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两歧双歧杆菌驯化及培养条件优化的研究
作 者: 熊三玉
导 师: 管斌
学 校: 中国海洋大学
专 业: 食品科学
关键词: 两歧双歧杆菌 驯化 增殖因子 优化 流加发酵 胞外多糖
分类号: TS201.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
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内容摘要
本文以两歧双歧杆菌为出发菌株,通过培养的方式将两歧双歧杆菌进行了耐氧、耐酸和耐胆盐驯化,经过驯化以后的两歧双歧杆菌,其耐氧、耐酸、耐胆盐性能均得到一定程度的改善。驯化后的两歧双歧杆菌能够在兼性厌氧的条件下稳定生长,其菌体生长和产酸情况均较未经驯化的原始菌优良。分别选取胡萝卜汁、马铃薯汁和西红柿汁类天然增殖因子,以及低聚木糖、低聚果糖、乳糖和半乳糖类作为增殖因子进行研究。分析讨论了各种增殖因子的最佳添加量以及在此添加量下的生长曲线比较。研究表明:前三种增殖因子的最佳添加量均为3%,且增殖影响的大小依次为:胡萝卜汁>马铃薯汁>西红柿汁;而在功能糖类增殖因子中,低聚果糖和半乳糖的增殖作用不明显,低聚木糖和乳糖的增殖作用相对较为明显,其中低聚木糖的最佳添加量为0.8%,乳糖的最佳添加量为1.0%,在此添加量下分别作了生长曲线的比较。采用正交实验法确定了两歧双歧杆菌的优化培养基组成以及优化培养条件。其中培养基优化的结果为:大豆蛋白胨1.5%、胰蛋白胨0.8%、酪蛋白胨0.8%、酵母膏0.5%、牛肉膏1%、葡萄糖1%、乳糖1%,无机盐溶液(CaCL2:0.2g,MgS04·7H2O:0.48g,KH2PO4:1.0g,NaHCO3:10.0g,K2HPO4:1.0g,NaCL:2.0g,水1L)仍然以原始比例添加。培养条件优化的结果为:初始pH值8.0,接种量5%,优化菌体生长种龄为24h,优化产酸种龄为36h,培养温度41℃。在兼性厌氧前提下,实现两歧双歧杆菌在发酵罐上的生长正常,其菌体量和产酸量均高于三角瓶培养,葡萄糖利用也较充分。在发酵罐上用最优培养基进行两歧双歧杆菌的流加发酵,其OD600值能达1.670以上,此时采用厌氧环境下平板活菌计数,总菌数为6.3×108(个/mL),产乳酸量也能高达620(mg/100mL)。采用苯酚-硫酸法测定了两歧双歧杆菌产胞外多糖的曲线:初步确定了双歧杆菌产胞外糖的最佳条件为:初始pH值8.0、接种量5%、温度37℃、种龄36h,这一条件下产糖量不低于270.0mg/L。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-10 0 立题依据及目的 10-11 1 文献综述 11-25 1.1 双歧杆菌的研究历史 11 1.2 双歧杆菌的分类 11-12 1.3 双歧杆菌的形态特征 12 1.4 双歧杆菌的生理生化及生态学特性 12-14 1.5 双歧杆菌的保健功能 14-17 1.6 影响双歧杆菌存活与生长的因素 17-20 1.7 双歧杆菌的国内外研究状况 20-25 2 两歧双歧杆菌的耐氧耐酸耐胆盐驯化 25-52 2.1 实验材料 25-27 2.2 实验方法 27-30 2.3 实验结果与分析 30-50 2.3.1 双歧杆菌的耐氧驯化 30-44 2.3.2 双歧杆菌的耐酸驯化 44-49 2.3.3 双歧杆菌的耐胆盐驯化 49-50 2.4 本章小结 50-52 3 两歧双歧杆菌生长促进因子的研究 52-66 3.1 实验材料 52-53 3.2 实验方法 53-54 3.3 实验结果与分析 54-64 3.3.1 天然增殖因子对双歧杆菌生长的促进作用研究 54-58 3.3.2 功能糖对双歧杆菌生长的促进作用研究 58-64 3.4 本章小结 64-66 4 两歧双歧杆菌培养条件的优化 66-85 4.1 实验材料 66 4.2 实验方法 66-69 4.3 实验结果与分析 69-83 4.3.1 单一氮源对双歧杆菌生长的影响 70-71 4.3.2 复合氮源对双歧杆菌生长的影响 71-72 4.3.3 无机盐对双歧杆菌生长的影响 72-73 4.3.4 正交实验优化培养基组分 73-75 4.3.5 正交实验优化培养基组分的效果 75 4.3.6 影响双歧杆菌生长的因素分析 75-81 4.3.7 正交实验优化培养条件 81-83 4.3.8 正交实验优化培养条件的效果 83 4.4 本章小结 83-85 5 小瓶流加实验与发酵罐实验 85-94 5.1 实验材料 85-86 5.2 实验方法 86-87 5.3 实验结果与分析 87-93 5.3.1 小瓶流加碱实验 87-90 5.3.2 原始培养基的发酵罐实验 90-92 5.3.3 优化培养基的发酵罐流加实验 92-93 5.4 本章小结 93-94 6 两歧双歧杆菌产胞外多糖(Exopolysaccharides EPS)的初步研究 94-103 6.1 实验材料 95 6.2 实验方法 95-96 6.3 实验结果与分析 96-101 6.3.1 葡萄糖标准曲线的制作 97 6.3.2 双歧杆菌生长曲线及EPS产生曲线的测定 97-98 6.3.3 影响双歧杆菌产EPS的因素分析 98-101 6.4 本章小结 101-103 7 结论 103-104 参考文献 104-111 致谢 111-112 硕士期间发表的文章 112
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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 一般性问题 > 基础科学 > 食品微生物学
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