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氯胺酮对大鼠肺泡巨噬细胞胞内钙离子及活性氧的影响

作　者: 张小宝
导　师: 傅诚章
学　校: 南京医科大学
专　业: 麻醉学
关键词: 氯胺酮 LPS 大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383 一氧化氮 羟自由基 超氧阴离子 胞内游离钙离子 卵蛋白 肺泡巨噬细胞 胞内游离钙
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


第一部分:氯胺酮对LPS刺激的大鼠肺泡巨噬细胞胞内钙离子及活性氧的影响目的:研究氯胺酮对脂多糖（LPS）刺激的大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮（NO）、羟自由基（·OH）、超氧阴离子（O2·-）生成及胞内游离钙离子 的学位论文">胞内游离钙离子([Ca2+]i)的影响。方法:体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383分为对照组（C组）,LPS组（L组）及不同浓度氯胺酮预处理组（K1、K2和K3组）。L组、K1、K2和K3组均采用1 mg/L的LPS刺激,在刺激前分别给以磷酸盐缓冲溶液（PBS）、10、100和1000 gmol/L浓度氯胺酮预处理。C组用相同剂量的PBS处理。继续培养24小时后用试剂盒检测细胞培养上清液中NO、·OH及（超氧阴离子）O2·-水平,应用激光共聚焦法测定胞内游离钙离子的水平。结果:L组NO、·OH、O2·-及胞内游离钙离子的水平显著高于C组;与L组相比,K2和K3组的NO、·OH、O2·-及胞内游离钙离子的水平显著降低;K2和K3组间无统计学差异。结论:氯胺酮（100和1000μmol/L）对LPS所致的NR8383的NO、·OH、O2·-及胞内游离钙离子的的升高有抑制作用。第二部分氯胺酮对卵蛋白激发的致敏大鼠离体肺泡巨噬细胞胞内钙和自由基的影响目的:研究氯胺酮对OVA刺激的致敏大鼠肺泡巨噬细胞（AM）一氧化氮（NO）、羟自由基（·OH）、超氧阴离子（O2·-）生成及胞内游离钙离子([Ca2+]i)的影响。方法:SD大鼠经皮下注射OVA致敏后行肺泡灌洗,分离纯化后得到体外培养的AM,经氯胺酮（10μM,100μm和1000μM）处理、OVA刺激后,测定细胞[ca2+]i并检测细胞培养上清液中一氧化氮（NO）、羟自由基（·OH）及O2·-水平。结果:OVA刺激可引起致敏肺泡巨噬细胞[Ca2+]i增高及NO、·OH和O2·-的生成增多,氯胺酮对此具有抑制作用。结论:氯胺酮可抑制OVA所致的氧化应激,其分子机制可能与[Ca2+]i相关。

全文目录


中文摘要  3-5
英文摘要  5-7
前言  7-10
研究内容  10-37
  第一部分:氯胺酮对LPS刺激的大鼠肺泡巨噬细胞胞内钙离子及活性氧的影响  10-30
    材料和方法  11-18
    结果  18-24
    讨论  24-30
  第二部分:氯胺酮对卵蛋白激发的致敏大鼠离体肺泡巨噬细胞胞内钙和自由基的影响  30-37
    材料和方法  31-33
    结果  33-35
    讨论  35-37
小结  37-38
参考文献  38-45
附录  45-46
致谢  46-47
综述  47-67

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