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秸杆固态发酵酒精高产菌株的选育

作　者: 董秀芹
导　师: 孙君社
学　校: 中国农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 康氏木霉酵母诱变融合纤维素酶发酵力
分类号: TS261.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
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引　用: 3次
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内容摘要

本论文对秸杆固态发酵高产菌株进行了研究，包括霉菌的选育和酵母菌的选育两大部分。霉菌的出发菌株为康氏木霉TR，对其产酶的最优条件进行探索，结果表明产酶最适条件为132h、葡萄糖浓度0.5％、料水比1:1.1、最适温度30℃，此时CMC酶活为78.6IU/g曲，βG酶活21.0IU/g曲，FPA酶活33.6IU/g曲。康氏木霉经过紫外线诱变，结合双层平板分离技术选育，纤维素酶产量明显提高，CMC酶活从最初的78.6IU/g曲提高到235.17IU/g曲，βG酶活从21.0IU/g曲提高到91.60IU/g曲，FPA酶活从33.6IU/g曲达119.56IU/g曲。经过数代活化测定后，它们遗传性状稳定，可以作为进一步诱变的出发菌株。酵母的出发菌株为1＃、2＃、3＃、4＃，其中1＃和3＃产酒精能力较高，分别为6.978％和6.823％，而2＃和4＃发酵力较差，但它们耐高温能力好，实验中采用PEG和电场诱导两种原生质体融合技术，获得五株稳定的融合子F2、F5、F7、F14、F20。对这五株融合子的倍性、生物学特性、遗传稳定性及死灭温度和发酵力的测定结果表明，它们均为单核稳定的融合子。以发酵培养基测定，F5、F7、F14、F20在38℃比1＃菌株在30℃的发酵力相同或偏高。通过多次融合试验发现，PEG诱导融合效率最高为3.1×10^-6，而电场诱导融合效率达5.64×10^-4（条件是脉冲强度为11KV，脉冲宽度为10μS，脉冲间隔为10S，脉冲次数为3），但二者融合结果无明显的区别。

全文目录

第一章绪论  6-17
  1．1 目前纤维素的研究情况  6-13
    1．1．1 纤维素材料预处理研究进展  7-8
    1．1．2 纤维素降解的研究  8-10
    1．1．3 纤维性材料酒精发酵的研究进展  10-12
    1．1．4 纤维素材料固态发酵的研究  12-13
  1．2 菌株的诱变选育  13-16
    1．2．1 诱变机理  14-15
    1．2．2 原生质体融合  15-16
  1．3 本论文研究的内容和意义  16-17
第二章高产纤维素酶菌株的诱变选育及粗酶液性质的测定  17-30
  2．1 材料和方法  17-22
  2．2 结果与讨论  22-30
    2．2．1 出发菌株TR的菌落形态观察  23
    2．2．2 培养时间对产酶的影响  23-24
    2．2．3 水分对霉菌产酶的影响  24-25
    2．2．4 温度对霉菌产酶的影响  25-27
    2．2．5 葡萄糖浓度对霉菌产酶的影响  27-28
    2．2．6 诱变试验结果与讨论  28-30
第三章高产酒精酵母菌株的选育  30-56
  3．1 遗传标记的获得  30-36
    3．1．1 材料与方法  30-31
    3．1．2 遗传标记的获得  31-32
    3．1．3 菌株2＃遗传标记的获得  32-33
    3．1．4 结果与讨论  33-36
  3．2 原生质体融合  36-45
    3．2．1 材料与方法  36-38
    3．2．2 结果与讨论  38-45
  3．3 融合子筛选及鉴定  45-56
    3．3．1 材料与方法  45-48
    3．3．2 结果与讨论  48-56
结论  56-60
致谢  60

秸杆固态发酵酒精高产菌株的选育

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