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Bmi-1通过抑制INK4A-ARF靶点促进胰腺癌发生的实验研究

作　者: 冷政伟
导　师: 夏清华
学　校: 华中科技大学
专　业: 外科学
关键词: 胰腺癌 Bmi-1 P16INK4A 甲基化流式细胞术
分类号: R735.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:探讨运用RNAi技术沉默Bmi-1基因对人胰腺癌细胞恶性行为的影响,为胰腺癌基因治疗提供新的靶点和思路。方法:构建反义Bmi-1真核表达载体转染人胰腺癌PANC-1细胞,运用MTT、荧光显微镜下观察、Western-Blot等技术检测转染效果;运用流式细胞术检测细胞周期、凋亡变化;RT-PCR检测P16INK4A表达变化;甲基化特异性PCR检测P16INK4A启动子甲基化变化。结果:(1)成功构建反义Bmi-1真核表达载体并且转染效率较高、效果明显。(2)转染后细胞周期出现阻滞,凋亡明显增加。(3)转染后P16INK4A表达上升其启动子甲基化程度下降。结论:Bmi-1可作为胰腺癌基因治疗的靶点,Bmi-1可能是通过影响启动子甲基化而实现对P16INK4A表达的调控。

全文目录

前言  4-5
摘要  5-6
Abstract  6-7
实验材料  7-8
统计学方法  8
第一部分 RNAi 沉默 Bmi-1 基因效率确定  8-13
  1 方法及步骤  8-12
  2 结果  12-13
第二部分 RNAi 沉默 Bmi-1 基因对人胰腺癌 PANC-1 细胞生长抑制的研究  13-18
  1 方法及步骤  13-14
  2 结果  14-18
第三部分 RNAi 沉默Bmi-1 基因对P161NK4A 表达及其启动子甲基化的影响  18-23
  1 方法及步骤  18-22
  2 结果  22-23
讨论  23-26
参考文献  26-31
致谢  31-32
硕士期间发表论文  32-33

Bmi-1通过抑制INK4A-ARF靶点促进胰腺癌发生的实验研究

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