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慢病毒介导RNA干扰Cdh1的表达对大鼠脊髓损伤的修复作用

作　者: 祁月红
导　师: 张传汉
学　校: 华中科技大学
专　业: 麻醉学
关键词: 脊髓损伤细胞周期末期促进复合物慢病毒 RNA干扰
分类号: R651.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:观察大鼠脊髓损伤后皮层体感运动区Cdh1 mRNA的表达变化,探讨慢病毒介导RNA干扰Cdh1的表达对脊髓损伤修复的作用。方法:20只雄性成年健康SD大鼠随机分为正常对照组和手术组(1wk组、2wk组),手术组采用Allen氏法在T10-T11建立脊髓打击损伤模型,正常对照组仅咬除T10椎板。1wk、2wk后分别取大鼠前囟后体感运动皮层区域,然后提取组织总RNA,采用实时荧光定量PCR检测Cdh1 mRNA的表达变化。另30只雄性成年SD大鼠随机分为生理盐水注射组(A组,n=10),空慢病毒注射组(B组,n=10)和重组慢病毒注射组(C组, n=10)。3组均采用改良Allen氏法建立脊髓打击损伤模型,术后1wk分别在大鼠前囟后体感运动皮层区注射生理盐水、空慢病毒和重组慢病毒,注射10d后每组取5只采用实时荧光定量PCR检测法检测Cdh1 mRNA的表达并且在术后不同时间点对大鼠进行运动功能采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分标准评估,术后第6wk用同样的方法在原皮层区域注射10%BDA-TR(Biotinylated Dextran Amine - Texas Red)。术后8wk处死并用4%多聚甲醛灌注固定取脊髓损伤区域作冰冻连续纵切片,荧光显微镜下直接观察。结果:大鼠脊髓损伤后1wk和2wk前囟后体感运动皮层区域的Cdh1 mRNA的表达均高于对照组(P<0.05),注射药物后C组Cdh1 mRNA的表达低于A组及B组(P<0.05)。损伤6wk后C组运动功能评分均高于另两组(P<0.05)。C组在脊髓空洞区可见大量神经纤维通过,而A组和B组仅少量通过。结论:大鼠脊髓损伤后Cdh1 mRNA的表达明显升高,通过下调Cdh1的表达能促进轴突的生长,提示Cdh1是具有抑制轴突生长的功能。

全文目录

英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-11
材料与方法  11-18
结果  18-21
讨论  21-23
参考文献  23-26
综述  26-37
  参考文献  33-37
发表文章  37-38
致谢  38

慢病毒介导RNA干扰Cdh1的表达对大鼠脊髓损伤的修复作用

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