学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

骨髓间充质干细胞体外定向分化为神经样细胞的研究

作 者: 郑煜
导 师: 周兴
学 校: 广州医学院
专 业: 泌尿外科学
关键词: 骨髓间充质干细胞 生物学特性 诱导分化
分类号: R329
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 37次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
 

内容摘要


脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后所引起的神经源性膀胱症状严重影响患者的生活质量,但目前尚无有效的治疗手段,并且多数研究集中在尿流动力学及神经功能损伤等方面。随着近年来干细胞研究的突飞猛进,干细胞移植用于治疗血液系统恶性肿瘤、神经系统自身免疫疾病并取得有效成果,甚至已经应用于临床,这使通过干细胞联合组织工程移植增加脊髓神经数量、减少胶质瘢痕和空洞的形成成为可能,采用干细胞接种至组织工程进行移植可望成为一种有效治疗SCI后神经源性膀胱的新方法。然而,在组织工程构建中选择合适的种子细胞成为治疗的重要环节。全能干细胞和多能干细胞具有高度自我更新能力和多向分化的潜能,是组织工程中重要的靶细胞。胚胎干细胞移植存在伦理道德和免疫排斥等问题,神经干细胞、嗅鞘细胞及雪旺细胞的来源均有限,且取材不便,很难应用于临床。BMSCs在体外具有强大的增殖能力,而且可以在不同的理化环境和细胞因子的诱导下向骨、脂肪、腱和肌肉等组织分化,还可以跨胚胎分化为神经组织,展示出良好的研究和应前用景。实验目的:通过对SD大鼠BMSCs的体外分离纯化和培养扩增,采用免疫荧光染色法对BMSCs进行形态学观察及表型鉴定,并利用其生物学特性进行Nestin免疫细胞化学分析、诱导分化及分化鉴定,探讨BMSCs定向分化为神经样细胞的潜能,为利用BMSCs治疗SCI所引起的神经源性膀胱提供一种理想的种子细胞和一定的理论依据。实验方法:1.采用全骨髓贴壁分离法体外提取、分离及纯化大鼠BMSCs,并进行传代扩增;2.绘制BMSCs的生长曲线,并进行免疫荧光染色观察其形态结构;3.流式细胞分析仪检测细胞表面抗原CD29、CD34、CD105的阳性表达率;4.在成骨细胞诱导剂和神经细胞诱导剂条件下定向诱导BMSCs向成骨细胞和神经样细胞分化,并分别行茜素红、Nestin免疫细胞化学染色鉴定;5.将诱导形成的神经球样细胞团进一步培养分化,并进行MAP-2、GFAP免疫细胞化学染色鉴定分化形成的神经元、星形胶质细胞结构。实验结果:1.全骨髓贴壁分离法获得的BMSCs在接种后24~36小时贴壁,梭形,核质比大,呈漩涡状生长,增殖能力强;2.细胞生长经过潜伏适应期、对数增长期、平台期阶段;免疫荧光染色后在荧光显微镜下可见全部细胞均呈绿色荧光,细胞为梭形或多边形,细胞核未染荧光,保持了良好的形态;3.流式细胞分析仪显示P3~P5代细胞表面抗原CD29、CD105表达阳性,而CD34表达阴性;4.在两种不同诱导剂诱导下BMSCs能分化形成成骨细胞和神经样细胞并表达相应的特异性抗原;5.进一步培养分化所形成的细胞能表达神经元标志物MAP-2或神经胶质细胞标志物GFAP。结论:1.全骨髓贴壁分离法可分离出较纯的BMSCs,经培养扩增后能获取大量的BMSCs,细胞呈贴壁生长,增殖能力强;2.BMSCs具有多向分化的潜能,在体外可诱导分化为成骨细胞及神经样细胞;3.分化形成的神经球样细胞能进一步分化为神经元和神经胶质细胞,是干细胞移植治疗的理想种子细胞,具有极大的应用前景。

全文目录


中英文对照  3-4
中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
前言  9-13
材料与方法  13-19
  ㈠ 实验材料  13-16
  ㈡ 实验方法  16-19
实验结果  19-32
讨论  32-38
结论  38
展望  38-39
参考文献  39-45
综述  45-54
  参考文献  51-54
致谢  54-55

相似论文

  1. 河南低致病性禽流感病毒(H9亚型)分离鉴定及生物学特性研究,S852.65
  2. 苏丹草叶斑病原平脐蠕孢菌的研究,S435.4
  3. 山羊骨髓间充质干细胞生物学特性、冷冻保存及基因转染研究,S827
  4. 豆柄瘤蚜茧蜂田间动态及其生物学特性研究,S476.3
  5. 新型非病毒基因转染体系的构建及其在骨髓间充质干细胞基因重组中的应用,R346
  6. 兔骨髓间充质干细胞分离培养及定向分化的研究,R329
  7. 茶黄素与TGF-β3对兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞增殖和诱导分化地影响,R329
  8. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  9. 第三方骨髓间充质干细胞诱导同种异体移植受体免疫耐受机制的研究,R392
  10. 人瘢痕疙瘩成纤维样(间充质)干细胞生物学特性鉴定,R622
  11. 慢病毒介导hVEGF-165基因转染骨髓间充质干细胞治疗大鼠后肢缺血实验研究,R329
  12. 心梗后骨髓间充质干细胞移植的最佳时间研究,R542.22
  13. 白蜡吉丁啮小蜂生物学及耐寒性研究,S476.3
  14. 大鼠骨髓间充质干细胞p38MAPK信号通路对机械应力刺激的反应,R329
  15. 体外诱导人脂肪间充质干细胞向表皮细胞和成纤维细胞分化,R329
  16. 骨髓间充质干细胞的营养效应对一氧化碳致星形胶质细胞损伤的影响,R329
  17. BMP2和VEGF165在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达,R329
  18. 应用脂肪干细胞与丝素蛋白和壳聚糖支架材料共同构建细胞—支架复合物的实验研究,R329
  19. 缺氧预处理MSCs移植对心肌梗死区SDF-1/CXCR4轴表达变化的实验研究,R542.22
  20. 2型糖尿病伴牙周炎患者牙周膜干细胞多项分化潜能的研究,R587.1
  21. 骨髓间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤移植途径的实验研究,R651.2

中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学
© 2012 www.xueweilunwen.com