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10%顶孢霉（Acremonium hansfordii）可湿性粉剂加工工艺及药效评价

作　者: 王琰
导　师: 沈慧敏
学　校: 甘肃农业大学
专　业: 农药学
关键词: 顶孢霉可湿性粉剂田间药效试验液相发酵固相发酵中试产品
分类号: S476.12
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

顶孢霉菌(Acremonium hansfordii)Ahy1菌株是甘肃农业大学农药系从甘肃省榆中县黄家庄自然感病的桃蚜(Myzus persicae Sulzer)中分离获得的,属半知菌亚门(Deuteromycotina),丝孢纲(HypHomycetes),丛梗孢目(Moniliales),淡色菌科(Moliliaceae),该菌对蚜虫具有较强的侵染毒力。为早日开发出适宜于甘肃气候条件下生产和使用的虫生真菌资源微生物杀虫剂,本文对10%顶孢霉菌可湿性粉剂的配方进行优化、中试生产的加工工艺及生产流程进行研究,对获得的中试产品进行室内及田间药效试验,为顶孢霉菌的开发应用奠定基础。主要结果如下: 1. 10%顶孢霉可湿性粉剂对蚜虫进行了室内毒力和田间药效试验。结果表明:室内毒力测定,10%顶孢霉可湿性粉剂在100倍和300倍的稀释倍数下,施药96h后,对甘蓝蚜校正死亡率分别为68.26%和58.93%。田间药效试验中,300倍和500倍施用5d和10d后对田间甘蓝蚜的防治效果分别为46.34%和41.35%(5d)、72.14%和66.41%(10d)。2.本文对发酵罐中顶孢霉菌株液体培养工艺进行优化试验,顶孢霉菌株在液体发酵过程中的菌丝含量、产孢量和pH随培养时间延长呈现出不同的变化趋势。顶孢霉菌株的菌丝含量随时间延长而递增,在24h和44h的时候菌丝含量达到高峰,分别为0.4570g/mL和0.5283g/mL;含孢量在32h是达到最高峰(1.20×10~7个/mL),32h后含孢量下降;pH值在培养8h时为最高值6.18,然后开始下降,在32h降低为最小值4.80后又开始上升。根据试验数据可得出顶孢霉培养液在发酵罐中的培养时间在28h~36h内为最好。3.通过对保鲜盒、灭菌白布、保鲜膜三种不同固相发酵条件对顶孢霉菌株发酵培养比较试验,所收获的分生孢子粉分别进行质量检测可知:以保鲜盒装料所收获的顶孢霉分生孢子粉量最多,为8.4284mg/g;孢子萌发率为90.68%,次之是灭菌白布覆盖培养所产生的孢子粉,其含孢量为5.25×10~8个/g,孢子萌发率为91.52%;两种条件培养的孢子粉质量都优于保鲜膜培养条件。保鲜盒、灭菌白布、保鲜膜三种不同的固相发酵条件,孢子粉含水量分别为1.96%、1.75 %、1.31%。4.通过对10%顶孢霉可湿性粉剂中试产品的质量检测及贮存稳定性进行检测,可得10%顶孢霉可湿性粉剂的含孢量为5.11×10~8个/g、含水量1.87%、孢子萌发率为91.67%、悬浮率78.52%、润湿时间为135.12s,10%顶孢霉可湿性粉剂在4℃、15℃、25℃及35℃下贮存90天后其孢子萌发率分别为71.91%、62.88%、63.43%和24.53%。

全文目录

摘要  2-4
Summary  4-9
第一章文献综述  9-26
  1.1 顶孢霉属研究概况  9-13
    1.1.1 顶孢霉属研究现状  9-10
      1.1.1.1 分布与寄主  9
      1.1.1.2 顶孢霉菌的应用  9-10
    1.1.2 顶孢霉Ahy1 菌株研究进展  10-13
      1.1.2.1 菌株形态特征  10
      1.1.2.2 温湿度对菌株生长和产孢的影响  10
      1.1.2.3 营养对菌株生长和产孢的影响  10-11
      1.1.2.4 抗逆性  11
      1.1.2.5 不同寄主及使用剂量对顶孢霉致病力的影响  11-12
      1.1.2.6 顶孢霉对寄主的侵染途径的研究  12-13
    1.1.3 顶孢霉菌株加工工艺研究及剂型加工  13
  1.2 真菌分生孢子制剂研究进展  13-24
    1.2.1 真菌分生孢子制剂类型  13-15
    1.2.2 真菌发酵生产及孢子粉收获研究  15-20
      1.2.2.1 真菌发酵生产研究  15-16
      1.2.2.2 两相发酵工艺中的液体发酵条件  16-18
      1.2.2.3 两相发酵工艺中的固态发酵技术  18-20
    1.2.3 虫生真菌孢子粉收获及其制剂贮存  20-24
      1.2.3.1 虫生真菌孢子粉的收获  20-22
      1.2.3.2 孢子粉制剂贮存  22-24
  1.3 本试验的目的与意义  24-26
第二章 10%顶孢霉可湿性粉剂药效评价  26-32
  2.1 材料与方法  26-28
    2.1.1 供试材料  26
      2.1.1.1 供试昆虫  26
      2.1.1.2 供试药剂  26
    2.1.2 室内毒力测定方法  26-27
    2.1.3 田间药效试验方法  27
      2.1.3.1 试验方法  27
      2.1.3.2 调查方法  27
    2.1.4 数据统计分析  27-28
  2.2 结果与分析  28-31
    2.2.1 10%顶孢霉可湿性粉剂对菜蚜的室内生测结果  28-29
    2.2.2 10%顶孢霉可湿性粉剂对甘蓝蚜的田间试验结果  29-31
  2.3 结论与讨论  31-32
第三章顶孢霉菌株液体发酵工艺优化  32-40
  3.1 材料和方法  33-34
    3.1.1 供试材料  33
      3.1.1.1 供试菌株  33
      3.1.1.2 培养基  33
    3.1.2 试验方法  33-34
      3.1.2.1 菌种活化  33
      3.1.2.2 一级种子液  33-34
      3.1.2.3 二级种子液  34
      3.1.2.4 三级放大发酵  34
      3.1.2.5 发酵罐培养过程  34
  3.2 液体发酵指标测定  34-35
    3.2.1 菌丝含量测定  34-35
    3.2.2 含孢量测定  35
    3.2.3 PH 值测定  35
  3.3 数据处理  35
  3.4 结果与分析  35-39
    3.4.1 发酵罐中顶孢霉培养液的产孢量、菌丝含量及PH 值变化特征  35-36
    3.4.2 发酵罐中顶孢霉培养液的产孢量与培养时间关系  36-37
    3.4.3 发酵罐中顶孢霉培养液的菌丝含量与培养时间关系  37-38
    3.4.4 发酵罐中顶孢霉培养液的PH 值与培养时间关系  38-39
    3.4.5 不同因素对产孢量影响的极差分析结果  39
  3.5 结论与讨论  39-40
第四章顶孢霉可湿性粉剂的固相发酵条件优化  40-46
  4.1 材料与方法  40-42
    4.1.1 供试材料  40-41
    4.1.2 试验方法  41-42
      4.1.2.1 顶孢霉孢子粉的固相发酵条件优化  41-42
      4.1.2.2 数据处理  42
  4.2 结果与分析  42-44
    4.2.1 不同固相发酵条件下顶孢霉分生孢子的指标检测  42-44
      4.2.1.1 顶孢霉菌株的生长情况  42
      4.2.1.2 顶孢霉分生孢子的质量检测  42-44
  4.3 结论与讨论  44-46
第五章 10%顶孢霉可湿性粉剂中试工艺及产品质量检测  46-53
  5.1 材料与方法  46-49
    5.1.1 试验材料  46-47
      5.1.1.1 10%顶孢霉菌株分生孢子粉的制备  46
      5.1.1.2 供试试剂  46-47
    5.1.2 试验方法  47-49
      5.1.2.1 10%顶孢霉可湿性粉剂质量检测方法  47
      5.1.2.2 数据处理  47-48
      5.1.2.3 10%顶孢霉可湿性粉剂的中试产品加工工艺流程  48-49
  5.2 结果与分析  49-52
    5.2.1 顶孢霉可湿性粉剂中试产品的加工工艺  49-50
      5.2.1.1 菌种活化  49
      5.2.1.2 一级种子液  49
      5.2.1.3 二级种子液  49
      5.2.1.4 三级放大发酵  49
      5.2.1.5 固相发酵产孢  49-50
      5.2.1.6 孢子粉收获  50
      5.2.1.7 10%顶孢霉可湿性粉剂的制备  50
    5.2.2 10%顶孢霉可湿性粉剂质量检测  50-51
    5.2.3 10%顶孢霉可湿性粉剂不同温度下贮存稳定性检验  51-52
  5.3 结论与讨论  52-53
第六章结论与讨论  53-56
  6.1 主要结论  53-54
  6.2 问题及讨论  54-55
  6.3 创新点  55-56
参考文献  56-63
致谢  63-64
附录  64-65
作者简介  65-66
导师简介  66-67

10%顶孢霉（Acremonium hansfordii）可湿性粉剂加工工艺及药效评价

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