学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

不同辅料对淡豆豉炮制过程及质量影响的研究

作 者: 杜红娜
导 师: 王鑫国;牛丽颖
学 校: 河北医科大学
专 业: 中药学
关键词: 淡豆豉 黑豆 大豆异黄酮 高效液相色谱法 指纹图谱 紫外分光光度法 含量测定
分类号: R283
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 161次
引 用: 3次
阅 读: 论文下载
 

内容摘要


目的:通过不同辅料炮制的淡豆豉大豆异黄酮HPLC指纹图谱及含量变化,比较不同辅料对淡豆豉炮制过程的影响,揭示淡豆豉的炮制机理。在此基础上,建立淡豆豉样品中大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素多指标成分含量测定的方法,为科学评价与有效控制河北产淡豆豉药材的质量提供科学依据。方法:1指纹图谱的建立:(1)提取:比较了不同提取溶剂、不同提取方法及不同提取时间的提取效果,选择提取成分较多,提取率较高的提取条件,并对提取物进行纯化。(2)色谱条件:选用合适的色谱柱及检测波长,调整流动相的组成、配比,调节柱温,使色谱图符合指纹图谱研究的要求。(3)系统适用性试验:在已确定的色谱条件下,考察指纹图谱中染料木苷峰的分离度和理论板数。(4)稳定性试验:取样品溶液分别于0,4,8,12,24,48h进样,记录保留时间和峰面积。(5)精密度试验:取同一份样品溶液,重复进样6次,记录保留时间和峰面积。(6)重复性试验:取同一批淫羊藿炮制淡豆豉药材6份,平行制备样品溶液,进样,记录保留时间和峰面积。(7)指纹图谱的建立:分别取不同批次的不同辅料炮制的淡豆豉和黑豆样品,制备供试品溶液,进行指纹图谱分析。(8)炮制辅料图谱的建立:分别取淫羊藿、青蒿、桑叶药材,制备供试品溶液,进样,得到各药材图谱。2总异黄酮成分的含量测定:(1)测定波长的确定:取对照品溶液及供试品溶液适量,以相应试剂作空白,照紫外-可见分光光度法,在200~800nm波长范围内进行光谱扫描,考察最大吸收波长。(2)标准曲线的绘制:配制系列浓度的染料木素对照品溶液,分别测定吸收度,以吸收度为纵坐标、质量浓度为横坐标绘制标准曲线。(3)稳定性试验:取样品溶液放置0,4,8,12,24,48h后测定吸收度。(4)精密度试验:取同一份样品溶液,重复6次,测定吸收度。(5)重复性试验:取同一批次淫羊藿炮制淡豆豉药材,平行制备样品溶液6份,分别测定吸收度。(6)回收率试验:取已知总异黄酮含量的药材适量,分别加入适量的染料木素对照品溶液,各平行制备三个不同浓度,每个浓度的样品分别平行3份,测定总异黄酮的含量。(7)样品测定:在上述条件下,测定10批河北产不同辅料炮制淡豆豉及黑豆原料中大豆异黄酮的含量。3四种大豆异黄酮成分的含量测定:(1)标准曲线的绘制:配制系列浓度的染料木苷、大豆苷、染料木素和大豆苷元对照品溶液,分别进样,测定峰面积;以染料木苷、大豆苷、染料木素和大豆苷元的含量为横坐标,相应的峰面积为纵坐标,分别绘制标准曲线。(2)稳定性试验:取样品溶液分别放置0,4,8,12,24,48h后进样,测定峰面积。(3)精密度试验:取同一份样品溶液,重复进样6次,测定峰面积。(4)重复性试验:取同一批次淡豆豉药材平行制备样品溶液6份,分别进样,测定峰面积。(5)回收率试验:取已知大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素含量的淡豆豉药材适量,分别加入适量的大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素对照品溶液,各平行制备三个不同浓度,每个浓度的样品分别平行3份,测定大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素的含量。(6)最低检测限的确定:将大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素对照品溶液逐步稀释,当信噪比S/N≥3时确定为最低检测限。(7)样品测定:在上述色谱条件下,测定10批河北产淡豆豉药材中大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素的含量。结果:1指纹图谱的建立:(1)提取:以70%乙醇超声提取2h,然后以AB-8大孔吸附树脂进行吸附,70%乙醇进行洗脱为佳,具有稳定和效率高等优点。(2)色谱条件:色谱柱为Agilent HC-C18柱(250×4.6mm,5μm);乙腈-3%冰乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0ml/min,柱温为25℃,检测波长为261nm,进样量10μl。(3)系统适用性试验:在此色谱条件下,染料木苷的保留时间约为21min,按染料木苷峰计算理论板数约为10万,与其它色谱峰的分离度大于1.0。(4)稳定性试验:以染料木苷峰为内参比峰,计算各主要色谱峰相对保留时间及峰面积占总峰面积5%以上峰的相对峰面积值,其RSD分别为0.02%~1.06%和0.07%~1.30%,稳定性良好。(5)精密度试验:各主要色谱峰相对保留时间和峰面积占总峰面积5%以上峰的峰面积比值均无明显变化,其RSD分别为0.01%~0.58%和0.1%~2.21%,精密度良好。(6)重复性试验:各主要色谱峰相对保留时间和峰面积占总峰面积5%以上峰的峰面积比值均无明显变化,其RSD分别为0.02%~0.53%和0.10%~2.02%,重复性良好。(7)指纹图谱的建立:分别得到10批淫羊藿炮制淡豆豉、淡豆豉、黑豆原料的指纹图谱,并生成各药材对照指纹图谱。(8)数据分析:运用相似度对所得数据进行分析,结果相似度均在0.99~1.00之间。(9)炮制辅料图谱的建立:分别得到淫羊藿、青蒿、桑叶药材在已选定色谱条件下的图谱。2总异黄酮成分的含量测定:(1)测定波长的确定:对照品溶液和供试品溶液均在263nm处有最大吸收,故确定263nm为测定波长。(2)标准曲线的制备:以染料木素吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制吸收曲线,经回归处理得染料木素的标准曲线方程:Y=0.1393X+0.0466,相关系数为r=0.999(n=5),通过回归方程可以看出,染料木素对照品浓度在1.590~5.566μg.ml-1范围内,与吸收度呈良好的线性关系。(3)稳定性试验:样品在48h内稳定,总异黄酮含量的RSD为1.00%。(4)精密度试验:样品精密度良好,总异黄酮含量的RSD为0.10%。(5)重复性试验:样品重复性良好,总异黄酮含量的RSD为0.73%。(6)回收率试验:染料木素的平均回收率为100.70%,RSD为1.36%(n=9)。(7)含量测定结果:淫羊藿炮制淡豆豉药材中总异黄酮的含量从2.6241~2.9907mg/g,平均含量为2.8187mg/g;淡豆豉药材中总异黄酮的含量从2.1323~2.7705mg/g,平均含量为2.4405 mg/g;黑豆原料中总异黄酮的含量从2.1119~2.8398mg/g;平均含量为2.2357mg/g。3四种大豆异黄酮成分的含量测定:(1)标准曲线的绘制:大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素分别在10.38~103.80μg、2.32~23.20μg、6.40~64.00μg、2.98~29.82μg范围内,呈良好的线性关系,回归方程分别为Y=26.059X+10.46,Y=35.181X-10.905,Y=89.756X-7.2494,Y=90.618X+57.825,相关系数均为r=0.9999(n=6)。(2)稳定性试验:样品在48h内稳定,大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素含量的RSD分别为1.00%、0.43%、0.46%和0.42%。(3)精密度试验:样品的精密度良好,大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素含量的RSD分别为1.59%、0.54%、1.24%和0.28%。(4)重复性试验:样品的重复性好,大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素含量的RSD分别为2.36%、0.69%、1.51%和0.45%。(5)回收率试验:大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素的回收率分别为99.27%、98.32%、98.76%和99.03%,RSD分别为0.72%、1.32%、1.11%和0.80%。(6)大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素的最低检测限分别为0.522ng、0.122ng、0.318ng和0.152ng。(7)含量测定结果:河北产淡豆豉药材中大豆苷的含量从426.2~453.2μg/g,染料木苷的含量从376.1~401.3μg/g,大豆苷元的含量从247.6~263.8μg/g ,染料木素的含量从135.4~149.6μg/g不等。结论:1建立了不同辅料炮制的淡豆豉中大豆异黄酮HPLC指纹图谱及UV含量测定方法,比较了不同辅料对淡豆豉炮制过程的影响,揭示了淡豆豉的炮制机理:炮制过程是多种成分综合作用的过程,总体上来讲是苷向苷元转化的过程。2首次建立了淡豆豉样品中大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素多指标成分含量测定的HPLC法,方法稳定,重复性和精密度良好,为科学评价与有效控制河北产淡豆豉药材的质量提供了科学依据。

全文目录


中文摘要  5-11
英文摘要  11-18
研究论文 不同辅料对淡豆豉炮制过程及质量影响的研究  18-96
  第一部分 不同辅料对淡豆豉炮制过程的影响  18-66
    前言  18
    材料与方法  18-23
    结果  23-31
    附图  31-39
    附表  39-58
    讨论  58-62
    小结  62-63
    参考文献  63-66
  第二部分 不同辅料对淡豆豉总异黄酮含量的影响  66-77
    前言  66
    材料与方法  66-69
    结果  69-71
    附图  71-73
    附表  73-75
    讨论  75-76
    小结  76
    参考文献  76-77
  第三部分 河北产淡豆豉药材中四种大豆异黄酮含量测定  77-96
    前言  77
    材料与方法  77-81
    结果  81-83
    附图  83-85
    附表  85-93
    讨论  93-94
    小结  94
    参考文献  94-96
结论  96-97
综述  97-105
致谢  105-106
个人简历  106

相似论文

  1. 铝胁迫下小黑豆的红外光谱特征分析及其铝胁迫响应基因的鉴定,S529
  2. 消癌平制剂及其绿原酸单体的药动学研究与质量控制,R285
  3. 赤芍商品药材调查及品质评价研究,R282.71
  4. 奶粉中三聚氰胺分析方法研究及快速测定体系的建立,O657.3
  5. 鸭ADSL与PurH基因序列特征及表达与肌肉肌苷酸(IMP)含量的相关性分析,S834
  6. 生长素对harpin蛋白激发HR的调控机制初步研究,S432.1
  7. 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯的制备和质量控制的初步研究,TQ463
  8. 江苏省稻瘟病菌遗传多样性及水稻抗瘟基因鉴定,S435.111.41
  9. 拮抗芽孢杆菌的分离鉴定及其多样性和系统发育分析,S476.1
  10. 大豆异黄酮浸种对栽培大豆和滩涂野大豆亲本及其杂交后代幼苗盐害的缓解效应及其机理,S565.1
  11. 大豆胚芽异黄酮的乳酸菌转化及其咀嚼片的研制,TS214.2
  12. 光环境调控对水稻幼苗和黑豆芽苗菜生长发育的影响,S511
  13. 饲料中维吉尼亚霉素含量测定方法的研究,S816.17
  14. 响应面法优化天麻中天麻素提取工艺研究,R284.1
  15. 枇杷止咳颗粒质量标准的修订及指纹图谱研究,R286.0
  16. 芜菁药材质量标准的初步研究,R284.1
  17. 大豆异黄酮对去势大鼠骨质疏松症预防效果的实验研究,R580
  18. MTX保守治疗胎盘植入乳汁及血清浓度监测,R714.22
  19. 柱前衍生化HPLC法在远志质量控制中的应用初探,R284
  20. 大豆异黄酮摄入与乳腺癌及前列腺癌发生风险的Meta分析,R737.25
  21. 淮南市平山头水厂中分泌干扰物的去除特征研究,TU991.2

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药炮制、制剂
© 2012 www.xueweilunwen.com