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天山北坡加工番茄病毒病主要病毒及其动态的分子检测

作 者: 赵祥树
导 师: 向本春
学 校: 石河子大学
专 业: 植物病理学
关键词: 分子检测 黄瓜花叶病毒 番茄花叶病毒 消长动态 感病性 耐病性
分类号: S436.412.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 26次
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内容摘要


2009年7-8月对阜康、玛纳斯、昌吉三坪农场、石河子、奎屯、乌苏加工番茄上病毒病的发生进行了初步调查,调查发现:上述地区的病毒病发生情况有明显差异,从田间发病症状来看,上述地区均发现有少量的顶端叶片黄化症状;石河子、奎屯、乌苏田间病毒症状以蕨叶和花叶为主;阜康、玛纳斯、昌吉三坪农场未发现蕨叶和花叶症状。利用RT-PCR方法,对上述地区采集的138份加工番茄样品进行检测,结果表明:只在石河子、奎屯、乌苏地区的加工番茄上检测到CMV和ToMV,但上述6个地区均未检测出TSWV和TMV。CMV的检出率为39.1%,ToMV的检出率为28.3%,CMV和ToMV复合侵染的检出率为23.9%。2009年6-9月对石河子蔬菜研究所的加工番茄病毒病发生进行定点定期调查,结果发现:病毒症状主要有蕨叶、花叶、条斑症状,也有丛顶,顶端叶片黄化症状。随着时间的推移,病毒病的田间发病率在不断增加。对石河子蔬菜研究所石红3号、石红208、石红302等6个品种加工番茄,按不同时间采集660份样品,进行RT-PCR检测,结果表明:CMV的检出率为21.5%,ToMV的检出率为12.1%,2种病毒的复合检出率为8.9%。CMV在上述品种中的检出率明显高于ToMV,但CMV和ToMV在品种间的发生没有明显差异。CMV发生在6月25日左右,ToMV发生在7月11日左右。CMV的发生高峰期出现在7月下旬-8月下旬,ToMV的发生高峰期出现在8月中下旬,复合侵染发病期在7月下旬。对里格尔87-5、嘉禾二号、红番9号等6个加工番茄主栽品种,针对CMV和ToMV,进行室内接种试验及RT-PCR检测,结果说明:不同品种的加工番茄耐病性存在差异。CMV和ToMV混合接种时,上述品种出现症状时间及坏死程度具有明显差异,钻石红2369和红番9号对2种病毒复合侵染具有耐病性,而其他感病性较强;CMV单独接种时,第20天时,上述品种均未表现症状,但均可检测到CMV,说明均对CMV具有一定的耐病性;ToMV单独接种时,第15天时,石红1号和嘉禾二号出现花叶症状,其余品种未出现,但均可以检测到ToMV,因此,石红1号和嘉禾二号较其他品种对ToMV的感病性较强。从发病症状和RT-PCR检出率大小来看,嘉禾二号、里格尔87-5和石红1号属于易感病品种;石番3号属于感病品种,钻石红2369和红番9号属于较耐病品种。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-10
第一章 文献综述  10-18
  1.1 不同种类番茄病毒病的发生概况  10-11
    1.1.1 番茄病毒病田间症状及危害  10
    1.1.2 番茄病毒病的分布及种类  10
    1.1.3 新疆加工番茄病毒病的研究现状  10-11
  1.2 四种主要病毒的研究概况  11-13
    1.2.1 烟草花叶病毒(TMV)的研究  11
    1.2.2 黄瓜花叶病毒(CMV)的研究  11-12
    1.2.3 番茄花叶病毒(ToMV)研究  12-13
    1.2.4 番茄斑萎病毒(TSWV)研究  13
  1.3 加工番茄病毒病害的主要检测方法  13-18
    1.3.1 生物学检测方法  13-14
    1.3.2 电子显微镜检测法  14
    1.3.3 酶联免疫吸附法(ELISA)  14
    1.3.4 分子生物学检测方法  14-18
第二章 材料与方法  18-23
  2.1 材料  18-19
    2.1.1 毒原  18
    2.1.2 加工番茄实验品种  18
    2.1.3 酶及试剂  18
    2.1.4 主要仪器  18
    2.1.5 引物  18-19
  2.2 方法  19-23
    2.2.1 田间调查  19
    2.2.2 样品的采集  19
    2.2.3 毒原的分离  19
    2.2.4 加工番茄不同品种的抗病性试验  19
    2.2.5 加工番茄不同品种的种子带毒率的检测  19-20
    2.2.6 病原病毒总RNA的提取  20-21
    2.2.7 RT-PCR体系的建立及其优化  21-23
第三章 结果与分析  23-32
  3.1 天山北坡加工番茄病毒病害的发生与危害  23
    3.1.1 天山北部地区加工番茄病毒病症状的初步调查  23
    3.1.2 石河子蔬菜研究所加工番茄病毒症状的定点定期调查  23
  3.2 天山北部地区加工番茄的病毒种类及消长动态  23-27
    3.2.1 RT-PCR体系的建立及优化  23-24
    3.2.2 加工番茄病毒种类的分子检测及消长动态  24-27
  3.3 加工番茄种子带毒率的RT-PCR的检测  27
    3.3.1 不同品种加工番茄RNA的提取  27
    3.3.2 RT-PCR检测  27
  3.4 不同品种加工番茄抗病性的比较分析  27-32
    3.4.1 毒原分离纯化  27-28
    3.4.2 毒原的RT-PCR鉴定  28-29
    3.4.3 不同品种加工番茄接毒后的症状反应  29-31
    3.4.4 不同品种加工番茄的抗病性比较  31-32
第四章 结论与讨论  32-34
  4.1 进一步明确了新疆加工番茄的的主要病毒种类为CMV和ToMV  32
  4.2 初步弄清了天山北部地区加工番茄上CMV和ToMV的消长动态  32
  4.3 初步明确不同品种加工番茄抗病性的表现差异  32-34
参考文献  34-39
附录1 常用缓冲液及培养基配方  39-41
附录2 主要符号表  41-42
致谢  42-43
作者简介  43-44
石河子大学硕士研究生学位论文 导师评阅表  44

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 蔬菜病虫害 > 茄果类病虫害 > 番茄病虫害 > 病害
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