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靶向c-myc基因小RNA干扰对胆囊癌细胞侵袭运动的影响
作 者: 蔡民
导 师: 李立波
学 校: 浙江大学
专 业: 外科学
关键词: c-myc 胆囊癌 转移 siRNA LIN28 let-7
分类号: R735.8
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 36次
引 用: 0次
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内容摘要
目的:通过观察c-myc对胆囊癌细胞运动和侵袭能力的影响,以论证c-myc在肿瘤侵袭和转移中的作用,为胆囊癌侵袭和转移干预提供分子靶点。方法:采用实时定量PCR和western blot检测亲代和高转移胆囊癌细胞系中c-myc基因表达,设计靶向c-myc的小RNA[small interference RNA,siRNA]转染高转移的胆囊癌细胞,通过体外侵袭实验研究c-myc siRNA对胆囊癌高转移细胞迁移和侵袭能力的影响。此外,通过western blot方法检测转染c-myc siRNA后c-myc下游部分信号通路的变化,进一步研究c-myc siRNA抑制胆囊癌细胞转移的机制。结果:通过实时定量PCR检测发现,c-myc的RNA水平在GBC-SD/M3细胞中是其在GBC-SD细胞中的2.18倍(p=0.0019);在蛋白水平上,c-myc在GBC-SD/M3中的表达也高于其在GBC-SD中的表达。靶向c-myc的siRNA转染GBC-SD/M3细胞后,与对照相比,c-myc siRNA能够有效地抑制c-myc蛋白在GBC-SD/M3细胞中的表达。与对照相比,c-myc siRNA可以有效的抑制GBC-SD/M3细胞的迁移(p=0.0168)。对GBC-SD/M3细胞的侵袭能力检测后发现,c-myc siRNA同样也能够有效的抑制GBC-SD/M3细胞的侵袭(p=0.0005)。进一步检测c-myc siRNA对LIN28蛋白水平的影响,表明c-myc siRNA转染后,LIN28的蛋白水平也相应下调,let-7a的表达水平有所上升,从而抑制肿瘤细胞的转移。结论:c-myc在高转移的胆囊癌细胞中表达上调。通过siRNA下调其表达后可以抑制胆囊癌细胞的转移和侵袭,这种抑制作用可能与LIN28的下调有关。
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全文目录
致谢 4-5 中文摘要 5-7 ABSTRACT 7-9 目录 9-10 1 引言 10-12 2 材料与方法 12-15 2.1 材料 12 2.2 方法 12-15 3 结果 15-22 3.1 C-MYC在两株具有不同转移能力的细胞系中的表达 15-17 3.2 C-MYC sIRNA抑制C-MYC蛋白的表达 17-18 3.3 C-MYC sIRNA抑制GBC-SD/M3的迁移和侵袭 18-20 3.4 C-MYC的下游分子LIN28和LET-7A表达 20-22 4 讨论 22-28 4.1 C-MYC基因在胆囊癌细胞中的表达 22-23 4.2 sIRNA干扰与肿瘤治疗 23-25 4.3 靶向C-MYC基因小RNA干扰对胆囊癌细胞侵袭运动的影响 25-28 5 结论 28-29 参考文献 29-32 综述 32-38 参考文献 36-38 作者简历及在学期间发表的文章 38
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胆囊、胆道肿瘤
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