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乳铁蛋白的提取、促进铁吸收及其抑菌性质的研究

作　者: 张英华
导　师: 杨同舟
学　校: 东北农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 乳铁蛋白提取酶联免疫热稳定性铁吸收抑菌作用
分类号: TS201.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2000年
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引　用: 8次
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内容摘要

乳铁蛋白（LF）是一种铁结合糖蛋白，分子量大约是77000±2000Da，pI=8.0±0.2。乳铁蛋白具有多种生物活性。本课题对LF的提取条件、检测方法、热稳定性、补铁功能、抑菌作用等进行了全面深入的研究。 1.建立三种LF的免疫学检测方法---酶联免疫法、单相免疫扩散法、双相免疫扩散法。其中酶联免疫法精确度高，最小检出量为0.5mg/L，线性范围为0.8～100mg/L。单相免疫扩散法是一种操作较为简便的定量检测方法，适用于在提取过程中测定LF的浓度。双相免疫扩散法是一种特异性强，操作较为简单的定性检测方法，通过抗原和抗体形成的沉淀线来判断乳铁蛋白的存在。 2.本实验用色谱法提取乳铁蛋白，柱材料为CM Sephadex C-50，在pH值为7.4时，用含有NaCl的磷酸盐缓冲液进行线性梯度洗脱。 3.为了建立一种针对乳铁蛋白的有效的杀菌方法，研究了乳铁蛋白在不同pH值下，经热处理后其免疫活性和抑菌效果的变化。将乳铁蛋白的pH值分别调至3.7～8.0，在65～135℃几个不同的温度下进行热处理后，用免疫双扩散法检测其免疫活性，以及对大肠杆菌的抑菌效果。结果表明，pH4.8、75℃加热5min，不仅保持LF的溶解性和免疫活性，而且能大大提高其抑菌效果。 4.乳铁蛋白可以通过增加肠道内无机铁的溶解度来促进铁的吸收，本实验测定在磷酸根存在的中性pH值条件下，乳铁蛋白对Fe³⁺和Fe²⁺溶解度的影响，结果表明LF对Fe³⁺和Fe²⁺均有增溶作用。 5.抑菌实验选择大肠杆菌和沙门氏菌两种肠道致病菌。随着乳铁蛋白浓度的增加，对两种菌的抑菌效果均明显增强。pH值对乳铁蛋白的抑菌作用也有影响，对大肠杆菌的最佳抑菌pH值为7.4，对沙门氏菌的最佳抑菌pH值为7.0。另外乳铁蛋白与免疫球蛋白和溶菌酶具有协同的抑菌作用。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
1．前言  7-15
  1．1 研究的目的和意义  7-8
  1．2 国内外研究动态及趋势  8-13
  1．3 实验研究的主要目的和方法  13-14
  1．4 实验研究预期效果  14-15
2．材料和方法  15-22
  2．1 试剂与器材  15-16
  2．2 实验方法  16-22
3．结果与讨论  22-38
  3．1 酶联免疫法测定乳铁蛋白含量  22-23
  3．2 单相免疫扩散法测定乳铁蛋白含量  23-24
  3．3 乳铁蛋白的提取  24-25
  3．4 热处理对乳铁蛋白免疫活性和抑菌作用的影响  25-28
  3．5 乳铁蛋白对二价铁和三价铁的增容作用  28-31
  3．6 乳铁蛋白的抑菌实验  31-35
  3．7 乳铁蛋白添加到婴儿配方奶粉中的应用  35-38
4．结论  38-40
致谢  40-41
参考文献  41-44

乳铁蛋白的提取、促进铁吸收及其抑菌性质的研究

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