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PTEN、Smad4与甲状腺乳头状癌相关生物学特性的关系
作 者: 黄亮
导 师: 高明
学 校: 天津医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 甲状腺乳头状癌 PTEN Smad4 FQ-PCR 免疫组织化学
分类号: R736.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 23次
引 用: 1次
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内容摘要
目的通过检测PTENmRNA、Smad4mRNA及其相应蛋白在甲状腺乳头状癌高转移变型组、中转移变型组、低转移变型组、甲状腺腺瘤以及正常甲状腺组织中的表达差异并分析其与甲状腺乳头状癌临床、病理特征(年龄、性别、肿瘤大小局部侵犯、淋巴结转移、TNM分期)的关系,探讨二者之间的相互关系和它们与甲状腺乳头状癌侵袭、淋巴结转移的关系,从而进一步完善甲状腺乳头状癌局部侵犯及淋巴结转移的发生机制,为今后筛选肿瘤侵袭和转移相关标志物,设计预测肿瘤侵袭和转移潜能的检测手段或探索干预甲状腺乳头状癌侵袭和转移的有效措施提供新的理论基础和治疗靶点。方法随机选择自2009年3月至2009年9月期间就诊于天津医科大学附属肿瘤医院并进行手术治疗的94例甲状腺乳头状癌患者,29例甲状腺腺瘤患者。选取上述患者的新鲜标本及组织蜡块,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, FQ-PCR)的方法及免疫组织化学方法检测PTENmRNA、Smad4mRNA及其相应蛋白在不同转移变型组甲状腺乳头状癌组织、甲状腺腺瘤组织、正常甲状腺组织中的表达情况,并将检测结果结合病人的临床和病理资料综合统计分析,探讨上述指标与甲状腺乳头状癌相关临床、病理特征的关系及PTEN、Smad4之间的关系。结果1、PTEN蛋白表达情况高转移变型组中PTEN蛋白表达阳性例数为8例,其阳性表达率为19.1%(8/42),中转移变型组中PTEN蛋白阳性表达例数为13例,其阳性表达率为43.3%(13/30),低转移变型组中PTEN蛋白阳性表达例数为16例,其阳性表达率为72.7%(16/22),甲状腺腺瘤组织中PTEN蛋白阳性表达例数为28例,其阳性表达率为96.6%(28/29),正常甲状腺组织中PTEN蛋白阳性表达例数为93例,其阳性表达率为98.9%(93/94),其中高转移变型组的PTEN阳性率与中转移变型组相比较,组间的表达差异具有统计学意义(x2=4.996,P<0.05);中转移变型组的PTEN阳性率与低转移变型组相比较,组间的表达差异具有统计学意义(x2=4.446,P<0.05);低转移变型组的PTEN阳性率与甲状腺腺瘤组相比较,组间表达差异有统计学意义(x2=4.153,P<0.05);甲状腺腺瘤组与正常甲状腺组相比较,无统计学意义(x2=0.002,P>0.05)。PTEN表达与局部侵犯、淋巴结转移、T分期存在负相关(P<0.05);与年龄、性别及肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。2、Smad4蛋白表达情况高转移变型组中Smad4蛋白表达阳性例数为7例,其阳性表达率为16.7%(7/42),中转移变型组中Smad4蛋白阳性表达例数为12例,其阳性表达率为40.0%(12/30),低转移变型组中Smad4蛋白阳性表达例数为15例,其阳性表达率为68.2%(15/22),甲状腺腺瘤组织中Smad4蛋白阳性表达例数为28例,其阳性表达率为96.6%(28/29),正常甲状腺组织中Smad4蛋白阳性表达例数为92例,其阳性表达率为97.9%(92/94),其中高转移变型组的Smad4阳性率与中转移变型组相比较,组间表达差异有统计学意义(χ2=4.905,P<0.05);中转移变型组的Smad4阳性率与低转移变型组相比较,组间表达差异有统计学意义(x2=4.038,P<0.05);低转移变型组的Smad4阳性率与甲状腺腺瘤组相比较,组间表达差异有统计学意义(x2=5.619,P<0.05);甲状腺腺瘤组与正常甲状腺组相比较,无统计学意义(x2=0.081,P>0.05)。Smad4表达与局部侵犯、淋巴结转移、T分期存在负相关(P<0.05);与年龄、性别及肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。3、PTENmRNA表达情况各组PTENmRNA相对表达量分别为高转移变型组0.136;中转移变型组0.285;低转移变型组0.551;甲状腺腺瘤组织0.979;正常甲状腺组织1.000,差异有统计学意义,F=116.65,P<0.05。组间两两比较除甲状腺腺瘤及正常甲状腺中的表达量差异(P>0.05)无统计学意义外,其余各组之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。4、Smad4mRNA表达情况各组Smad4mRNA相对表达量分别为高转移变型组0.171;中转移变型组0.334;低转移变型组0.607;甲状腺腺瘤组织0.966;正常甲状腺组织1.000,差异有统计学意义,F=103.01,P<0.05。组间两两比较除甲状腺腺瘤及正常甲状腺中的表达量差异(P>0.05)无统计学意义外,其余各组之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。5、PTEN、Smad4之间的关系免疫组化法数据采用配对资料的卡方检验并计算相关系数后,x2=30.73,r0=0.55,(P<0.05);实时荧光定量聚合酶链反应法数据采用两个随机变量关联性分析,r=O.89,tr=4.95;统计分析显示:PTEN和Smad4在甲状腺乳头状癌中的表达有显著正相关性。结论l、甲状腺乳头状癌高、中、低转移变型组各组间PTEN和Smad4的表达具有显著差异,说明PTEN和Smad4的表达缺失及其缺失程度是影响甲状腺乳头状癌侵袭性和转移性的重要因素,两者表达的缺失程度与甲状腺乳头状癌的恶性程度存在量效关系。2、PTEN和Smad4在高、中、低三个转移变型组之间表达的不同为按淋巴结转移率将甲状腺乳头状癌分为三组提供了分子水平上的证据。3、甲状腺乳头状癌的侵袭和转移是一个复杂的过程,牵涉到多个基因和许多信号通路的调节,作为与肿瘤侵袭和转移密切相关的VEGF基因的上游调控基因,PTEN和Smad4及其相关信号通路的调节是其中的一个重要因素。4、PTEN和Smad4在甲状腺乳头状癌中的表达具有相关性,两者之间存在相互协调的关系,在甲状腺乳头状癌的发生发展过程中有协同作用。5、PTEN和Smad4的表达与年龄、性别、肿瘤大小无显著相关性,与肿瘤侵犯程度、淋巴结转移、临床分期均存在显著负相关关系,提示PTEN和Smad4低表达的甲状腺乳头状癌病例具有较高侵袭和转移潜能,可能是预后不良的指标之一
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全文目录
中文摘要 4-7 Abstract 7-13 缩略语/符号说明 13-15 前言 15-17 研究现状、成果 15-16 研究目的、方法 16-17 对象和方法 17-30 1 材料、试剂、仪器 17-20 1.1 实验材料 17 1.2 实验试剂 17-19 1.3 实验仪器 19-20 2 实验方法 20-30 2.1 免疫组织化学染色法 20-22 2.2 FQ-PCR方法 22-30 结果 30-37 1 临床病理资料 30 2 免疫组织化学染色结果 30-34 2.1 PTEN蛋白的表达 30-32 2.2 Smad4蛋白的表达 32-34 2.3 PTEN与Smad4的相关性 34 3 FQ-PCR方法检测结果 34-37 3.1 PTENmRNA检测结果 34 3.2 Smad4mRNA检测结果 34-35 3.3 PTENmRNA与Smad4mRNA表达的相关性 35-37 讨论 37-45 结论 45-46 参考文献 46-51 发表论文和参加科研情况说明 51-52 附录 52-56 综述 56-70 综述参考文献 65-70 致谢 70
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 内分泌腺肿瘤 > 甲状腺肿瘤
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