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水体中溶藻细菌EG_（46）的分离及其溶藻特性研究

作　者: 李文波
导　师: 梁运祥
学　校: 华中农业大学
专　业: 发酵工程
关键词: 溶藻细菌 溶藻特性 蜡样芽孢杆菌 土生席藻 水华鱼腥藻 弱细颤藻 小环藻 水华
分类号: X52
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 114次
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内容摘要


本文是为获得水华的应急控制方法而开展的有关溶藻细菌的工作。主要结果如下:1.从发生水华的景观水体中分离到60株细菌,其中编号为EG46的菌株表现出较强的溶藻效果。经16S rDNA序列分析,EG46为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）。毒性检测试验表明EG46不产生毒素。2.试验发现,EG46对选用的土生席藻、水华鱼腥藻、弱细颤藻等蓝藻及小环藻均有很强的溶解作用。该菌通过分泌胞外物质溶藻,且从对数期开始分泌溶藻物质,到稳定期溶藻活性物质量达到最大;菌体浓度为5×107 cfu/mL时,7d后对土生席藻去除率达到87.5%。3.光照、pH、盐度及硝酸钠和氯化钙浓度对细菌EG46溶藻效力有较大影响。在光周期（L:D=16 h:8 h）、中性（pH 7）、盐度（4‰NaCl）以及培养基中硝酸钠和氯化钙浓度加倍的环境条件下,EG46具有更强的溶藻效力。4.试验表明EG46对野生藻种具有一定的溶解作用,说明其可能独立应用于小水体来控制藻类水华。

全文目录


摘要  7-8
Abstract  8-9
1 前言  9-24
  1.1 蓝藻水华的成因  9-12
  1.2 蓝藻水华的危害  12-13
  1.3 水华的主要防治措施  13-22
    1.3.1 物理方法  14-15
    1.3.2 化学方法  15-16
    1.3.3 生物方法  16-22
      1.3.3.1 蓝藻病毒防治水华  17-18
      1.3.3.2 真菌防治水华  18
      1.3.3.3 原生动物防治水华  18-19
      1.3.3.4 高等水生生物防治水华  19
      1.3.3.5 细菌防治水华  19-22
  1.4 溶藻细菌的研究趋势  22-23
    1.4.1 PCR技术和16Sr RNA序列分析相结合  22
    1.4.2 在分子水平上研究细菌的溶藻机制  22
    1.4.3 细菌溶藻能力与生态因素的关系  22-23
  1.5 本课题的目的和意义  23-24
2 材料与方法  24-34
  2.1 材料  24-28
    2.1.1 供试藻种  24
    2.1.2 培养基  24-26
      2.1.2.1 藻类培养基  24-26
      2.1.2.2 细菌培养基  26
    2.1.3 试剂  26-27
    2.1.4 主要仪器设备  27
    2.1.5 采样点  27-28
  2.2 方法  28-34
    2.2.1 藻的叶绿素a含量测定  28
    2.2.2 溶藻细菌的分离和纯化  28
    2.2.3 溶藻细菌的溶藻范围试验  28-29
    2.2.4 溶藻细菌EG_(46)对土生席藻的溶藻特性  29-30
      2.2.4.1 溶藻方式探讨  29
      2.2.4.2 不同接菌量下EG_(46)的溶藻效果  29
      2.2.4.3 EG_(46)不同生长期上清液溶藻效果比较  29
      2.2.4.4 光照条件对EG_(46)溶藻作用的影响  29-30
      2.2.4.5 不同pH值下EG_(46)的溶藻效应  30
      2.2.4.6 硝酸钠和氯化钙对EG_(46)溶藻作用的影响  30
      2.2.4.7 不同盐度下EG_(46)的溶藻效应  30
    2.2.5 EG_(46)的16S rDNA序列分析  30-32
      2.2.5.1 菌株总DNA的抽提  30-31
      2.2.5.2 PCR引物  31
      2.2.5.3 PCR扩增目的基因片段  31-32
    2.2.6 EG_(46)毒性检测试验  32
    2.2.7 EG_(46)对野生藻种的溶解试验  32-34
3 结果与分析  34-49
  3.1 溶藻细菌的分离  34
  3.2 溶藻细菌的溶藻范围  34
  3.3 溶藻细菌EG_(46)对土生席藻的溶藻特性  34-45
    3.3.1 溶藻方式探讨  34-35
    3.3.2 EG_(46)对土生席藻作用的显微镜观察  35-36
    3.3.3 不同接菌量下EG_(46)的溶藻效果  36-37
    3.3.4 EG_(46)不同生长期上清液溶藻效果比较  37-39
    3.3.5 光照条件对EG_(46)溶藻作用的影响  39-40
    3.3.6 不同pH值下EG_(46)的溶藻效应  40-42
    3.3.7 硝酸钠和氯化钙对EG_(46)溶藻作用的影响  42-43
    3.3.8 不同盐度下EG_(46)的溶藻效应  43-45
  3.4 EG_(46)的16S rDNA序列分析  45-46
  3.5 EG_(46)毒性检测结果  46-47
  3.6 EG_(46)对野生藻种的溶解效果  47-49
4 小结与讨论  49-53
  4.1 溶藻细菌的分离  49
  4.2 EG_(46)溶藻的作用过程  49-50
  4.3 不同菌浓度下EG_(46)的溶藻效力  50
  4.4 环境因子对EG_(46)溶藻效力的影响  50-52
  4.5 EG_(46)应用前景  52-53
参考文献  53-59
致谢  59

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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境污染及其防治 > 水体污染及其防治
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