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痛风饮对实验性急性痛风性关节炎大鼠治疗作用机制的研究

作　者: 杨洪霞
导　师: 靳红微
学　校: 河北医科大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 痛风饮急性痛风性关节炎 MSU 白细胞中性粒细胞 IL-1β IL-6 UA
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:痛风性关节炎(gouty arthritis)是由于尿酸钠微结晶沉积在关节周围组织引发的急性炎症反应,以关节红、肿、热、痛和功能障碍为主要表现,临床常反复发作,日久可导致关节畸形。目前国内诸多学者在中医方药治疗痛风方面取得了一定的成果,但是纵观国内外文献资料,并未见1剂中药即取得显著治疗效果的报道。本实验根据Coderre介绍的尿酸钠诱导的大鼠足肿胀模型略作改进,通过观察西药秋水仙碱与中药痛风饮1剂对痛风性关节炎大鼠的患肢压力积分、步态、足肿胀度,白细胞、中性粒细胞、尿酸、白细胞介素-1β、白细胞介素-6在痛风性关节炎大鼠血清中的表达,以及对病理结构的影响,探讨中药痛风饮1剂在治疗急性痛风性关节炎中的药理作用,为中药治疗急性痛风性关节炎提供实验依据。方法:(1)选用48只Wistar大鼠,随机分成4组,每组12只,分别为空白对照组(Normal control group,N),秋水仙碱阳性对照组(Colchicine group,C),中药痛风饮治疗组(Tongfengyin group,T),模型组(Model group,M)。其中C、T、M组均于右踝关节腔内注入尿酸钠混悬液(MSU)0.2ml制作模型,N组于右踝关节腔注入等量生理盐水作为对照。于造模后24h大鼠灌服给药,根据人用药量与实验动物用药的换算公式,计算出大鼠的用药量,C组按0.135mg/kg·d,T组按13.5g/kg·d剂量灌胃,所有药物分两次灌胃,共灌胃治疗1天。N组、M组均与C组、T组同一时间灌服等量生理盐水作为对照。(2)于造模后24h、治疗后24h观察大鼠的一般表现及关节炎症表现,并做患肢压力及步态积分;分别于造模前、造模后24h、治疗后24h测量右踝周径,计算踝周径变化值;治疗后24h断头取血,用计数盘法进行白细胞计数,涂血片,染色,做白细胞人工分类,离心分离血清,备用,采用酶比色法测血清尿酸(UA)水平,采用放免法测血清IL-1β、IL-6水平。(3)处死大鼠后,取右踝关节组织,用10%甲醛固定,石蜡包埋,行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察滑膜、炎性白细胞浸润、毛细血管腔大小等病理变化,并采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统,进行照相。(4)计量资料应用SPSS11.5 for Windows统计软件进行统计分析,方差不齐的计量资料和等级资料采用秩和检验。结果:1一般行为观察实验造模期间,N组大鼠双眼灵活有神,行动敏捷,对周围变化反应灵敏;C、T、M组大鼠在给予致炎后出现致炎足踝肿胀,走路不稳,患足不能着地,蜷卧患足朝上;C组和T组经治疗后,精神状态好转,足肿胀减轻,跛行好转。2痛风饮对痛风性关节炎大鼠站立及行走时患肢压力积分值、右踝周径的影响2.1造模后大鼠站立及行走时患肢压力积分值C组、T组、M组的大鼠站立及行走时患肢压力积分值均较N组明显升高(P﹤0.01)。2.2造模后大鼠右踝周径的变化C组、T组、M组大鼠的右踝周径变化值较N组右踝周径变化值明显升高(P﹤0.01)。2.3治疗后对大鼠站立及行走时患肢压力积分值的影响C组、M组与N组相比大鼠的患足积分值仍明显升高(P﹤0.01);T组与M组相比,患足积分值降低,具有统计学意义(P﹤0.05)。2.4治疗后大鼠右踝周径的变化T组较M、N组踝周径变化具有统计学意义(P﹤0.05);C组与T组之间踝周径变化不具有统计学意义(P﹥0.05);C组与M组相比不具有统计学意义(P﹥0.05),但其踝周径变化有较好的趋势。3痛风饮对白细胞及中性粒细胞百分比的影响M组大鼠白细胞明显高于C组、T组、N组(P﹤0.01),三组之间无明显差异(P﹥0.05)。C组、T组与M组相比中性粒细胞比例下降(P﹤0.01);T组与N组相比中性粒细胞比例无显著性差异(P﹥0.05)。4痛风饮对大鼠血浆IL-1β、IL-6的影响C组、T组血浆中IL-1β水平与N组相比无显著性差异(P﹥0.05);M组与N组、T组相比IL-1β水平明显升高(P﹤0.01);C组与T组相比无显著性差异(P﹥0.05)。C组、T组、M组血浆中IL-6水平与N组相比明显升高,具有统计学意义(P﹤0.01);M组与C、T组相比明显升高,具有统计学意义(P﹤0.05);C组与T组之间无统计学意义(P﹥0.05)。5痛风饮对大鼠血浆尿酸的影响T组与N组相比血尿酸水平升高(P﹤0.05);N组、C组、M组三组间无明显差异(P﹥0.05)。6痛风饮对大鼠病理形态的影响正常组大鼠关节滑膜衬里层由1～2层滑膜细胞组成,且部分不连续,滑膜下层则为脂肪细胞、少量成纤维细胞与血管。模型组大鼠关节滑膜衬里层细胞明显增厚,呈“栅栏”状排列,或不规则排列,滑膜组织呈绒毛状或指状肥大,衬里层细胞下的脂肪细胞减少甚至消失,并有大量成纤维细胞及胶原纤维;损伤部位及周围可见炎细胞成堆,多形核白细胞、单核细胞、异物巨细胞等炎性细胞浸润;新生血管多处可见,血管腔明显扩张充血,痛风饮组及秋水仙碱组与模型组相比,其炎性白细胞浸润、血管扩张情况均不同程度低于模型组。结论:痛风饮具有良好的抑制急性痛风性关节炎的作用。其作用机理是通过抑制中性粒细胞介导的炎症,主要抑制前炎症因子IL-1β,其次抑制二级炎症细胞因子IL-6等途径从而达到抗炎的效果。痛风饮是否能够降低血尿酸水平还待进一步研究。

全文目录

中文摘要  4-8
英文摘要  8-14
英文缩写  14-15
研究论文痛风饮对实验性急性痛风性关节炎大鼠治疗作用机制的研究  15-70
  前言  15
  材料与方法  15-21
  结果  21-25
  附图  25-37
  附表  37-43
  讨论  43-65
  结论  65-66
  参考文献  66-70
综述中医方药治疗痛风的实验研究进展  70-78
致谢  78-79
个人简历  79

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