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甘蓝型油菜自交不亲和分子机理的初步研究

作　者: 唐维
导　师: 马朝芝
学　校: 华中农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 甘蓝型油菜自交不亲和性分子标记基因克隆序列分析 Northern杂交 Realtime PCR
分类号: S565.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

自交不亲和是油菜杂种优势利用的重要途径之一,但对其分子机理却很少报道。本研究以甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300和124份亲和甘蓝型油菜为材料,通过克隆S-1300的S位点基因SRK、SP11和SLG（BnSRK-S-1300、BnSP11-S-1300和BnSLG-S-1300）、建立可鉴别甘蓝型油菜S位点基因型的SCAR标记体系、分析SRK、SP11在S-1300、父本和F₁的表达差异,初步探讨了甘蓝型油菜自交不亲和分子机理。主要结果如下:1.得到了S-1300的SRK、SP11和SLG全长序列:BnSRK-S-1300大小为8367 bp,包括7个外显子和6个内含子;BnSP11-S-1300大小为607 bp,包含2个外显子和1个内含子;BnSLG-S-1300全长基因序列大小为1672 bp,包含2个外显子和1个内含子。2.BnSRK-S-1300与BrSRK-60的序列相似性最高,达98%;它们之间的序列差异集中在Exon4、Intron4、Intron5和Intron6上。与BrSRK-60相比,BnSRK-S-1300的Exon4只有91%的序列相似性,Intron4、Intron5和Intron6的序列相似性不高于82%。BnSP11-S-1300与BrSP11-60的相似性高达100%,而与BoSP11-15只有97%的相似性,并且有5 bp的插入和2 bp的缺失。BnSLG-S-1300与BrSLG-60的相似性最高,达99%,与BoSLGB有98%的相似性。以上说明S-1300是新的S单倍型,并且与白菜S-60可能具有共同的祖先。3.建立了一套SCAR分子标记体系,包括两个多重PCR标记（ISLG+SP110、ISLGb-L+SP11a）和一个单PCR标记（SRKa）,可用于鉴定甘蓝型油菜S位点的基因型。4.分子标记选择E基因型和F基因型的甘蓝型油菜作为父本、S-1300作为母本以及它们的F₁后代用于表达研究。Northern杂交和Realtime PCR的结果一致表明,SP11只在自交不亲和系S-1300中表达,SRK在S-1300、父本和F₁中都表达,在母本S-1300中表达量最高。

甘蓝型油菜自交不亲和分子机理的初步研究

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