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大鼠激素性股骨头坏死模型中OPG表达的变化及其机制研究
作 者: 俞楠泽
导 师: 肖鲁伟;童培建
学 校: 浙江中医药大学
专 业: 中医学
关键词: 大鼠 糖皮质激素 激素性股骨头坏死 OPG c-Fos AP-1 机制
分类号: R681.8
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 53次
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内容摘要
目的诱导大鼠激素性股骨头坏死模型,观察骨保护蛋白(OPG)及其相关因子表达的变化,探讨在激素性股骨头坏死致病过程中OPG表达的变化及其机制。方法Wistar大鼠20只,随机分成正常对照组和模型组。模型组内毒素20μg/kg两次注射,间隔24h后,甲强龙40mg/kg连续注射三次,每次间隔24h;正常对照组:同上连续五天注射等量生理盐水。6周后,腹腔静脉取血,离心取出上清,以ELISA法测血清中OPG和RANKL的含量。处死动物取出双侧股骨头做组织病理HE染色,OPG、RANKL和β—catenin免疫组化染色,OPG及其相关因子的基因芯片分析以及c-Fos、c-Jun和β-catenin基因的实时定量PCR检测。结果基因芯片结果显示,模型组与正常对照组相比,OPG和c-Fos的表达明显降低(R>2),有统计学意义。c-Jun、RANK、RANKL、PDGF、PTH、PTHR、和β-catenin的表达改变无统计学意义(R<2)。ELISA和实时定量PCR检测结果与之相似。正常对照组的OPG和β—catenin免疫组化染色均较之模型组染色深、范围大,RANKL则相反。结论激素性股骨头坏死的发病过程中,OPG的表达下调引起骨重建过程失衡从而导致骨坏死和骨质疏松。在诸多OPG表达的调控因子中,c-Fos和c-Jun所主导的活化蛋白1通路(AP-1)途径发挥主要作用。
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全文目录
中文摘要 5-6 ABSTRACT 6-7 一、前言 7-8 二、材料和方法 8-14 (一) 实验材料 8-9 1. 实验室 8 2. 主要仪器 8 3. 主要试剂 8-9 4. 实验动物 9 (二) 实验方法 9-13 1. 大鼠药物用量换算 9 2. 实验动物分组及SANFH大鼠模型制备 9 3. 动物取材 9-10 4. 组织病理学观察 10 5. ELISA检测 10-11 6. 基因芯片分析 11-12 7. 免疫组化检测 12 8. 实时荧光定量PCR检测 12-13 (三) 数据统计 13-14 三、实验结果 14-17 (一) 股骨头HE染色观察 14 (二) ELISA检测结果 14 (三) 基因芯片分析结果 14-15 (四) 免疫组化检测结果 15 (五) 实时荧光定量PCR检测结果 15-17 四、分析与讨论 17-23 (一) 动物模型的选择 17-19 (二) 大鼠激素性股骨头坏死模型中OPG表达的变化 19-20 1. OPG和RANKL/RANK/OPG系统 19 2. 糖皮质激素对OPG和RANKL/RANK/OPG系统的作用 19-20 (三) 糖皮质激素对OPG相关因子表达的影响 20-22 1. 活化蛋白1通路(AP-1) 20 2. 血小板衍生生长因子(PDGF) 20-21 3. 甲状旁腺激素(PTH) 21 4. Wnt信号通路(Wnt Signaling) 21-22 (四) 存在的问题 22-23 五、结论 23-24 六、参考文献 24-28 附图 28-30 致谢 30-31 附:文献综述 31-38 参考文献 35-38
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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 骨科学(运动系疾病、矫形外科学) > 骨骼疾病 > 下肢骨
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