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HSP70在百草枯诱导的肺部炎症反应中的表达

作 者: 李景栋
导 师: 金抗
学 校: 中国医科大学
专 业: 急诊医学
关键词: 百草枯中毒 热休克蛋白70 肺损伤
分类号: R363
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


HSP70在百草枯诱导的肺部炎症反应中的表达实验目的本研究将应用病理HE染色方法检测百草枯中毒大鼠肺组织病理变化及病理损伤程度,应用免疫组织化学及Western blot方法检测百草枯中毒大鼠肺组织中热休克蛋白(HSP70)的表达水平。探索百草枯致大鼠急性肺损伤的发生机制,对临床工作中百草枯中毒患者早期的救治提供有利的线索。实验方法72只健康Wistar大鼠随机平均分成3组,分别腹腔注射生理盐水(A组)、20 mg/kg百草枯(B组)和40 mg/kg百草枯(C组)。各组动物1、2、3、6、12和24 h随机编入6个观察时点。造模前,各组大鼠禁食12 h,不禁水。A组大鼠腹腔注射1 ml生理盐水,B组和C组大鼠用生理盐水将PQ稀释至1 ml腹腔注射染毒。每组分别于6个观察时点用10%水合氯醛腹腔注射后处死4只大鼠,留取肺组织标本,左侧肺组织置于4%多聚甲醛中固定12 h,用于HE染色,免疫组织化学染色。取右侧肺组织放于-70℃冰箱备用,Western blot方法测定肺组织中HSP70的表达。实验结果HE染色,染毒大鼠肺组织发生急性肺损伤、透明膜的形成和炎性细胞浸润等急性肺损伤典型的病理改变。免疫组织化学结果,B组中HSP70的表达于2 h开始升高,6 h达到峰值,24 h与A组无差别。C组中HSP70的表达于1 h开始升高,3 h达到峰值,24 h与A组无差别。且C组2、3和12 h的表达均显著高于B组。Western blot结果,B组大鼠2、3、6 h时点HSP70的表达在肺组织中较A组明显增强,其他时间点与A组比无明显差异。C组1、2、3、6、12 h时点HSP70的表达较A组均明显增强,2、3、12 h时点HSP70的表达较B组明显增强。结论百草枯诱导的急性肺损伤可引起支气管、细支气管和肺泡上皮细胞HSP70应激性表达,中毒剂量增大,肺损伤加重,HSP70的表达亦随之增强,而肺组织的病理损伤却没有显著性差异,提示HSP70对肺损伤起保护作用。

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