比,PTH给药组小鼠在这些指标方面都比相应对照组小鼠要高。【结论】:内源性和外源性PTH都能通过增加骨痂面积、促进软骨内成骨和成骨细胞骨形成而加速骨折的愈合。

全文目录

缩略语  4-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-13
材料与方法  13-35
结果  35-47
分析和讨论  47-50
小结  50-51
参考文献  51-55
综述  55-65
  参考文献  59-65
攻读学位期间发表文章情况  65-66
致谢  66

内源性和外源性甲状旁腺素对小鼠骨折愈合影响的实验研究

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