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卵巢组织冷冻方法优化及抗损伤处理对移植结局影响的研究

作　者: 张爽
导　师: 王冬
学　校: 延边大学
专　业: 妇产科学
关键词: 程序冷冻 冷冻保护剂 卵巢组织 自体移植 血管内皮生长因子
分类号: R713
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：比较丙二醇(PROH)联合二甲基亚砜(DMSO)与乙二醇(EG)联合二甲基亚砜,(DMSO)作为冷冻保护剂(Cryoprotective agent, CPA)冷冻卵巢组织对卵泡的形态及移植后卵巢功能恢复的影响。并比较冻存后的卵巢组织自体异位移植后经血管内皮生长因子(VEGF)、维生素E (Vitamin E, VE)、中药黄芪(Astragalus, As)抗损伤处理,VEGF、VE抗损伤处理及不用任何药物抗损伤处理对移植卵巢组织形态和功能的影响。方法：将54只成年Wistar大鼠用随机数字表法分为9组,每组6只大鼠。1-8组行去势手术。1、3、5组大鼠取出的卵巢组织应用PROH联合DMSO作为CPA冻存；2、4、6组大鼠取出的的卵巢组织应用EG联合DMSO作为CPA冻存；7组大鼠去势后自体移位移植新鲜卵巢组织；8组大鼠行去势手术后不加任何处理；9组大鼠为正常对照组。1-6组大鼠卵巢组织置于注入相应CPA的麦管中进行程序化冷冻,放入液氮中保存两周,复温后行自体异位移植术。1、2组大鼠经VEGF、VE、As抗损伤处理；3、4组大鼠经VEGF、VE抗损伤处理；5、6组大鼠不用抗损伤药物处理。饲养两月,将各组大鼠麻醉后行腹主动脉取血检测血清雌二醇水平；并取出移植的卵巢组织置于10%中性福尔马林液固定,行HE染色后观察卵泡的形态及正常卵泡的数量。结果：大鼠卵巢组织经CPA A*液及CPA B▲液冻存,移植后经VEGF、VE、As#; VEGF、VE$抗损伤处理及不用药物抗损伤处理,比较血清雌二醇水平,分别进行t检验(P#*▲<0.05；pS*▲<0.05；P*▲<0.05.)。即无论是否应用药物抗损伤处理,PROH联合DMSO作为CPA冻存的卵巢组织移植后,大鼠血清雌二醇水平均高于EG联合DMSO作为CPA冻存组；大鼠卵巢组织经CPA A*液及CPAB▲液冻存,移植后经VEGF、VE、As#; VEGF、VE$抗损伤处理及不用药物抗损伤处理,分别比较血清雌二醇水平,并进行t检验。(p*#$>0.05；p▲#$>0.05；p*#<0.05；p<▲#0.05;p*S<0.05；p<▲s0.05.)。即无论应用那种CPA冻存,VEGF、VE、As抗损伤处理组与VEGF、VE抗损伤处理组比较血清雌二醇水平虽略有升高,但差异无统计学意义。但经VEGF、VE、As抗损伤处理组及VEGF、VE抗损伤处理组与未用药物抗损伤处理组比较血清中雌二醇水平均有显著性差异；大鼠卵巢组织经CPA A*液及CPA B▲液冻存,移植后经VEGF.VE.As#;VEGF.VE$抗损伤处理及不用药物抗损伤处理,分别比较次级卵泡百分率,并进行t检验(p*#$>0.05;p*#<0.05;p*$<0.05;p▲#$>0.05;p▲#<0.05;p▲$<0.05.)。即无论应用那种CPA冻存,VEGF.VE.As抗损伤处理组与VEGF.VE抗损伤处理组比较初级卵泡数略有增加,但差异无统计学意义。但经VEGF.VE.As抗损伤处理组及VEGF.VE抗损伤处理组与未用药物抗损伤处理组比较初级卵泡数量均有显著性差异。结论：应用程序化冷冻的方法,PROH联合DMSO作为CPA较EG联合DMSO作为CPA对冻存卵巢组织的损伤小,且对移植后卵巢组织形态和功能的恢复效果好,是更为合理的冷冻保护剂；移植后的卵巢组织应用VEGF.VE.As;VEGF.VE抗损伤处理组与未用药物处理组比较,卵巢组织的形态及功能恢复均差异显著,即抗损伤处理对卵巢组织形态及功能的恢复有效。应用VEGF.VE.As抗损伤处理组与VEGF.VE抗损伤处理组比较雌二醇水平略增高,初级卵泡数量略增加,但无统计学差异。尚不能认为VEGF.VE.As抗损伤处理较VEGF.VE抗损伤处理效果好。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-11
前言  11-13
第一章 材料和方法  13-17
  1.1 材料  13
  1.2 方法  13-16
  1.3 统计学方法  16-17
第二章 结果  17-22
  2.1 化学发光法测定血清雌二醇水平及不同组别间比较  17-18
  2.2 卵巢组织HE染色后,比较各组卵泡分布;计算形态正常卵泡的百分率;并观察各组卵巢组织的形态结构  18-22
第三章 讨论  22-26
第四章 结论  26-27
附图  27-30
参考文献  30-33
致谢  33-34
综述  34-43

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 妇科手术
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