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喹噁啉类对鲤应激反应的影响研究

作 者: 胡晓芬
导 师: 袁宗辉
学 校: 华中农业大学
专 业: 基础兽医学
关键词: 喹赛多 喹乙醇 喹烯酮 应激 生理生化指标 抗氧化酶系 组织病理学 
分类号: S963.73
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 185次
引 用: 2次
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内容摘要


喹噁啉类为人工合成的、具有喹噁啉-1,4-二氧基本结构的动物专用药,具有提高饲料利用率、促进动物生长和广谱抗菌作用,曾作为抗菌促生长剂在世界范围内广泛应用。本类早期品种喹乙醇和卡巴氧由于对人和动物有不同程度的毒副作用已被限制使用。中国农业科学院兰州研究所八十年代研制的乙酰甲喹由于毒性大,主要作为抗菌剂使用。喹烯酮喹赛多是新一代喹噁啉类抗菌促生长剂,毒性低,毒副作用小,对食品动物具有良好的促生长效果,在畜禽和水产养殖上具有广阔的应用前景。但目前的研究表明:超剂量使用喹乙醇导致鱼类出现中毒反应,引起鱼类抗应激力显著降低,受到应激因子刺激后,呈现“应激性出血症”。基于喹赛多、喹烯酮与喹乙醇的化学结构相似,抗菌促生长机制相同,且有研究表明喹噁啉类普遍具有肾上腺毒性,这两种添加剂会不会同样对鱼类的应激反应产生干扰作用,尚不清楚。同时,目前在喹乙醇对鱼类应激性毒性的研究基本停留在常规生理生化指标测定、器官病理切片观察上面,尚没有深入到下丘脑-脑垂体-肾间组织(HPI)轴的水平上,对应激激素皮质醇在血清中的含量变化及HPI轴组织结构的变化,尚未见报道。深入系统地了解喹乙醇、喹赛多和喹烯酮对鱼类的生理学、毒理学及其对鱼类应激轴的作用,对今后喹噁啉类在水产养殖中安全合理使用等方面提供了更可靠的科学依据。本试验以(Cyprinus carpio L.)为试验对象,投喂添加不同剂量的喹乙醇、喹赛多和喹烯酮(50、150和500mg/kg)的饲料,于试验的4、8和12wk末,每组随机捞取鲤30尾分别于应激前、追逐及24h限制应激后采样。应激前测定鲤的增重、血液生理生化指标以及肝脏抗氧化指标,取鲤的头肾、中肾、肝脏、肠道进行了组织病理学研究,探讨了三种药对鲤生理学和毒理学的影响;追逐和24h限制应激后测定血清生化指标,探讨了这三种药对鲤应激的影响,研究结果如下:1.试验期间,用药各组平均增重与对照组相比均有不同程度提高。4wk后,喹赛多50、150、500mg/kg组比对照组分别提高25.7%(P>0.05)、64.3%(P<0.05)、92.9%(P<0.05),喹乙醇50、150、500mg/kg组比对照组分别提高24.3%(P>0.05)、48.6%(P<0.05)、67.1%(P<0.05),喹烯酮50、150、500mg/kg组比对照组分别提高34.3%(P>0.05)、74.3%(P<0.05)、91.4%(P<0.05);8wk后,喹赛多50、150、500mg/kg组比对照组分别提高25.5%(P>0.05)、56.2%(P<0.05)、64.2%(P<0.05),喹乙醇50、150、500mg/kg组比对照组分别提高22.6%(P>0.05)、44.5%(P<0.05)、40.9%(P<0.05),喹烯酮50、150、500mg/kg组比对照组分别提高27.7%(P<0.05)、40.9%(P<0.05)、58.4%(P<0.05);12wk后,喹赛多50、150、500mg/kg组比对照组分别提高14.6%(P>0.05)、38.7%(P<0.05)、45.7%(P<0.05),喹乙醇50、150、500mg/kg组比对照组分别提高9.5%(P>0.05)、31.2%(P<0.05)、18.1%(P>0.05),喹烯酮50、150、500mg/kg组比对照组分别提高14.1%(P>0.05)、28.1%(P<0.05)、37.2%(P<0.05)。4和8wk各药物同剂量组相比均无显著差异(P>0.05),仅12wk时喹乙醇500mg/kg组增重显著低于同剂量下的喹赛多和喹烯酮组(P<0.05)。结果表明:添加剂量为50~500mg/kg的喹赛多和喹烯酮具有明显的促生长效果。50~500mg/kg喹乙醇也显著提高鲤的生产性能,但其500mg/kg剂量下,促生长效果下降。随着用药时间的延长,喹赛多、喹乙醇和喹烯酮的促生长效果均有所下降。2.随着剂量的增加,喹乙醇各组的红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HGB)和红细胞压积(HCT)均呈下降的趋势,其500mg/kg组的RBC和HGB在各个时期均显著低于对照组及其他各药物组(P<0.05)。喹赛多和喹烯酮50、150mg/kg组RBC、HGB和HCT呈上升的趋势,但500mg/kg组各指标都有下降,8和12wk时,喹赛多500mg/kg组RBC显著低于其50mg/kg组(P<0.05),喹烯酮500mg/kg组RBC在各个时期均低于其50mg/kg组(P<0.05)。结果表明:50~150mg/kg的喹赛多和喹烯酮对鲤的健康状态有促进作用,可促进红细胞生成从而增加氧的供应,而500mg/kg的长期作用会给鲤的血液生理带来负面作用。喹乙醇500mg/kg可能会干扰鱼体的造血机能导致贫血。3.4wk时,150和500mg/kg喹赛多和喹乙醇、500mg/kg喹烯酮能显著提高血清皮质醇含量(P<0.05)。8和12wk后,鲤对药物有良好的适应。血糖含量在喹赛多和喹烯酮各组均有上升的趋势,但500mg/kg喹乙醇使其含量降低。喹乙醇500m/kg组的血清天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性在各个时期均上升,喹赛多500mg/kg和喹烯酮组和喹乙醇150mg/kg组偶尔也有上升的情况。4wk时总胆红素(TB)和直接胆红素(DB)均无显著变化(P>0.05),至8和12wk时,其在喹乙醇500mg/kg组有显著增高(P<0.05)。8和12wk时,血清白蛋白(ALB)含量在喹赛多150和500mg/kg组和喹烯酮150mg/kg组显著升高(P<0.05),但在12wk喹乙醇500mg/kg组血清总蛋白(TP)和ALB含量显著降低(P<0.05)。血清肌酐(CRE)含量仅在12wk喹乙醇150和500mg/kg组显著增高(P<0.05),尿素氮(BUN)在8和12wk喹乙醇500mg/kg组显著增高(P<0.05)。血清离子在4和8wk时变化均不显著(P<0.05),12wk时变化范围较大,喹乙醇500mg/kg组Na~+显著低于其他各组(P<0.05),K~+在该组12wk时显著增高(P<0.05),P在12wk时喹赛多500mg/kg组、喹乙醇和喹烯酮150和500mg/kg组显著升高(P<0.05)。各个时期胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)和CL~-含量变化均不明显(P>0.05)。结果表明,喹赛多和喹烯酮对鲤有较好的安全性,剂量为50~150mg/kg时,对鲤生理生化指标基本无明显影响:长期使用剂量高于500mg/kg的喹赛多和喹烯酮对鲤生理机能产生轻微的不良影响;整个试验周期内,500mg/kg喹乙醇对鲤的能量和物质代谢都有一定的破坏作用。4.应激后,皮质醇、血糖、天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)有显著变化(P<0.05),可作为分析药物对应激影响的重点指标。4wk应激后,喹赛多、喹乙醇和喹烯酮500mg/kg组鲤血清皮质醇比对照组都有显著提高(P<0.05),和基础水平的变化一致,表明鱼体HPI轴尚能进行正常的内分泌调控;8和12wk皮质醇基础水平无明显变化,但追逐应激后,150mg/kg喹乙醇组皮质醇显著升高(P<0.05),500mg/kg组皮质醇显著降低(P<0.05),可能由于500mg/kg喹乙醇组鲤肾间组织受到损伤,应激后不能正常地分泌皮质醇造成的。12wk时这种破坏表现得更为明显,追逐应激后,500mg/kg喹乙醇组皮质醇水平同样显著低于对照组(P<0.05),但24h限制应激后其水平显著高于对照组(P<0.05),这可能是皮质醇分泌和消除的能力均受到破坏造成的。血糖在应激后各组差异不显著(P>0.05),但喹乙醇500mg/kg组有降低的趋势。各时期喹乙醇500mg/kg组应激后的血清AST、ALT和ALP活性与各对照组应激后相比普遍升高,表明应激会加强喹乙醇对肝细胞膜的通透性和细胞间的代谢作用的损伤。喹赛多500mg/kg组、喹烯酮500mg/kg组和喹乙醇150mg/kg组的血清AST、ALT和ALP活性在12wk应激后也有升高的情况。5.在本试验剂量范围内,这三种药都对超氧化物歧化酶(SOD)的活性表现为诱导作用,但随饲养时间延长,对SOD活性的诱导作用减弱;各药物150mg/kg能诱导谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性,而500mg/kg对其活性有所抑制,喹乙醇500mg/kg作用最为显著(P<0.05);而各组内二醛(MDA)含量无明显变化(P>0.05)。上述变化表明,剂量高于500mg/kg的喹乙醇对鲤肝脏抗氧化机能有一定的破坏,而木试验剂量范围内的喹赛多和喹烯酮均能改善鲤肝脏抗氧化机能。6.剂量低于500mg/kg的喹赛多和喹烯酮,150mg/kg以下剂量的喹乙醇基本不会引起明显的病变。500mg/kg喹乙醇对这些组织结构会产生不同程度的病理改变,且随着饲养时间的延长,组织病变程度加深。长期使用500mg/kg的喹赛多和喹烯酮也会引起轻微的组织病变。综上所述,本文全面系统地研究了喹赛多、喹乙醇和喹烯酮对鲤生长性能、血液生理生化指标和组织器官病理学的影响,重点分析了应激前后血清皮质醇和应激相关指标的变化,结合头肾组织的病理变化,全面诠释了长期使用高剂量喹乙醇导致“应激性出血症”的原因,同时首次证实喹赛多和喹烯酮在水产养殖中长期应用比较安全,能够有效避免实际中由于捕捞、运输等引起的“应激性出血症”。为喹噁啉类在水产养殖中安全合理使用提供了可靠的科学依据。

全文目录


摘要  7-11
ABSTRACT  11-15
缩略语表  15-16
1 前言  16-21
  1.1 研究背景  16-20
  1.2 研究内容和目的意义  20-21
2 材料和方法  21-30
  2.1 试验药物  21
  2.2 仪器与设备  21
  2.3 试剂与其他材料  21-22
  2.4 试验日粮  22-23
  2.5 试验动物及饲养管理  23
  2.6 试验设计  23-29
    2.6.1 采样时间确定  23
    2.6.2 分组及采样  23-24
    2.6.3 生理生化指标测定  24-25
    2.6.4 肝脏中抗氧化指标测定  25-29
    2.6.5 组织病理学检查  29
  2.7 数据处理  29-30
3 结果与分析  30-73
  3.1 应激前后相关指标的变化情况  30-31
  3.2 喹噁啉类对生长性能的影响  31-32
  3.3 喹噁啉类对鲤血液生理指标的影响  32-36
  3.4 喹噁啉类对应激前后鲤血清皮质醇和生化指标的影响  36-58
    3.4.1 血清皮质醇的变化  36-37
    3.4.2 血清生化指标的变化  37-58
  3.5 喹噁啉类对鲤肝脏抗氧化指标的影响  58-64
  3.6 喹噁啉类对鲤临床症状及组织病理学的影响  64-73
    3.6.1 临床症状  64-65
    3.6.2 头肾组织病理变化  65-67
    3.6.3 中肾组织病理变化  67-69
    3.6.4 肝脏组织病理变化  69-71
    3.6.5 肠组织病理变化  71-73
4 讨论  73-85
  4.1 应激前后相关指标的时间变化规律  73-74
  4.2 喹噁啉类对鲤的促生长作用  74
  4.3 喹噁啉类对鲤血液生理的影响  74-75
  4.4 喹噁啉类对鲤应激反应的影响  75-80
    4.4.1 对血清皮质醇的影响  75-76
    4.4.2 对血清生化指标的影响  76-80
  4.5 喹噁啉类对鲤肝脏抗氧化系统的影响  80-83
  4.6 喹噁啉类对鲤组织形态结构的影响  83-85
5 小结  85-86
6 文献综述  86-95
参考文献  95-112
致谢  112-113
附录  113-115
  附录Ⅰ——作者简介  113-114
  附录Ⅱ——相关数据  114-115
对答辩委员意见的答复  115-116

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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产养殖技术 > 水产动物饵料及其营养 > 配合饲料 > 饵料添加剂
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