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5，7-二甲氧基黄酮对人胃癌SGC-7901细胞生长和凋亡的影响

作　者: 尹峰
导　师: 黄秋林
学　校: 南华大学
专　业: 外科学
关键词: 胃癌 5, 7-二甲氧基黄酮凋亡 Bax Bcl-2
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的研究5, 7-二甲氧基黄酮(5, 7-dimethoxyflavone, DMF)是否具有抑制人胃癌SGC-7901细胞生长和诱导细胞凋亡作用,并探讨其作用机制是否涉及调节Bax/Bcl-2的比值。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞。MTS比色法测定细胞活性。平皿集落形成法检测细胞集落形成能力。Annexin V/PI双染色流式细胞术(flow cytometry, FCM)定量分析细胞凋亡率。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定细胞组蛋白/DNA碎片。间接免疫荧光标记FCM技术检测细胞Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果MTS比色法测定结果显示:DMF以及先导化合物5, 7-二羟基黄酮或称为白杨素(5, 7-dihydroxyflavone, chrysin, ChR)作用24 h,显著抑制SGC-7901细胞活性(P<0.05),呈浓度依赖性。平皿集落形成法检测结果证明:DMF明显抑制SGC-7901细胞锚定依赖性生长(P<0.05),呈浓度依赖性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)的集落形成抑制率分别为27%±4%、51%±8%和79%±11%;10.0μmol/L DMF的集落抑制率与30.0μmol/L ChR的集落抑制率(43%±7%)类似。Annexin V/PI双染色FCM分析结果表明:DMF显著诱导SGC-7901细胞凋亡(P<0.05),呈浓度依赖性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)孵育24 h,其细胞凋亡率分别是3.55 %±0.39%、25.30%±1.71%和45.67%±2.90%;10.0μmol/L DMF的细胞凋亡率高于30.0μmol/L ChR的细胞凋亡率(7.50%±0.62%,P<0.05)。ELISA检测细胞组蛋白/DNA碎片结果显示:DMF诱导SGC-7901细胞组蛋白/DNA碎片增加(P<0.05),呈浓度依赖性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)处理24 h的细胞组蛋白/DNA碎片水平分别是溶媒对照组(0.1% DMSO, 1.00)的1.80、5.23和8.19倍;30.0μmol/L ChR处理组的细胞组蛋白/DNA碎片水平为溶媒对照组3.46倍。间接免疫荧光标记FCM技术检测发现:DMF明显上调Bax蛋白表达(P<0.05),呈浓度依赖性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)处理24 h的细胞Bax蛋白表达水平分别是溶媒对照组(0.1% DMSO, 1.00)的1.56、2.99和4.18倍;同时,DMF明显下调Bcl-2蛋白表达(P<0.05),呈浓度依赖性;DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)处理24 h的细胞Bcl-2蛋白表达水平分别是溶媒对照组的0.55、0.38和0.16;据此推算, DMF(3.0、10.0、30.0μmol/L)处理24 h,SGC-7901细胞Bax/ Bcl-2比值分别是2.83、7.86和26.13。结论1. DMF具有抑制人胃癌SGC-7901细胞生长作用。2. DMF能有效诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。3. DMF抑制人胃癌SGC-7901细胞生长和诱导凋亡作用与增高Bax/ Bcl-2比值相关。

全文目录

中英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
前言  10-12
材料与方法  12-17
结果  17-25
讨论  25-29
结论  29-30
参考文献  30-34
综述  34-46
  参考文献  42-46
在读期间发表的论文  46-47
致谢  47

5，7-二甲氧基黄酮对人胃癌SGC-7901细胞生长和凋亡的影响

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