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云南马铃薯晚疫病菌群体的遗传多样性研究

作　者: 杨素祥
导　师: 李灿辉
学　校: 云南师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 马铃薯(Solanum tuberosum L.) 致病疫霉(Phytophthora infestans(Mont.)de Bary) 交配型 生理小种 甲霜灵抗性 线粒体DNA(mtDNA)单倍型 6-磷酸-葡萄糖异构酶(Gpi)同工酶
分类号: S435.32
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要


由致病疫霉（Phytophthora infestans（Mont．） de Bary）侵染马铃薯引起的晚疫病是严重危害全球马铃薯生产的第一大真菌病害。晚疫病菌群体结构及其演替规律的变化直接影响着该病害的发生与流行。自上世纪80年代初开始，全球各马铃薯主产国家晚疫病发生和爆发性流行的报道迅速增加，有关病原菌群体结构变化研究再次成为人们关注的焦点。本文通过对2002～2005年采自云南省八个马铃薯主产区的晚疫病样和分离纯化菌株的表型（交配型、毒性基因、生理小种和抗药性）和基因型（同工酶基因型和线粒体DNA单倍型）结构研究，较系统地揭示了云南马铃薯主产区晚疫病菌群体的遗传多样性；为马铃薯抗晚疫病育种和晚疫病综合防治技术制订提供了理论依据。主要研究结果摘要如下： 1．通过对云南省八个马铃薯主产区742份田间马铃薯晚疫病病样上卵孢子的直接检测，未发现卵孢子存在；表明这些产区可能不存在晚疫病菌的有性生殖类型或自育型菌系。利用A1和A2标准菌株，对从上述病样中分离纯化出的155个菌株进行了交配型测定和自发卵孢子形成检测，结果均未发现卵孢子形成，表明所测试的纯化菌株均为A1交配型，未发现A2交配型或自育型菌株。 2．首次利用一套分别单独携带R1-R11抗性基因、及其部分复合基因型的标准鉴别寄主，采用田间直接监测和分离纯化菌株人工接种鉴定相验证的方法，发现云南马铃薯主产区存在所有已知可鉴定的晚疫病菌毒性基因，即1、2、3、4、5、6、7、8、9、10和11号毒性基因；而且，各地晚疫病菌居群的生理小种组成及其毒性基因构成均非常复杂。经鉴定152个菌株分属于55个不同的生理小种；其中，出现频率最高的小种是1．2．3．4．5．6．7．8．9．10，发生频率为32.89％；其次为小种1．2．3．4．5．6．7．8．9．10．11，发生频率为21.05％。 3．对153个纯化菌株的甲霜灵抗药性测定结果表明：高度抗性、中度抗性和敏感菌株的数量分别为35个、32个和86个，分别占被测菌株总数的22.86％、20.92％和56.21％；发现来自不同地区的晚疫病菌对甲霜灵的抗药性水平存在明显差异。对部分代表性菌株的甲霜灵锰锌、百菌清、克露和代森锰锌的抗性测定结果显示：对百菌清、克露及代森锰锌产生抗药性的菌株分别占测定菌株数的22.2％、20.69％和10.0％，但

全文目录


摘要  6-8
Abstract  8-10
引言  10-19
  1.致病疫霉的形态学特征和生物学特性  10-11
  2.晚疫病菌群体表型结构的研究  11-14
  3.晚疫病菌群体基因型结构的研究  14-16
  4.目前我国晚疫病菌研究的基本情况  16-17
  5.本研究的目的与意义  17-19
第一章 云南省马铃薯晚疫病菌A2交配型监测及鉴定  19-27
  1 材料与方法  19-22
    1.1 试验材料  19-20
      1.1.1 供试菌株  19-20
      1.1.2 供试培养基  20
      1.1.3 供试试剂  20
    1.2 试验方法  20-22
      1.2.1 晚疫病样的采集  20
      1.2.2 晚疫病菌的分离纯化  20
      1.2.3 晚疫病菌卵孢子监测  20-21
      1.2.4 晚疫病菌交配型鉴定  21-22
  2 结果与分析  22-25
    2.1 晚疫病菌采集与分离纯化  22
    2.2 晚疫病菌卵孢子监测  22
    2.3 晚疫病菌交配型测定  22-25
  3 讨论  25-26
  4 本章小结  26-27
第二章 云南省马铃薯晚疫病菌毒性基因鉴定、监控和生理小种组成分析  27-36
  1 材料与方法  27-29
    1.1 试验材料  27-28
      1.1.1 供试菌株  27
      1.1.2 供试培养基  27-28
      1.1.3 鉴别寄主  28
    1.2 试验方法  28-29
      1.2.1 鉴别寄主准备  28
      1.2.2 供试菌株准备  28
      1.2.3 人工接种鉴定方法  28
      1.2.4 毒性基因田间监测  28-29
  2 结果与分析  29-35
    2.1 毒性基因鉴定和生理小种组成分析  29-34
    2.2 毒性基因田间监测  34-35
  3 讨论  35
  4 本章小结  35-36
第三章 云南省马铃薯晚疫病菌的抗药性检测  36-43
  1 材料与方法  36-37
    1.1 试验材料  36-37
      1.1.1 供试菌株  36
      1.1.2 供试培养基  36
      1.1.3 供试药剂  36-37
    1.2 试验方法  37
      1.2.1 甲霜灵抗性测定  37
      1.2.2 其它杀菌剂抗性检测  37
  2 结果与分析  37-41
    2.1 甲霜灵抗性测定  37-39
    2.2 其它杀菌剂抗性检测  39-41
  3 讨论  41-42
  4 本章小结  42-43
第四章 云南省马铃薯晚疫病菌的mtDNA单倍型分析  43-51
  1 材料与方法  43-45
    1.1 试验材料及仪器  43-44
      1.1.1 供试菌株  43
      1.1.2 供试培养基  43
      1.1.3 供试引物  43
      1.1.4 主要仪器设备  43-44
      1.1.5 试验所用试剂  44
    1.2 试验方法  44-45
      1.2.1 马铃薯晚疫病菌线粒体DNA的提取  44
      1.2.2 模板DNA浓度与纯度检测  44
      1.2.3 PCR扩增  44-45
      1.2.4 扩增产物的电泳检测  45
      1.2.5 扩增产物的限制性酶酶切  45
  2 结果与分析  45-49
  3 讨论  49-50
  4 本章小结  50-51
第五章 云南马铃薯晚疫病菌的Gpi同工酶酶谱分析  51-57
  1 材料与方法  51-52
    1.1 试验材料  51
      1.1.1 供试菌株  51
      1.1.2 供试培养基  51
      1.1.3 供试仪器  51
      1.1.4 供试药品  51
    1.2 试验方法  51-52
      1.2.1 病菌样品的制备  51-52
      1.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳  52
  2.结果与分析  52-55
  3 讨论  55-56
  4 本章小结  56-57
第六章 云南马铃薯主产区晚疫病菌群体遗传结构及其演替  57-61
  1.云南马铃薯晚疫病菌的毒性基因和生理小种组成演替分析  57-59
  2.云南马铃薯晚疫病菌对甲霜灵抗性的演替分析  59
  3.云南马铃薯晚疫病菌的mtDNA单倍型演替分析  59-60
  4.云南马铃薯晚疫病菌的Gpi同工酶酶谱演替分析  60-61
结论  61-63
参考文献  63-70
附录  70-73
在读期间完成的学术论文  73-74
致谢  74

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 薯类作物病虫害 > 马铃薯（土豆）病虫害
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