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镉对华溪蟹的免疫毒性效应

作　者: 秦圣娟
导　师: 王兰
学　校: 山西大学
专　业: 动物学
关键词: 华溪蟹免疫毒性酶活超微结构镉
分类号: X174
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本论文采用急性毒性实验方法,研究了镉(Cd2+)对华溪蟹(Sinopotamon)的免疫毒性效应。Cd2+浓度分别为7.25、14.5、29、58和116mg/L,同时设对照组。分别于处理后的24、48、72、96h,从细胞形态学和生化水平分别检测了作为免疫指标的总血淋巴细胞数(THC)、分血淋巴细胞总数(DHC)和酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(AKP)活力。为了探讨PO活力变化机制,利用亚显微技术检测了浓度分别为7.25、29和116mg/L Cd2+对华溪蟹胁迫96 h后各类血淋巴细胞超微结构的影响。另外,为进一步阐述PO活力变化的机制,又对酚氧化酶原(proPO)基因进行了初步研究,获得了proPO基因部分片段。具体结果如下：(1)整体而言,THC与对照组相比均有所降低,且3类细胞所占比例均基本无显著变化。由此可知,镉可以造成华溪蟹THC与DHC显著减少。(2)在相同处理时间,随着Cd2+浓度增加,PO和SOD活力均先升后降；当浓度相同且作用时间延长,ACP活力先升后降；而AKP活力则持续上升。(3)在不同Cd2+浓度下处理96h,3类细胞均发生相应变化。浓度较低时,大、小颗粒细胞均出现脱颗粒现象,而无颗粒细胞则伸出伪足,表现出其吞噬功能；随着浓度升高,小颗粒细胞伸出伪足、并可见吞入异物的溶酶体,证实其吞噬功能。(4)实验得到长度为1218bp的碱基序列,经比对分析与黄道蟹Cancer pagurus的proPO基因相似度较高,证实此克隆片段为proPO基因cDNA部分同源片段。结论：(1)镉能够干扰作为形成和储存血淋巴细胞的造血组织功能,导致血淋巴细胞的生成量降低,也造成各类血细胞数目与总数出现相似的变化趋势。(2)PO和SOD活力变化能够灵敏反映镉对水生动物的胁迫程度,可作为指示镉污染的生物学指标。(3)镉很可能会激活华溪蟹的proPO系统,并使各类细胞表现出各自的免疫学功能；另外,各类细胞的变化在一定程度上具浓度效应,因此,能够反应外界镉胁迫的程度,为环境监测提供形态学方面的依据。

全文目录

中文摘要  10-11
ABSTRACT  11-13
第一章综述  13-21
  1 镉的污染现状  13
  2 镉的免疫毒性研究进展  13-16
    2.1 镉对免疫器官的作用及机制  14
    2.2 镉对特异性免疫的作用及机制  14-15
    2.3 镉对非特异性免疫的作用及机制  15-16
  3 甲壳动物免疫因子研究进展  16-20
    3.1 细胞免疫  17-18
    3.2 体液免疫  18-20
  4 本论文研究的目的及意义  20-21
第二章镉对河南华溪蟹总血淋巴细胞数和分血淋巴细胞总数的影响  21-29
  摘要  21-22
  1 材料和方法  22-23
    1.1 实验材料  22
    1.2 实验方法  22-23
    1.3 实验试剂  23
    1.4 数据处理  23
  2 结果  23-26
    2.1 镉对河南华溪蟹血淋巴细胞总数的影响  23-24
    2.2 镉对河南华溪蟹分血淋巴细胞总数的影响  24-26
  3 讨论  26-27
  Abstract  27-29
第三章镉对长江华溪蟹免疫相关酶活性的影响  29-37
  摘要  29-30
  1 材料和方法  30-31
    1.1 实验材料  30
    1.2 实验方法  30
    1.3 实验试剂  30
    1.4 数据处理  30-31
  2 结果  31-34
    2.1 镉对长江华溪蟹血清PO活力的影响  31
    2.2 镉对长江华溪蟹血清SOD活力的影响  31-32
    2.3 镉对长江华溪蟹血清ACP活力的影响  32-33
    2.4 镉对长江华溪蟹血清AKP活力的影响  33-34
  3 讨论  34-36
  Abstract  36-37
第四章镉对河南华溪蟹血淋巴细胞超微结构的影响  37-47
  摘要  37-38
  1 材料和方法  38
    1.1 实验材料  38
    1.2 实验方法  38
  2 结果  38-40
    2.1 河南华溪蟹血淋巴细胞的超微结构  38-39
    2.2 镉对河南华溪蟹大颗粒细胞超微结构的影响  39
    2.3 镉对河南华溪蟹小颗粒细胞超微结构的影响  39-40
    2.4 镉对河南华溪蟹无颗粒细胞超微结构的影响  40
  3 讨论  40-46
  Abstract  46-47
第五章河南华溪蟹酚氧化酶原基因的初步研究  47-55
  摘要  47
  1 材料和方法  47-49
    1.1 实验材料  47-48
    1.2 实验方法  48
    1.3 实验试剂  48-49
    1.4 数据分析  49
  2 结果  49-53
    2.1 河南华溪蟹血淋巴细胞总RNA的提取  49
    2.2 proPO cDNA的片段的PCR扩增结果  49-50
    2.3 河南华溪蟹血淋巴细胞proPO基因序列测定及分析  50-53
  3 讨论  53-54
  Abstract  54-55
参考文献  55-62
攻读学位期间取得的研究成果  62-63
致谢  63-64
个人简况及联系方式  64-66

镉对华溪蟹的免疫毒性效应

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