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Fkbp11转基因小鼠的建立
作 者: 张应爱
导 师: 孙岩松;杨晓
学 校: 中国人民解放军军事医学科学院
专 业: 预防兽医学
关键词: FkbP11 转基因小鼠 动物模型
分类号: Q78
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
下 载: 79次
引 用: 0次
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内容摘要
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Fkbp11是用基因芯片对小鼠肝细胞癌组织中差异表达基因进行筛选过程中获得的一个功能未知基因,属于Fk506结合蛋白家族成员,具有一个保守的肽基辅氨酸异构酶(peptidyl-prolyl cis/trans isomerases,PPIase)结构域,主要在腺体组织中高表达,前期的体外实验提示Fkbp11可能通过影响细胞周期参与肿瘤的发生过程。为在体内研究Fkbp11的生物学功能,本实验以plRES2-EGFP质粒为骨架载体,构建了一个由CMV启动子驱动表达的Fkbp11真核表达载体,通过雄原核显微注射的方法建立了该基因的转基因小鼠。用PCR和Southern杂交的方法共检测出2只阳性转基因小鼠。用Northern杂交、Western印记和荧光显微镜观察进行检测,其中一只首建者小鼠P803的子代表达谱稳定,Fkbp11基因表达于小鼠的胰腺、胃脏、心脏和肾脏组织,其中,胰腺组织的腺泡表达水平最高。表型分析显示Fkbp11转基因小鼠在胰腺、胃脏和肾脏有不同程度的病理改变。而另外一只首建者小鼠P423小鼠仅在少量胰腺腺泡中有外源性基因的表达,子代小鼠表型不明确。通过本研究获得了能够有效表达Fkbp11且传代稳定的转基因小鼠,Fkbp11转基因小鼠在多个组织表达外源性基因,该转基因小鼠的建立为Fkbp11的功能研究提供了良好的动物模型。
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中图分类: > 生物科学 > 分子生物学 > 基因工程(遗传工程)
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