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紫茎泽兰提取物对细菌的抑制作用及抑菌机理的研究

作 者: 李丽萍
导 师: 谢响明
学 校: 北京林业大学
专 业: 微生物
关键词: 紫茎泽兰 氯仿萃取物 番茄青枯菌 抑菌机理
分类号: S482.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 323次
引 用: 1次
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内容摘要


本研究用70%的乙醇提取紫茎泽兰,将所得到的提取液旋转蒸发成浸膏,再依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇、丙酮按照极性由小到大萃取,得到不同极性段的活性物质。然后用这些有机溶剂萃取液对5种供试菌进行抑菌试验,筛选出抑菌效果最好的萃取液,以及对这种萃取液最敏感的菌株。经试验得出紫茎泽兰氯仿萃取液对番茄青枯菌有较好的抑制作用,并从抑制剂在生理、生化、细胞形态等方面对番茄青枯菌的抑菌机理进行了深入研究,结果如下:1.紫茎泽兰70%乙醇提取液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、大肠杆菌(Escherichia coli)的最低抑菌浓度均为0.25g/ml,对番茄抑制作用最为显著,其抑菌浓度低达0.0625g/ml,以青枯菌为指示菌。研究了紫茎泽兰提取物的稳定性。结果表明,提取物的抑菌活性具有较好的热稳定性,在pH为9时抑菌效果较佳;2.石油醚和丙酮萃取液对所有供试菌均没有抑制作用,氯仿萃取液对番茄青枯菌(Rastonia solanacearum)的抑制作用较明显;3.氯仿萃取液中添加Zn2+和Mn2+,乙醚萃取液中添加Zn2+抑菌作用有所增加,其他处理抑菌效果没有明显改变;随着随着乙醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇四种有抑菌活性的萃取液中加入的蔗糖和NaCl溶液浓度的增大。抑菌效果也逐渐增强;4.抑菌机理研究:通过SDS-PAGE电泳的方法检测发现,氯仿萃取液完全抑制或破坏了菌体小分子蛋白质的合成,对大分子蛋白质也有一定的抑制作用;透射电镜观察可知氯仿萃取液破坏了菌体形态;通过酶活测定可知氯仿萃取液抑制了番茄青枯菌的POD、CAT、SDH酶活,且随着加入萃取液浓度的增大,抑制作用也逐渐增强。总之,紫茎泽兰氯仿萃取液扰乱了菌体细胞内正常的代谢活动,导致细胞不再生长、繁殖,达到抑菌的目的。以上研究成果对于番茄青枯病防治的应用有一定的指导意义。

全文目录


中文摘要  3-4
ABSTRACT  4-8
引言  8-9
1 文献综述  9-16
  1.1 紫茎泽兰的危害及生物学特性  9
  1.2 紫茎泽兰的利用  9-10
    1.2.1 工业用途  9
    1.2.2 作为染料  9-10
    1.2.3 生产生物农药  10
    1.2.4 药用价值  10
  1.3 紫茎泽兰的化学成分的研究进展  10-13
  1.4 紫茎泽兰化学成分的生物学活性研究进展  13-14
    1.4.1 杀虫活性  13
    1.4.2 紫茎泽兰的化学成分对昆虫的拒食作用  13
    1.4.3 紫茎泽兰的抑菌成分  13-14
    1.4.4 紫茎泽兰的毒性  14
  1.5 植物农药的开发利用现状  14-16
    1.5.1 植物农药的意义  14
    1.5.2 植物农药的研究现状  14-15
    1.5.3 植物农药研究中的问题  15-16
2 紫茎泽兰脂溶性成分的提取和分离  16-18
  2.1 材料与方法  16-17
    2.1.1 供试植物样品  16
    2.1.2 供试试剂  16
    2.1.3 试验仪器与设备  16
    2.1.4 试验内容和设计  16-17
  2.2 试验结果  17-18
3 紫茎泽兰乙醇提取物抑制细菌试验  18-22
  3.1 材料与方法  18-19
    3.1.1 试验材料和仪器  18
    3.1.2 试验方法  18-19
  3.2 试验结果与分析  19-21
    3.2.1 敏感菌株的筛选  19
    3.2.2 MIC试验  19-20
    3.2.3 不同提取设备的抑菌效果比较  20-21
  3.3 小结  21-22
4 乙醇提取物浸膏的不同有机溶剂萃取液抑菌试验  22-30
  4.1 材料和方法  22-23
    4.1.1 试验材料和仪器  22
    4.1.2 试验方法  22-23
  4.2 试验结果与分析  23-29
    4.2.1 不同有机溶剂萃取物抑菌试验  23-24
    4.2.2 pH对抑菌效果的影响  24-25
    4.2.3 耐热性试验  25-26
    4.2.4 金属离子对有机溶剂萃取液抑菌效果的影响  26-28
    4.2.5 蔗糖和NaCl对氯仿萃取液抑菌效果的影响  28-29
  4.3 小结  29-30
5 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌抑菌机理研究  30-47
  5.1 材料和方法  30-31
    5.1.1 试验材料和仪器  30-31
    5.1.2 试验仪器  31
  5.2 试验方法  31-37
    5.2.1 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌生长曲线的影响  31-32
    5.2.2 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌利用糖的影响  32-33
    5.2.3 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌蛋白含量的影响  33-34
    5.2.4 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌细胞形态的影响  34
    5.2.5 SDS.PAGE  34-35
    5.2.6 对呼吸代谢的影响  35-36
    5.2.7 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌过氧化物酶的影响  36
    5.2.8 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌过氧化氢酶的影响  36-37
    5.2.9 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌琥珀酸脱氢酶的影响  37
  5.3 试验结果与分析  37-45
    5.3.1 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌生长曲线的影响  37-38
    5.3.2 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌利用糖的影响  38-39
    5.3.3 紫茎泽兰氯仿萃取物对番茄青枯菌蛋白含量的影响  39
    5.3.4 透射电镜观察结果  39-41
    5.3.5 SDS.PAGE  41-42
    5.3.6 对呼吸代谢的影响  42-43
    5.3.7 紫茎泽兰氯仿提取物对番茄青枯菌POD、CAT的影响  43-44
    5.3.8 紫茎泽兰氯仿提取物对番茄青枯菌琥珀酸脱氢酶的影响  44-45
  5.4 小结  45-47
6 结论  47-48
7 展望与建议  48-50
附录  50-56
参考文献  56-60
个人简介  60-61
导师简介  61-62
致谢  62

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 农药防治(化学防治) > 各种农药 > 杀菌剂
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