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菊芋叶黄酮类化合物的提取及其抗氧化性、抗肿瘤和抑菌性的研究
作 者: 吴婧
导 师: 李志忠
学 校: 兰州理工大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 菊芋叶黄酮 提取 稳定性 抗氧化性 抗肿瘤 抑菌性
分类号: S632.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
日益严重的化学合成物质对环境的污染和毒性问题,使得人们对植物天然产物的需求越来越关注。植物中的活性成分已成为人们研究的主要对象之一。黄酮类化合物(flavonoids)是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)结构的化合物,是开发天然抗氧化剂的重要来源。因此本文以菊芋叶片为原料,通过单因素实验和正交实验设计探讨了菊芋叶片黄酮类化合物的最佳提取工艺条件。并对菊芋叶黄酮提取物的部分生物活性,包括其稳定性、抗氧化性、抗肿瘤活性及抗菌活性等进行初步研究。主要内容与结果如下:1.菊芋叶黄酮类化合物的提取工艺采用三种方法对菊芋叶片中的黄酮类物质进行了提取,最佳提取工艺分别为:乙醇回流法提取法菊芋叶黄酮的最佳条件为:乙醇浓度为80%,料液比为1:35,提取温度为90℃,提取时间为2h,此条件下黄酮类物质的得率为1.411%。超声辅助乙醇法提取菊芋叶黄酮的最佳条件为:料液比1:20,乙醇浓度60%,提取时间为30min,提取温度为80℃,此条件下总黄酮物质的提取率为1.921%。微波辅助乙醇法提取菊芋叶黄酮的最佳条件为:乙醇浓度50%,提取时间为5min,料液比为1:30,微波功率为300W,此条件下黄酮类物质的得率为2.481%。比较三种不同提取方法,微波提取黄酮得率最高,乙醇浓度最低且大大缩短提取时间,因此用微波提取较好,本试验以后均采用微波提取。2.菊芋叶黄酮类化合物的部分生物活性研究稳定性实验表明,菊芋叶黄酮有一定的耐热性,但应避免高温、强碱及氧化还原剂,应最好密封避光常温保存。抗氧化性实验表明,菊芋叶黄酮提取物对超氧阴离子、羟自由基和DPPH自由基均有一定的清除作用,且清除效果随着提取液加入量的增加而增加。菊芋叶黄酮还对抗油脂过氧化有一定的效果。抗肿瘤实验表明,当提取物浓度达到200μg/mL时,对人鼻咽癌细胞(KB)、人肝癌细胞(HepG-2)、人白血病细胞(K562)都表现出一定的抑制作用。结合抑菌圈、最低抑菌浓度(MIC)实验结果综合来看,抑制作用从大到小依次为:金黄色葡萄球菌>大肠杆菌>枯草芽孢杆菌。
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全文目录
摘要 8-9 Abstract 9-12 第1章 引言 12-27 1.1 菊芋的简介及研究进展 12 1.2 菊芋资源的利用 12-14 1.2.1 菊芋块茎的利用 13-14 1.2.2 菊芋叶片的利用 14 1.3 黄酮类化合物的概述 14-17 1.3.1 黄酮类化合物的分类及化学结构 14-16 1.3.2 黄酮类化合物的理化性质 16-17 1.4 黄酮类化合物的提取 17-20 1.4.1 水提取法 18 1.4.2 碱性水或碱性稀醇提取法 18 1.4.3 有机溶剂法 18 1.4.4 微波提取法 18-19 1.4.5 超声波提取法 19 1.4.6 酶法提取 19 1.4.7 超临界萃取法 19-20 1.5 黄酮类化合物含量的分析测定方法 20-21 1.5.1 间接比色法 20-21 1.5.2 直接比色法 21 1.6 黄酮类物质的生理活性研究进展 21-26 1.6.1 黄酮类物质的抗氧化作用及其评价方法方法 21-23 1.6.2 黄酮类物质的抗肿瘤作用 23-25 1.6.3 黄酮类物质的抑菌作用及其评价方法 25-26 1.7 本研究课题的目的及主要研究内容 26-27 1.7.1 研究课题的目的 26 1.7.2 主要研究内容 26-27 第2章 菊芋叶基本成分测定及黄酮提取工艺优化 27-44 2.1 材料与仪器 27-28 2.1.1 材料与试剂 27 2.1.2 仪器 27-28 2.2 实验方法 28-30 2.2.1 菊芋叶片基本成分分析 28 2.2.2 定性检测 28-29 2.2.3 定量检测 29 2.2.4 菊芋叶片黄酮类物质的提取方法 29-30 2.3 结果与讨论 30-43 2.3.1 菊芋叶基本成分含量 30-31 2.3.2 菊芋叶黄酮提取液的定性检测 31 2.3.3 乙醇回流法单因素试验及结果分析 31-34 2.3.4 乙醇回流法正交试验及结果分析 34-35 2.3.5 超声波辅助乙醇法单因素试验及结果分析 35-37 2.3.6 超声波辅助乙醇法正交试验及结果分析 37-39 2.3.7 微波辅助乙醇法单因素试验及结果分析 39-41 2.3.8 微波辅助乙醇法正交试验及结果分析 41-43 2.4 本章小结 43-44 第3章 菊芋叶黄酮的纯化及其稳定性的研究 44-50 3.1 材料与仪器 44 3.1.1 材料与试剂 44 3.1.2 仪器 44 3.2 实验方法 44-46 3.2.1 菊芋叶黄酮的纯化 44-45 3.2.2 菊芋叶黄酮稳定性的研究 45-46 3.3 结果与讨论 46-49 3.3.1 温度对菊芋叶黄酮稳定性的影响结果 46 3.3.2 pH 值对菊芋叶黄酮稳定性的影响结果 46-47 3.3.3 自然光和空气对菊芋叶黄酮稳定性的影响结果 47-48 3.3.4 碳水化合物对菊芋叶黄酮稳定性的影响结果 48 3.3.5 氧化剂H_20_2 和还原剂Na_2S0_3 对菊芋叶黄酮稳定性的影响结果 48-49 3.4 本章小结 49-50 第4章 菊芋叶黄酮类物质抗氧化性的研究 50-57 4.1 材料与仪器 50-51 4.1.1 材料与试剂 50 4.1.2 仪器 50-51 4.2 实验方法 51-53 4.2.1 菊芋叶黄酮清除超氧阴离子能力的测定 51 4.2.2 菊芋叶黄酮清除羟自由基能力的测定 51-52 4.2.3 菊芋叶黄酮对DPPH 自由基的清除作用 52 4.2.4 菊芋叶黄酮抗猪油氧化性能的测定 52-53 4.3 结果与讨论 53-56 4.3.1 菊芋叶黄酮对超氧阴离子的清除作用 53-54 4.3.2 菊芋叶黄酮对羟自由基的清除作用 54-55 4.3.3 菊芋叶黄酮对DPPH 的清除作用 55 4.3.4 菊芋叶黄酮抗猪油氧化性能研究 55-56 4.4 本章小结 56-57 第5章 菊芋叶黄酮类物质抗肿瘤作用的研究 57-62 5.1 材料与仪器 58 5.1.1 材料与试剂 58 5.1.2 仪器 58 5.2 实验方法 58-60 5.3 结果与分析 60-61 5.4 本章小结 61-62 第6章 菊芋叶黄酮类物质抑菌性的研究 62-67 6.1 材料与仪器 63 6.1.1 材料与试剂 63 6.1.2 实验仪器 63 6.2 实验方法 63-65 6.2.1 细菌悬液制备 63 6.2.3 实验样液配制 63 6.2.4 菌种的活化 63 6.2.5 抑菌实验 63-65 6.3 结果与分析 65-66 6.3.1 提取物的抑菌效果 65 6.3.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定结果 65-66 6.4 本章小结 66-67 结论 67-69 参考文献 69-75 致谢 75-76 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 76
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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 薯芋类(块茎类) > 其他
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