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氟苯尼考在黄颡鱼体内的药物动力学和残留的研究
作 者: 杨倩
导 师: 吴志新
学 校: 华中农业大学
专 业: 水产养殖
关键词: HPLC法 氟苯尼考 药物动力学 残留 黄颡鱼
分类号: S948
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
本文建立了高效液相色谱法(HPLC)同时检测黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)血浆及各组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺的方法,并以此方法研究了25℃水温条件下单次口灌氟苯尼考在健康黄颡鱼体内的药物动力学特征和多次口灌的残留消除规律。1.建立了反相高效液相色谱同时检测黄颡鱼组织中氟苯尼考及其主要代谢物氟苯尼考胺含量的方法。该方法以丙酮为萃取剂,正己烷去脂,乙腈-磷酸二氢钠缓冲液(30/70,V/V)为流动相,检测波长为225nm,柱温30℃,流速1.0mL/min,采用Agilent1200型高效液相色谱仪检测。结果显示,在0.05-10.00μg/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好。氟苯尼考在各组织中的平均回收率为81.4%~89.0%,氟苯尼考胺在各组织中的平均回收率为80.4%~85.7%。各组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺的检测限分别为:血浆中0.025μg/mL,0.015μg/mL;肌肉中0.015μg/g,0.01Oμg/g;皮肤中0.030μg/g,0.020μg/g;肝脏中0.025μg/g,0.025μg/g;肾脏中0.050μg/g,0.025μg/g。所建立的检测方法可以同时检测鱼组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺的含量。2.研究了25℃水温条件下,以10mg/(kg.bw)的剂量单次口灌给药后,氟苯尼考和氟苯尼考胺在黄颡鱼体内的药物动力学和组织分布特征。结果显示,在血浆,肌肉,皮肤中,氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺药-时曲线均符合一室模型;在肝脏和肾脏中,氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺药-时曲线符合二室模型,血液中表观分布容积(Vd/F)为2.52L/kg,说明药物在黄颡鱼体内分布广泛。在各组织中的达峰时间为肝脏(1.82h)<肾脏(2.26h)<皮肤(6.15h)<肌肉(6.32h),表明药物在肝脏和肾脏内迅速蓄积。各组织中氟苯尼考胺的Cmax均较氟苯尼考低,说明氟苯尼考在黄颡鱼体内主要以原形药物代谢消除。本实验中,氟苯尼考在黄颡鱼体内的最大血药浓度为2.35μg/mL,与大多数水产致病菌的最小抑菌浓度(MIC)比值都大于4,说明氟苯尼考在黄颡鱼体内的血药浓度可以达到抑菌效果。3.研究了以10mg/(kg.bw)·d的剂量连续口灌给药3d后,氟苯尼考及其主要代谢物氟苯尼考胺在带皮肌肉中的残留规律。目前国际上大多数国家对于氟苯尼考药物残留的规定是:氟苯尼考及其主要代谢物氟苯尼考胺的总和为1mg/kg。本实验结果表明,给药1d后在黄颡鱼的可食组织中两者之和的平均总浓度为3.39μg/g,高于1μg/g,在给药3d后实验所测所有个体中氟苯尼考及氟苯尼考胺的总浓度为0.5μg/g,低于最大残留限量1μg/g,5d后所有个体中氟苯尼考及氟苯尼考胺的总浓度为0.062μg/g,低于日本的最大残留限量0.1μg/g,7d后二者均检测不到。因此建议在25℃水温条件下以10mg/(kg.bw)·d的剂量多次口灌给药后,休药期(WDT)不少于3d。若要达到日本规定的最大残留限量0.1μg/g,则休药期(WDT)不少于5d。
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全文目录
摘要 7-9 Abstract 9-11 缩略语表 11-12 第一章 文献综述 12-23 1.1 氟苯尼考的理化性质 12-14 1.1.1 氟苯尼考和氟苯尼考胺的化学名称和化学结构 12-13 1.1.2 氟苯尼考的理化性质及作用机理 13-14 1.2 氟苯尼考的药效学及毒理学研究 14-16 1.2.1 氟苯尼考的药效学研究 14-16 1.2.2 氟苯尼考的毒理学研究 16 1.3 氟苯尼考的药物动力学研究 16-20 1.3.1 氟苯尼考在畜禽体内的药物动力学研究 16-18 1.3.2 氟苯尼考在水产动物体内的药物动力学研究 18-20 1.4 氟苯尼考残留规律研究 20-22 1.5 本实验研究目的和意义 22-23 第二章 HPLC法同时测定黄颡鱼组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺 23-35 2.1 材料和方法 23-27 2.1.1 仪器和设备 23 2.1.2 药品和试剂 23-24 2.1.3 所需药液的配制 24 2.1.3.1 氟苯尼考和氟苯尼考胺标准储备液的配制 24 2.1.3.2 标准工作液的配制 24 2.1.3.3 其他实验试剂的配制 24 2.1.4 实验鱼 24-25 2.1.5 实验方法 25-27 2.1.5.1 血浆样品的处理 25 2.1.5.2 组织样品的处理 25-26 2.1.5.3 血浆标准工作曲线 26 2.1.5.4 组织标准工作曲线 26 2.1.5.5 色谱条件 26 2.1.5.6 回收率和精密度的测定 26-27 2.2 结果 27-34 2.2.1 标准曲线及线性范围 27-28 2.2.2 工作曲线方程及线性范围 28 2.2.3 方法学的验证 28-31 2.2.3.1 回收率 28-30 2.2.3.2 精密度 30-31 2.2.3.3 检测限 31 2.2.4 色谱图 31-34 2.3 讨论 34-35 2.3.1 萃取条件的优化 34 2.3.2 色谱条件 34-35 第三章 氟苯尼考在黄颡鱼体内的药物动力学 35-51 3.1 材料与方法 35-36 3.1.1 实验鱼 35 3.1.2 氟苯尼考口灌药液的配制 35 3.1.3 仪器与设备 35 3.1.4 所需试剂的配制 35-36 3.1.5 给药和采样 36 3.1.6 样品前处理和分析 36 3.2 数据处理 36 3.3 结果 36-48 3.3.1 不同组织中FF和FA浓度-时间关系及药物动力学参数 36-45 3.3.2 不同组织中FF和FA的药-时曲线方程 45-46 3.3.3 色谱图 46-48 3.4 讨论 48-51 3.4.1 单剂量口服氟苯尼考的血液药物动力学特征 48-49 3.4.2 单剂量口服氟苯尼考的组织药物动力学特征 49 3.4.3 给药方案 49-51 第四章 氟苯尼考在黄颡鱼体内的残留研究 51-56 4.1 材料与方法 51-52 4.1.1 实验鱼 51 4.1.2 氟苯尼考口灌药液的配制 51 4.1.3 仪器与设备 51-52 4.1.4 所需试剂的配制 52 4.1.5 给药和采样 52 4.1.6 样品前处理和分析 52 4.2 休药期的确定 52 4.3 结果 52-54 4.4 讨论 54-56 参考文献 56-63 硕士期间发表的论文 63-64 致谢 64
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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产保护学 > 水产药物学、药理学
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