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利用黄籽羽衣甘蓝人工合成甘蓝型油菜初步研究
作 者: 陈树忠
导 师: 唐章林;殷家明;李加纳
学 校: 西南农业大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 羽衣甘蓝 白菜型油菜 黄籽 品质分析 人工合成甘蓝型油菜
分类号: S565.4
类 型: 硕士论文
年 份: 2001年
下 载: 73次
引 用: 1次
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内容摘要
甘蓝型黄籽油菜的种子含油量、饼粕蛋白质含量通常比同一遗传来源的甘蓝型黑籽油菜的高,而且商品性好,选育甘蓝型油菜黄籽油菜已成为当前油菜育种的主要目标之一。控制黄色籽粒基因遗传资源的缺乏是甘蓝型黄籽油菜育种的主要障碍,发掘新的黄籽遗传资源势在必行。1994年,西南农业大学油菜研究室在十字花科芸薹属甘蓝种的变种羽衣甘蓝天然群体中发现了黄籽单株,经过多年人工选择,选育出几个表现较好的羽衣甘蓝黄籽品系,它们是甘蓝型黄籽油菜育种和油菜籽粒颜色遗传研究的宝贵基因资源。 本试验对羽衣甘蓝进行了农艺性状考查和品质分析。结果表明,羽衣甘蓝的农艺性状表现与甘蓝型油菜极为相似。种子含油量、胚饼蛋白质含量比对照中油821的高,综合品质表现优良。 为了了解羽衣甘蓝C染色体组黄籽基因与A染色体组黄籽基因间的相互关系,探索黄籽基因转移到甘蓝型油菜中的可行性,实验以白菜型黄籽油菜和黄籽羽衣甘蓝为材料,采用远缘杂交子房培养和原生质体融合两种不同方法进行了人工合成甘蓝型油菜研究。远缘杂交子房培养结果表明,以黄籽白菜型油菜为母本,黄籽羽衣甘蓝作父本,取授粉后10d左右的子房在MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+7%Sucrose+300mg/LCH+0.8%Agar培养基上胚胎挽救效果最为理想。子房培养共收获19粒种子(结籽率为3.4粒/100子房),其中8粒种子在培养基上萌发(萌发率为42.1%),通过离体繁殖获得了4个无性系。白菜型油菜和羽衣甘蓝之间原生质体融合难度较大,试验中仅观察到细胞团的形成,没有获得理想的再生植株。对子房培养获得的无性系进行形态学、细胞学、生物化学等多种方法综合鉴定表明,有两个为白菜型油菜和羽衣甘蓝杂交的真杂种,它们将是开展甘蓝型黄籽油菜育种的重要材料。
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全文目录
中文摘要 4-5 英文摘要 5-7 一、 文献综述 7-14 1 甘蓝型油菜合成方法研究 7-12 1.1 常规杂交技术 7-8 1.1.1 二倍体物种间杂交 7-8 1.1.2 四倍体种间杂交 8 1.2 胚挽救技术 8 1.3 体细胞杂交 8-12 1.3.1 原生质体分离 9 1.3.2 芸薹属作物的原生质体培养 9-11 1.3.3 原生质体融合 11-12 2 杂种鉴定 12 3 人工合成甘蓝型油菜取得的主要成就 12-14 3.1 细胞遗传学研究 12 3.2 基因转移 12-14 3.2.1 胞质基因转移和重组 13 3.2.2 抗性基因转移 13 3.2.3 其它重要基因转移 13-14 二、 引言 14-16 三、 材料和方法 16-19 1. 材料 16 2. 主要试剂及仪器设备 16 3. 方法 16-19 3.1 羽衣甘蓝主要性状的测定 16 3.1.1 农艺性状考察 16 3.1.2 品质性状测试 16 3.2 黄籽羽衣甘蓝和黄籽白菜型油菜的杂交试验 16-19 3.2.1 田间杂交试验 16-17 3.2.2 子房培养 17 3.2.3 体细胞杂交 17-18 3.2.4 杂交后代的鉴定 18-19 3.2.4.1 细胞学鉴定 18 3.2.4.2 酯酶同工酶鉴定 18 3.2.4.3 可溶性蛋白质电泳分析 18-19 四、 结果与分析 19-29 1 羽衣甘蓝农艺性状和品质性状分析 19-20 1.1 羽衣甘蓝的形态特征 19 1.2 羽衣甘蓝的栽培特性 19 1.3 羽衣甘蓝的农艺性状分析 19-20 1.4 羽衣甘蓝的品质性状分析 20 2 白菜型油菜和羽衣甘蓝远缘杂交胚胎挽救 20-24 2.1 大田杂交试验 20-21 2.2 子房培养大与田杂交试验效率比较 21-22 2.3 培养基激素水平对白×羽子房培养效率的影响 22-23 2.4 培养基蔗糖浓度对白×羽子房培养效率的影响 23 2.5 不同培养基种类对白×羽子房培养的比较实验 23-24 2.6 杂交后代的离体快繁 24 3 白菜型油菜和羽衣甘蓝原生质体分离、融合与培养 24-27 3.1 酶解时间对原生质体产量及活力的影响 24-25 3.2 不同酶浓度处理效果的比较 25-26 3.3 PEC浓度对原生质体融合及分裂效果的比较 26 3.4 培养基种类和激素水平对原生质体细胞分裂的影响 26-27 4 杂种鉴定 27-29 4.1 形态学鉴定 27 4.2 细胞学鉴定 27 4.3 酯酶同工酶分析 27 4.4 可溶性蛋白质的SDS-PACE分析 27-29 五、 讨论 29-32 六、 结论 32-33 缩略词表 33-34 致谢 34-35 参考文献 35-40 附录 40-46
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 油料作物 > 油菜籽(芸薹)
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