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压电传感器真菌鉴定中的应用及镍和柠檬酸配位研究
作 者: 钟鸣
导 师: 何凤姣
学 校: 湖南大学
专 业: 分析化学
关键词: MSPQC传感器 模式识别 偏最小二乘 念珠菌 pH电位滴定 镍 柠檬酸 Hyperquad Glee Hyss 电镀
分类号: R446.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 21次
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内容摘要
一.多通道串联式压电传感器(MSPQC)具有适用对象宽,测定灵敏度高,操作简单方便,可用于实时或在位检测等优点,其应用涉及到分析化学、生命科学、环境监测、临床医学等众多领域。本文充分利用MSPQC的响应特性,并和临床念珠菌的新陈代谢特征相结合,拓宽了压电体声波传感器在临床医学中的应用,使临床念珠菌的检出、鉴定工作更加准确容易,快速方便。鉴于此开展了以下研究工作:1.利用MSPQC和模式识别技术来早期鉴定临床常见念珠菌属病原菌。通过仔细研究MSPQC对不同念珠菌生长情况的响应发现:在相同的实验条件下,不同种的念珠菌在1-2天的培养中产生明显不同类型的频率曲线。利用这种响应曲线的差异,结合偏最小二乘技术(PLS)对不同种真菌产生的特征曲线有效区分,提出了MSPQC-PLS法早期鉴定常见念珠菌的方法。利用所提出的方法,我们成功的将从临床病人身上收集来得73株念珠菌区分成了5个种类(白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌,克柔念珠菌,近平滑念珠菌),区分率达到97.3%。且通过模拟临床情况发现新建的MSPQC-PLS法不仅能够区分这些临床最常见的念珠菌,同时还能够在培养未经处理的临床样本的同时就鉴定出念珠菌的种类,极大的缩短了鉴定时间。2.深入研究了临床常见念珠菌在MSPQC中出现不同响应曲线的原因。利用9M阻抗仪实时记录五种常见念珠菌生长过程中培养瓶电极两端的电参数变化情况,通过与平行在MSPQC中生长得到的频移曲线相对比得出MSPQC中真菌生长的特殊频移曲线的出现主要是由于真菌生长过程改变培养基电导变化引起的,生长过程引起的电容变化不起主导作用。再通过真菌的吸附试验证明真菌的吸附作用引起的电导变化对频移曲线也不起主导作用。利用真菌在YC培养基中不同生长阶段的显微照片我们得出真菌的多形态性所导致的新陈代谢过程的相对复杂性是真菌生长出现特殊代谢曲线的原因。二.柠檬酸是电镀行业常用的一种弱酸配体,准确测定柠檬酸及其盐在电镀过程中的存在形式即其含量对指导电镀生产,发展电镀理论都是及其重要的,然而在电镀过程所处的高温和高离子强度背景条件下的柠檬酸及其盐的配合物组成及其稳定常数的测定一直存在空缺。pH电位滴定法是进行溶液配位化学研究最普遍运用的方法,特点是实验程序简单,计算结果准确。特别是此方法对测定体系的离子强度背景没有限制,适合电镀体系下的配位化学研究。鉴于此本文还开展了以下工作:采用pH电位滴定法研究了电镀体系中Ni2+离子和柠檬酸配位情况。在60℃,I=4mol/L NaCl的实验条件下,测定了柠檬酸的质子化常数。实验确定了Ni2+离子和柠檬酸二元体系在电镀生产条件下水溶液中主要存在的物种,并测定了其稳定常数。实验数据的处理运用计算机程序Hyperquad、Glee、Hyss处理。
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全文目录
摘要 5-7 Abstract 7-11 第1章 绪论 11-22 1.1 临床真菌检验现状 11-13 1.1.1 临床真菌的种类 11-12 1.1.2 临床真菌的培养和鉴定方案 12-13 1.1.3 真菌检验的整体现状 13 1.2 压电传感器的非质量响应 13-15 1.2.1 串联式压电传感器 13-14 1.2.2 其他非质量响应的压电传感器 14-15 1.3 pH 电位滴定法理论及其应用 15-21 1.3.1 pH 电位滴定法基本原理 15-16 1.3.2 pH 电位法中玻璃电极的矫正 16-17 1.3.3 pH 电位法中计算机的应用 17-21 1.4 论文构思与展望 21-22 第2章 多通道串联式压电传感器结合 PLS 用于早期鉴定临床常见念珠菌 22-32 2.1 前言 22-23 2.2 实验部分 23-25 2.2.1 菌株来源 23 2.2.2 培养基 23-24 2.2.3 实验装置:MSPQC 系统 24 2.2.4 真菌数据库的获取以及预测机建立 24-25 2.2.5 模拟临床血样中念珠菌的早期快速鉴定 25 2.3 结果与讨论 25-31 2.3.1 MSPQC 响应原理 25-26 2.3.2 高起始菌量下五中真菌生长产生的特征频率曲线 26-28 2.3.3 低起始菌量下五中真菌生长产生的频率曲线 28 2.3.4 纯培养真菌的分类以及PLS 预测机的建立 28-29 2.3.5 模拟临床血培养中直接鉴定出真菌 29-31 2.4 小结 31-32 第3章 念珠菌特征频移曲线的成因研究 32-42 3.1 前言 32 3.2 实验部分 32-34 3.2.1 菌株来源 32 3.2.2 培养基 32-33 3.2.3 实验仪器 33 3.2.4 实验方法 33-34 3.3 结果与讨论 34-40 3.3.1 五种常见念珠菌生长过程阻抗变化情况 34-36 3.3.2 五种真菌对代谢产物的吸附能力 36-38 3.3.3 五种真菌在不同生长阶段的显微镜下观察 38-40 3.4 小结 40-42 第4章 电镀体系中柠檬酸与镍离子的配位情况研究 42-53 4.1 前言 42 4.2 实验部分 42-44 4.2.1 实验仪器 42 4.2.2 实验试剂 42 4.2.3 实验装置 42-43 4.2.4 实验过程 43-44 4.2.5 数据处理 44 4.3 结果与讨论 44-52 4.3.1 pH 电极矫正结果 44-45 4.3.2 电镀条件下柠檬酸的各级稳定常数 45-46 4.3.3 柠檬酸与镍配合物组成及其稳定常数 46-50 4.3.4 NiCit_2 和NiCitOH 的紫外光谱确认 50-52 4.4 小结 52-53 结论 53-55 参考文献 55-62 附录 本文作者相关论文题录 62-63 致谢 63
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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 微生物学检验
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