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四川省核盘菌对多菌灵抗药性检测及致病机理研究
作 者: 钱凌玉
导 师: 叶华智
学 校: 四川农业大学
专 业: 植物病理学
关键词: 核盘菌 抗药性 草酸毒素 细胞壁降解酶 dsRNA因子
分类号: S435.654
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
核盘菌(Sclerotinia.sclerotiorum)引起的菌核病是我国油菜及其他经济作物上的重要病害。为了解四川省核盘菌对多菌灵的抗药性情况、致病机理和dsRNA因子的携带情况,对四川省12个地区不同寄主的110个核盘菌进行了抗药性水平测定、交互抗性测定、抗药性菌株和敏感菌株的致病力比较,致病性不同的菌株产草酸毒素和细胞壁降解酶的测定,菌株中dsRNA因子的检测,其结果如下:以0.42μg/ml多菌灵为鉴别剂量,对110个核盘菌进行了抗药性测定,从四川省的11个地区检测出了31个抗药性菌株,占总菌株的28.18%。用菌落直径法测定了多菌灵对79个敏感菌株和31个抗药性菌株的EC50值,分别为0.1232μg/ml和0.1720μg/ml。抗药性菌株和敏感菌株的EC50值相差不大,对多菌灵的抗药性表现为抵抗水平。测定了对多菌灵具有抗性的核盘菌对苯并咪唑类其它杀菌剂的交互抗药性,结果表明所有测定的对多菌灵具有抗性的菌株对苯并咪唑类其它杀菌剂均表现出正交互抗药性。抗药菌株对离体油菜叶片的致病力与敏感菌株没有差异,油菜叶片经50μg/ml多菌灵溶液浸渍处理后,敏感菌株对叶片不能侵染,而抗药性菌株对这些叶片仍有一定致病力。测定了致病性强弱不同的菌株产草酸毒素和细胞壁降解酶能力,结果表明:菌株致病力与其产草酸的能力密切相关,相关系数为0.9856;菌株间产细胞壁降解酶的能力也存在明显差异,聚半乳糖醛酸甲酯酶(PMG)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)的活性与菌株致病性强弱没有规律性变化,而菌株产纤维素酶(Cx)的能力与其致病力密切相关,相关系数达0.9400。说明菌株产生的草酸毒素和纤维素酶是病菌的致病因子。检测了来自四川省各地的65个核盘菌菌株携带dsRNA因子的情况,发现有21个菌株含有dsRNA因子,占供试菌株的32.31%。其中13个低毒力菌株和8个中等毒力的菌株含有dsRNA,所有供试的强毒菌株均未检测到dsRNA。在呈阳性的21个菌株中呈现9种不同的dsRNA电泳模式。绝大多数低毒力菌株都有分子量大致为6.0kb的明亮条带,表明该片段与核盘菌毒力衰退紧密联系。未发现dsRNA因子的电泳模式与菌株地理来源、寄主和抗药性存在相关关系。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-9 前言 9-16 1 核盘菌对多菌灵抗药性研究现状 9-11 2 核盘菌致病机制研究 11-13 3 真菌病毒或dsRNA介导的植物病原真菌的弱毒现象 13-16 材料与方法 16-23 1 核盘菌抗药性研究 16-18 1.1 抗药性菌株的筛选 16-17 1.2 核盘菌对多菌灵抗药性水平鉴定 17-18 1.3 交互抗药性的测定 18 1.4 抗药菌株和敏感菌株的致病力比较 18 2 菌株产草酸毒素与致病性研究 18-19 2.1 供试菌株 19 2.2 菌株产草酸毒素的培养和提取 19 2.3 草酸的定量测定 19 3 菌株产细胞壁降解酶活性与致病性研究 19-21 3.1 供试菌株 19-20 3.2 产酶培养基 20 3.3 菌株体外细胞壁降解酶的培养和提取 20 3.4 细胞壁降解酶活性测定 20-21 3.5 菌株致病性的验证 21 4 菌株DSRNA的提取与电泳分析 21-23 4.1 供试菌株 21 4.2 菌丝体培养 21-22 4.3 dsRNA的提取与电泳 22 4.4 dsRNA的酶解测定 22-23 结果与分析 23-38 1 核盘菌对多菌灵的抗药性 23-32 1.1 四川省核盘菌对多菌灵的抗性频率 23-24 1.2 雅安地区核盘菌对多菌灵的抗药性频率 24 1.3 四川省核盘菌对多菌灵的敏感基线和抗药性水平 24-30 1.4 交互抗药性的测定 30 1.5 抗药菌株和敏感菌株的的致病力比较 30-32 2 菌株致病性与产草酸毒素的关系 32-33 3 菌株致病性与产细胞壁降解酶活性的关系 33-34 4 菌株致病性的验证 34-35 5 四川省核盘菌中DSRNA因子检测 35-38 5.1 核盘菌中dsRNA因子检测结果 35 5.2 菌株地理来源及寄主来源与dsRNA的关系 35 5.3 菌株抗药性与dsRNA的关系 35-36 5.4 菌株致病性与dsRNA的关系 36-37 5.5 dsRNA的酶解测定 37-38 结论与讨论 38-43 1 四川省核盘菌对多菌灵的抗药性 38-40 2 核盘菌产草酸毒素与致病性的关系 40 3 核盘菌产细胞壁降解酶与致病性的关系 40-41 4 四川省核盘菌中的DSRNA因子 41-43 参考文献 43-50 致谢 50
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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 经济作物病虫害 > 油料作物病虫害 > 油菜子(芸苔)病虫害
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